中国实验诊断学２０１１年１２月第１５卷第１２期 ＿＿＿——２０３７－－－—— 文章编号：１００７—４２８７（２０１２）１２—２０３７—０２ ＥＧＣＧ对肾间质纤维化的干预及机制分析 黎映静，刘星海 （深圳市龙岗区横岗人民医院，广东深圳５１８１１５） 肾小管的间质纤维化为肾脏慢性疾病的发展终 及远端。两结扎点中点行剪断，之后缝合皮肤。假 归，也是终末期肾功能出现衰竭的原因，其纤维化的 手术组采用相同入路分离输尿管，但不行结扎。假 病变程度严重的影响了肾功能的情况，所以寻求改 手术组及梗阻组在术前１ ｄ生理盐水灌胃，ＥＧＣＧ组 善和干预其纤维化的方法有着重要的临床意义ｌ１ Ｊ。 给予ＥＧＣＧ灌胃，剂量均为２０ ｍｇ／（ｋｇ・ｄ），连续３ ｄ。 近年来转化生长因子在纤维化的病变中作用已被肯 ＥＧＣＧ组术后第７ ｄ同剂量ＥＧＣＧ注射液静脉注射。 定，被称为纤维化的发展的重要决定因子ｌ２］，而绿茶 １．３检测方法术前，术后２ ｄ，４ ｄ、６ ｄ、８ ｄ测量大 中的儿茶素没食子酸酯（ＥＧＣＧ）抗氧化的作用最为 鼠体重、血肌酐值、２４ ｈ尿蛋白量、尿糖定性。术后 有效，是重要的非酶抗氧化剂。本文通过动物实验 ８ ｄ处死大鼠后左肾组织ＨＥ染色分析肾组织纤维 的方法分析了ＥＧＣＧ对大鼠的神纤维化的保护作用 化情况，免疫组化法测定随即１Ｏ高倍镜的视野内免 和机制，现报道如下。 疫组化（＋）的计数，半定量分析以（＋）细胞数在视 １资料和方法 ・ 野中的平均百分比计算ｌ３ Ｊ。 １．１对象和材料选取３Ｏ只雄性ＳＤ大鼠为研究对 １．４统计学方法数据均用ＳＰＳＳ １７．０统计分析软 象，随机分为３组，假手术组、梗阻组、ＥＣＧＣ组各１０ 件包进行处理。计量数据以元±ｓ表示，采用ｔ检 只，３组大鼠术前体重差异无统计学差异，均证实为 验，计数数据采用７ 检验。且Ｐ＜０．０５为对比差 健康大鼠。ＴＧＦ一』３免疫化试剂盒购自上海丰翔生物 异有统计学意义。 科技有限公司，ＥＧＣＧ试剂为本实验室自行提供。 ２ 结果 １．２模型制作梗阻组及ＥＧＣＧ组行单侧的输尿 ２．１体重改变３组大鼠术前及术后８ ｄ内体重变 管结扎术，乙醚对大鼠麻醉之后，７５％的乙醇消毒， 化情况见表１，组内比较，术前及术后８ ｄ各组间体重 腹正中偏左切口，切开皮肤及腹腔，对肾脏及输尿管 变化均用统计学差异（Ｐ＜０．０５），组问比较，３组大鼠 游离，组织钳托起左侧输尿管的中段，以止血钳夹住 术前体重无明显差异（Ｐ＞０．０５），术后８ ｄ，假手术组 后，４－０丝线自两端行结扎，结扎部位在肾盂的近端 体重＞ＥＣＧＣ组＞梗阻组，但差异无统计学差异。 表１ ３组大鼠术前及术后８ ｄ内体重变化情况（ ±ｓ。ｇ） ２．２ ＴＧＦ．Ｂ比较３组大鼠肾间质ＴＧＦ．１３（＋）细胞 润，基底膜显示光滑连续；梗阻组的问质存在大量的 计数比较见表２，由此可见３组大鼠中ＥＧＣＧ组ＴＧＦ． 炎性细胞的浸润，纤维组织明显增生，肾小管部分萎 ８表达明显低于梗阻组，而ＥＧＣＧ组低于假手术组， 缩，管腔出现闭塞或者扩张及坏死，小管的基底膜出 差异均用统计学差异（Ｐ＜０．０５）。 现不同程度的断裂及增厚，且小管壁明显变薄，小管 ２．３病理学差异术后第８天ＨＥ染色显示可见假 的上皮细胞的结构严重破坏；ＥＧＣＧ组的间质有少量 手术组的结构维持正常，其肾间质未见明显改变，肾 炎性细胞的浸润，纤维组织轻微增生，其肾小管的扩 小管的上皮细胞整齐排列，保持完整的细胞结构，小 张较轻，肾小球萎缩轻，且肾小囊有所扩张，保留了 管问的问隙紧密，其小管的间质未见炎性细胞的浸 部分正常小管及小球结构。 基金项目：２０１１年深圳市科学技术局，立项编号：２０１１０３２３８ ２０３８。＿。—— Ｃｈｉｎ Ｊ Ｄｉａ印，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２０１１，Ｖ０ｌ １５，Ｎｏ．１２ 表２ ３组大鼠肾间质ＴＧＦ－ＩＩ（＋）细胞计数比较（ ± ，％） ０．５８士０．１５ １．８５±Ｏ．２９ ２．９７±０．４１ 酶以及谷胱甘肽类过氧化物酶的活性，从而降低了 脂质过氧化及脂褐质的含量，并通过和金属离子的 假手术组 ＥＧＣＧ组 络合发挥了其较强的抗氧化的活性。有动物实验表 明＿６，６］ＥＧＣＧ能够通过对肾损害的大鼠体内的氧自由 基的清除作用来起到对脂质的过氧化作用的抑制， 梗阻组 ３讨论 同时也起到了促纤溶、抗凝的作用，改善了肾局部的 慢性的肾病的在进展中的病理变化主要表现在 血流动力，从而使尿素氮降低，延缓了肾脏的病理进 肾小球的硬化、肾小管的萎缩以及肾间质的纤维化， 行性的损害。其中肾功能损害的程度和肾脏的纤维化的病变程度 综上所述，本文通过动物实验的方法分析了 有着重要的关系＿４］。在慢性肾病所引发的肾小管的 ＥＧＣＧ对大鼠的神纤维化的保护作用和机制可以看 上皮细胞凋亡及肾间质的炎性细胞浸润、纤维细胞 聚集的过程中，均有着较多的促纤维化因子参与，细 胞外的基质生成逐步增多、而降解度则明显减少，从 而产生了肾间质的纤维化，肾功能也就出现了严重 的受损。ＴＧＦ—Ｊ３各器官的组织纤维化过程之中发挥 着重要作用，目前大多数的学者认为其是纤维化的 形成和发展启动枢纽＿５ｊ，为关键性的细胞因子，特别 是肾间质的纤维化的程之中ＴＧＦｑ３起着重要的作 用，其可以促进肾小球的系膜细胞出现大量增殖，系 膜的基质出现沉积，并诱导了肾小管的上皮细胞一间 质细胞出现转分，从而在参与到肾间质的纤维化的 进程之中。 茶多酚是从为茶叶内提取的天然的多酚类的复 合物，主要的生理活性包括抗肿瘤、抗氧化、清除自 由基、调节心血管的作用，有着较强的抗菌、抗病毒、 抗辐射的作用。茶多酚内的主要成分是儿茶素类， 其中ＥＧＣＧ是含量最高的有效成分，也是最强的抗 氧化作用成分，在体内外均能够有效的清除一氧化 氮、自由基等，以此提高了大鼠体内的超氧化物歧化 出，ＥＧＣＧ在大鼠动物试验中可见ＥＧＣＧ对大鼠肾脏 纤维化形成抑制作用明显，能够有效的降低ＴＧＦ．ｐ 的表达。 参考文献： ［１］徐志泉，易著文，何小解．没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠肾衰的 治疗研究进展［Ｊ］．现代医药卫生，２ＯＯ６，２２（１６）：２４７１． ［２］Ｆｏｒｉｎｏ Ｍ，Ｔｏｒｅｇｒｏｓｓａ Ｒ，ＣｅｏｌＭ，ｅｔ ａ１．ＴＧＦ－ｂｅｔａｌ ｉｎｄｕｃｅｓ ｅｐｉｔｈｅｌｉａ－ｍｅｓ・ ｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ，ｂｕｔ ｎｏｔｍｙｏｆｔｂｒ ｏｂｌａｓｔｔｒａｎｓｄｉｆｔｒｎｔｉａｆｉｏｎ ｏｆｈｕｍａｎ ｋｉｄ— ｎｅｙ ｔｕｂｕｌａｒ ｅｐ ｉｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｃｕｌｔｕｒｅ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ，２００６， ８７（３）：１９７． ［３］何小解，易著文，卢向阳，等．儿茶素对肾病综合征大鼠疗效研究 ［Ｊ］．肾脏病与透析。肾移植杂志，２００２，１１（４）：３４２． ［４］冯江超，邵志成，龚雨顺，等，没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠肾 间质纤维化的影响及机制探讨［Ｊ］．川北医学院学报，２０ｏ９，２４（６）： ５２３． ［５］廖明，李彦，舒伟，等．鸡尾酒疗法对大鼠肝星状细胞的增 殖及Ｉ型胶原、ＴＩＭＰ－ｌｍＲＮＡ表达的影响［Ｊ］．世界华人消化杂志， ０２１０，１８（９）：９３２． ［６］ｌｎａｇａｋｉ Ｙ，Ｈｉｇａｓｈｉ Ｋ，Ｋｕｓｈｉｄａ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｈｅｐａｔｏｅｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｓｕｐｐｒｅｓｓ— ｅｓ ｐｒｏｆｉｂｒｏｇｅｎｉｃｓｉｇｎａｌ ｔｒａｎｓｄｕｅｔｉｏｎ ｖｉａ ｎｕｃｌｅａｒ ｅｘｐｏｒｔ ｏｆ Ｓｍａ＆３ｗｉｔｈ ｇａｌｅｃｔｉｎ一７［Ｊ］．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００８，１３４：１１８０． （收稿日期：２０１１—１０—２０）
