中国兽医杂志２０１１年（第４７卷）第２期 ２５ 母猪免疫对断奶仔猪猪瘟抗体影响的观察 王长义 ，余功本。 （１．襄樊职业技术学院生物工程学院，湖北襄樊４４１０２１；２．襄樊正大种猪场，湖北襄樊４４１０６３） 中图分类号：￥８５２，４ ３ 文献标识码：Ｂ 丈章编号：０５２９ ６００５（２０１１）０２—００２５—０１ 在养猪生产中，为了提高仔猪猪瘟母源抗体水 平，很多养猪场在母猪产前１个月左右普遍强化一 仔猪。从前腔静脉采血并分离血清，供检测使用。 试验用疫苗为中牧股份成都药械厂生产的猪瘟 弱毒细胞苗（０６０６４３２一Ｉｉ）。 次猪瘟免疫，如果没有建立定期的抗体检测制度，我 们认为这种做法存在盲目性，可能会造成增加应激， 浪费疫苗，甚至仔猪猪瘟免疫抑制等风险，为了探究 这种做法对于提高仔猪母源抗体的实际效果，以及 猪瘟抗体ＥＩ ＩＳＡ试剂盒（ＩＤＥＸ公司产品，批 号４３１２０一Ｒ１４１）。每个试剂盒内包括下列试剂：包 被有猪瘟抗原的ＥＬＩＳＡ反应板５块（５×９６孔）、浓 Ａ爹［ １ ［ ２ ［ ３ ［ ４ 缩冲洗液（１０×）４８０ ｍＬ、阴性对照血清１ ｍＬ、阳性 观察产前母猪猪瘟抗体水平与所产仔猪母源抗体的 关系，我们在某大型种猪场进行了跟踪检测试验。 １材料与仪器 ５ ［ 对照血清１ ｍＬ、样品稀释液４５ ｍＬ、酶标单抗６Ｏ ｍＬ、底物溶液（ＴＭＢ）６０ ｍＬ、终止液６０ ｍＬ。 试验猪是某大型猪场的长白母猪和大、白二元 ２收稿日期：２００９ ０８—２６ ９６孔酶标仪、微量移液器、塑料离心管、离心机等。 方法与分组 在某大型种猪场选定３０头怀孕的长白母猪，分 平均阳性率为７６ ，表明重庆市猪附红细胞体感染 较为普遍。其中规模化养猪场的猪场附红细胞体阳 性率为６９％，低于非规模化养猪场的猪场附红细胞 体阳性率８４ ；而丘陵地区猪场附红细胞体阳性率 为７５ ，低于山区猪场附红细胞体阳性率８Ｏ 。对 猪附红细胞体阳性率差异性的ｔ检验结果表明，规 模化养猪场与非规模化养猪场差异显著（Ｐ＜ ０．０５），说明规模化养猪场的饲养管理和卫生条件相 对来说比较好，再加上严格的消毒措施，故感染率较 低。而丘陵地区和山区养猪场差异不显著（Ｐ＞ ０．０５），表明重庆市不同地区猪场的附红细胞体感染 率没有地区差异。 一～ ～一 ～～ ～一 ～一一 一一 一一 一～ 一ＰＣＲ方法具有敏感性高、特异性强的特点，可 以用于附红细胞体病急性感染和隐性感染的检测。 Ｇｗａｌｔｎｅｙ Ｓ Ｍ等ｌ７］和Ｍｅｓｓｉｃｋ Ｊ Ｂ等＿８ 分别报道了 基于Ｍ．ｓｕｉｓ的１６５ ｒＲＮＡ基 设计引物而建立的 ＰＣＲ诊断方法：Ｈｏｅｌｚｌｅ Ｌ Ｅ等ｌ＿ｇ 克隆并测序了Ｍ． ｓｕｉｓ基因组ＤＮＡ中一段可能的功能基因序列，并 证实该段基因所建立的ＰＣＲ诊断方法具有较高的 特异性 ］。本试验基于猪附红细胞体重庆株１６Ｓ ｒＲＮＡ基凶的序列特点，设计合成了Ｍ．ｓｕｉｓ的种 特异性引物，对重庆市１４个县区的ｌ ６５８份血液样 本进行了附红细胞体病的感染检测，结果检出ｌ ２６５ 例，与姬姆萨染色法的阳性符合率为９８ ，与鲜血 压片法的阳性符合率为９５ ，说明该ＰＣＲ方法具 有较高的特异性和准确性，可用于猪附红细胞体病 ２６ 中国兽医杂志２０１１年（第４７卷）第２期 为两组，每组１５头，在产前４周时抽取血样，分离血 清，分别测定其抗体水平，对其中的一组（免疫组）进 行猪瘟疫苗注射，按照每只猪４头份的剂量肌肉注 射，另外一组不注射猪瘟疫苗（对比组）。 对两组母猪所产仔猪在３周龄断奶时用 ＥＬＩＳＡ抗体阻断法进行血清抗体跟踪检测，免疫组 母猪和对比组母猪所产仔猪各５６头（每窝仔猪选定 ４头进行检测），并进行对比。 判断标准：被检样本的阻断率大于或等于 ４０ ，判为阳性（有猪瘟抗体存在）；小于或等于 ３０ ，判为阴性（无猪瘟抗体存在）。在３０ ～４Ｏ 之间，判为可疑。 ３结果与分析 ３．１结果免疫组１５头母猪在产前４周时血清巾 猪瘟抗体阻断率平均值为８９．５３％（见表１）；对比组 １５头母猪产前４周时猪瘟抗体阻断率平均值为 ８８．８７ （见表１）；两组在产前４周时的血清抗体水 平基本相当，没有明显差异。而其仔猪在３周龄时， 免疫组的仔猪抗体水平为８１．４４ ；对比组仔猪抗 体水平则为８３．５７％，还稍高于免疫组的抗体水平 （见表１）。两组数据经统计学分析无明显差异。 表ｌ免疫组和对比组抗体阻断率对比（％） ａ：差异不显著 ９２ ９０ 周抗体 ８８ 抗体 抗８６ 体８４ 值８２ ８０ ７８ ７６ 免疫组 对比组 图１免疫组和对比组抗体阻断率跟踪对比（％） ３．２ 分析从表１及图１可以看到，在母猪产前４ 周注射猪瘟疫苗不但没有提高所产仔猪在３周龄时 的母源抗体水平，反而比对照组的仔猪母源抗体水 平稍低。在产前母猪体内抗体水平较高时，希望增 加注射疫苗次数，以达到进一步提高其仔猪母源抗 体水平的做法是没有意义的。不但不能提高其仔猪 在断奶时的血清抗体水平，反而会降低仔猪母源抗 体水平。 在产前４周两组母猪的抗体水平都较高，因此， 仔猪体内有较高水平的母源抗体水平。仔猪的母源 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 抗体直到３周龄断奶时仍然保持了较高的水平，足 以抵御猪瘟病毒的侵袭。因此，仔猪的猪瘟初免时 问可以适当推迟。 另外，在试验过程巾还发现，免疫组母猪所产的 仔猪中，小现先天性肌痉挛（抖抖病）的病例较多。 约有１５ ～２Ｏ％的比例，一般呈整窝出现，部分仔 猪会死亡，大多数能够耐过，但生长受影，发生原因 有待专门研究。 ４讨论 ４．１母猪产前猪瘟免疫要慎重 由于猪瘟是威胁 养猪的一种严重的传染病，猪场为了母猪在生产时 能够保持较高的猪瘟抗体水平，以便使仔猪获得更 多的母源抗体，在产前１个月左右增加１次猪瘟免 疫，如果没有进行猪群的抗体水平监测和评估，这种 做法是比较盲目的，并且存在着一定的风险性。疫 苗作为一种抗原进入体内，遇到猪瘟病毒抗体后，会 被结合而失去其抗原效力，特别是猪体液中抗体水 平较高时，按正常的免疫剂量注射猪瘟疫苗不但不 会起到刺激机体产生抗体的作用，还可能降低免疫 对象的抗体水平，还存在着使仔猪出现免疫耐受的 风险［１］。本试验中也发现免疫组的仔猪出现先天性 肌痉挛症状的较多。 ４．２关注母源抗体，合理确定猪瘟初免时机从本 试验的检测结果看，对比组（母猪产前４周没有注射 猪瘟疫苗）的仔猪在３周龄断奶时血清中猪瘟抗体 阻断率均值（８３．５７ ，见表１）仅比其母猪在产前４ 周时血清抗体阻断率均值（８８．８７ ，见表１）低 ５．９６ 。因此，怀孕母猪猪瘟抗体水平较高时，仔猪 通过母乳获得的抗体是足以抵抗猪瘟病毒侵袭的， 并且，在哺乳期内一直能够保持较高的抗体水平。 这时如果实行免疫，势必会中和血清中的抗体，作用 不会明显 ］。仔猪３周龄断奶时进行猪瘟疫苗的初 免是很多猪场采用的习惯性做法，往往是基于对母 源抗体水平下降的经验判断而做出的防御性行动， 事实上，仔猪母源抗体水平的高低和变化规律受到 包括母猪免疫状况和仔猪本身机体状况在内的许多 因素影响，如品种、环境、饲料、药物和其他疫苗的相 互作用等等。因此，免疫计划应建立在对自己猪场 实施科学而规范的免疫监测的工作基础之上，才能 够收到预期的效果。 参考文献： Ｅｌｉ杜念兴．猪瘟免疫失败剖析ＥＪ］．畜牧与兽医，２００７，３９（１１）： ２５－２７． ［２］王琴，丁宜宝．猪瘟免疫失败主要原因解析［Ｊ］．中国兽医杂志， ２００５．ｄ１（６）．６］６３．
