论著・临床辅助检查 Ｃ ＩＮＥｓＥ Ｃ０ＭＭＵＮＩ ＴＹ Ｄ０ＣＴ０ Ｓ ＨＢｓＡｇ阳性人群ＨＢＶ—ＤＮＡ定量测定的调查研究 示，两组以上均数比较采用方差分析，阳 赵岩 赵颖 现并不能完全代表病毒水平的降低或病 毒复制停止。这些患者可能伴有ＨＢＶ前 Ｃ区的变异，这种变异导致不能产生 性率的比较用ｕ检验。 结果 ７３４０００甘肃张掖市人民医院检验科 ７３０９００白银市银光化工集团公司医院 ＨＢｅＡｇ但不影响ＨＢＶ复制和传播 Ｊ。 ＨＢＶ感染标志物的检测是乙肝诊断的基 本标准，同时ＥＬＩＳＡ法操作简单，耗时 短，成本低，不同试剂盒之间差异小。 ＨＢＶ—ＤＮＡ在临床治疗监测的多个方面 具有指导意义，但该技术本身对实验室条 １７４６例ＨＢｓＡｇ阳性者分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ 四个年龄组，Ｉ、Ⅱ、Ⅲ个血清标志物监测模式， 其中模式Ｉ四个年龄组组间ＨＢＶ—ＤＮＡ测 定结果有显著差异（Ｆ＝９．９０，Ｐ＜０．０１），模 摘要 目的：通过收集ＨＢｓＡｇ阳性人 式Ⅱ和模式Ⅲ４个年龄组组间无差异（Ｆ＝ １．５９，Ｆ＝０．９６，Ｐ＞ ０５）。 群血清进行ＨＢＶ—ＤＮＡ定量测定，分析 ＨＢＶ感染人体后不同年龄组、不同血清 件及操作人员要求很高。因此，乙肝免疫 标志物和ＨＢＶ—ＤＮＡ检测对乙肝的诊断 １７４６例ＨＢｓＡｇ阳性者４个年龄组３ 标志物模式病毒复制状况。方法：乙肝血 清学标志物检查采用ＥＬＩＳＡ法，ＨＢＶ— ＤＮＡ检测采用实时荧光定量ＰＣＲ法。结 果：Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四个年龄组模式Ｉ（ＨＢｓＡｇ ＋，ＨＢｅＡｇ＋／ＨＢｓＡｇ＋，ＨＢｅＡｇ＋，ＨＢｅＡｂ 个血清标志物模式ＨＢＶ—ＤＮＡ检测阳性 率比较，模式Ｉ与模式Ⅱ（ｕ＝９．６０，Ｐ＜ ０．叭）、模式Ｉ与模式Ｉｌｌ（ｕ＝４．６１，Ｐ＜ 和治疗都具有重要意义，不能相互替代。 本研究显示ＨＢｓＡｇ阳性者Ａ、Ｂ、Ｃ、 Ｄ ４个年龄组Ｉ、Ⅱ、Ⅲ个血清标志物监 测模式中，模式Ｉ四个年龄组组间ＨＢＶ —０．０１）均有显著性差异，模式Ⅱ与模式Ⅲ （ ＝２．０７，Ｐ＜０．０５）有差异，模式Ｉ较模 ＤＮＡ测定结果有显著差异，说明随着 ＋）间有显著差异，Ｆ＝９．９０（Ｐ＜０．０１）， 模式ＩＩ（ＨＢｓＡｇ＋，ＨＢｅＡｂ＋／ＨＢｓＡｇ＋， ＨＢｅＡｂ＋，ＨＢｃＡｂ＋）和模式ＩＩＩ（ＨＢｓＡｇ ＋，ＨＢｃＡｂ）组间无差异，ＨＢＶ—ＤＮＡ阳 性率（检测结果＞１．０×１０３ｃｏｐｉｅｓ／ｍｌ为 阳性）模式Ｉ与模式Ｉ／（“＝９．６０，Ｐ＜ ０．０１）、模式Ｉ与模式Ⅲ（／ｚ＝４．６１，Ｐ＜ 式Ⅱ与模式Ⅲ的ＨＢＶ复制活跃、传染性 强，模式Ⅲ又较模式ｌＩ ＨＢＶ复制活跃、传 染性强，见表１。 讨论 感染时间延长，病毒复制呈下降趋势。人 体感染乙肝病毒后感染过程分３个连续 阶断，高水平ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶ—ＤＮＡ的免 疫耐受期，中等／低水平ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶ— ＤＮＡ的免疫清除期，无ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶ— ＨＢｃＡｂ是乙型病毒性肝炎流行病学 调查的良好指标 。ＨＢＶ—ＤＮＡ定量检 测是乙型肝炎患者诊断、治疗和随访的基 ＤＮＡ的残余整合期，表明乙肝病毒感染 人体ＨＢｓＡｇ的产生与病毒的消失是一个 连续动态过程 Ｊ，病毒的清除与宿主、病 ０．０１）之间均有显著性差异，模式Ⅱ与模 式Ⅲ（“：２．０７，Ｐ＜０．０５）有差异。结论： 础，特别是抗病毒治疗过程中，实时荧光 定量ＰＣＲ具有高敏感度，高特异度和较 宽的线性范围，ＨＢＶ—ＤＮＡ定量检测结 果用于抗病毒治疗监测。高灵敏度的 ＨＢＶ—ＤＮＡ检测是隐匿性ＨＢＶ感染的 诊断依据 Ｊ。本研究用酶法对１７４６例 ＨＢｓＡｇ阳性者进行血清标志物检测。酶 法是临床诊断乙肝的传统手段，一般认为 ＨＢｅＡｇ阳性提示ＨＢＶ复制活跃和传染性 强，ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ转阴，ＨＢｓＡｂ及ＨＢｅＡｂ 的出现是机体清除ＨＢＶ的标志，并提示 具有ＨＢＶ的免疫力 Ｊ。从本组资料看 ＨＢｅＡｇ阳性病例ＨＢＶ—ＤＮＡ阳性率最 高，达１００％，与各家报道基本一致。 ＨＢｅＡｇ阴性病例中ＨＢＶ—ＤＮＡ阳性率仍 高达５２．２％，并且Ａ组中病毒载量达 毒及抗病毒药物的使用等多种因素有关。 参考文献 １ 叶应妩，王毓三，申子瑜 全国临床检验操 作规程．南京：东南大学出版社，２００６． ２陈瑜，夏宁邵，李兰娟．病毒性肝炎病原学 实验诊断研究进展．中华检验医学杂志， ２００９，３２（９）：９７２—９７６． ＨｂｅＡｇ阳性者病毒成高水平复制状态，并 且不同年龄组间有差异。ＨＢｅＡｂ阳性和 无ＨＢｅＡｂ者不能完全代表无病毒复制。 乙肝免疫标示物和ＨＢＶ—ＤＮＡ的检测不 能相互替代。 关键词ＨＢｓＡｇ阳性ＨＢＶ—ＤＮＡ定量 调查研究 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７—６１４ｘ．２０１０． ０８】７１ ３程刚，何蕴韶，周新字．荧光定量聚合酶链 反应检测乙型肝炎病毒．中华医学检验杂 志，１９９９，２２（３）：１３５—１３８． ４张汉荣，刘新钰，孙梅等．乙型肝炎病毒Ｃ 基因启动子和前Ｃ基因变异与ＨＢｅＡｇ含量 和肝炎病情的临床研究．临床肝胆病杂志， ２００３，１９（５）：２９０—２９１． 资料与方法 ２００６年１月～２００９年８月来我院体 检或就诊者，经ＥＬＩＳＡ法确诊ＨＢｓＡｇ阳 性，并且采用实时荧光定量ＰＣＲ法进行 ５蒋冬香，陈刚．ＨＢＶ感染者ＨＢＶ—ＤＮＡ与 血清标志物之间的关系．实用肝脏病杂志， ２００４，７（４）：２１７． ＨＢＶ—ＤＮＡ定量检测共１７４６例，其中男 １１８９例，女５５７例。 ５．３３０，仍在较高水平。可见ＨＢｅＡｂ的出 标本采集：真空管静脉采血３ｍｌ，２小 时内分离血清，低温柜保存备用，标本无 溶血、黄疸、脂血。 组剐年龄 Ａ《１４ ９４ １ ９ｌ｜ 目１釉 磊 瓤Ｕ 丽３８．１ ９ ｍ ｊ ７ ７７． 检测方法：酶免法，实时荧光定量 ＰＣＲ检测法。 。 ８ Ｂ１５—３０ ３７７ ３ ｉ嚣囊Ｏ０鑫钾 １７９ ５０．１ ７３ ４４ ６０．３ 统计学分析：数据采用ＳＰＳＳ１０．０软 件进行统计学分析，阳性率对比采用 检验，定量资料的对数值采用Ｘ±Ｓ表 Ｃ ３１￣５０ １２７ １２７ ｌ１０口１０ Ｄ＞５０警 ５ １５ 善囊 １（１ ０ ４４８ ¨¨ ２４８ ５５，４ 一ｌｌ２蠢 ５５ ４９．ｉ 鸶≯。 ９６ ６０ ６２．５ １７ １３ ７６ 孳 ｌ４４中国社区医师・医学专业半月刊２０１０年第８期（第１２卷总第２３３期
