维普资讯 http://www.cqvip.com ・９０・ 医结合肾病杂志２０Ｑ！生 旦箜墨鲞箜 塑 ！ ：垦 望 Ｑ！： Ｑ ：墨！ ： 血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂Ｃ在各期 慢性肾脏病诊断中的应用价值 魏学全①② 马清明② 赵学智①△ 徐成刚① 孙琳琳① 梅长林① ［摘要］ 目的：探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂ｃ（Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ）与血清肌酐（Ｓｃｒ）在不同时期慢性肾脏病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｋｉｄｎｅｙ ｄｉｓｅａｓｅ，ＣＫＤ）患者肾功能检测中的敏感性，评价血清ＣｙｓｔａｔｉｎＣ在各期ＣＫＤ患者中的临床应用价值。方法：对１２９例不同时 期ＣＫＤ患者检测Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ，以９９ｍＴｃ—ＤＴＰＡ清除率测得的肾小球滤过率（ＧＦＲ）作为诊断评价的金指标，乳胶颗粒增强免疫 透射比浊法检测血清ＣｙｓｔａｔｉｎＣ浓度，用全自动生化分析仪检测血清Ｓｃｒ。结果：与正常对照组比较，各期ＣＫＤ组ＣｙｓｔａｔｉｎＣ 值均有统计学差异，而各期ＣＫＤ组Ｓｃｒ值与正常组比较，ＣＫＤ１、ＣＫＤ２期无统计学差异，ＣＫＤ３～５期才有统计学差异；各期 ＣＫＤ组间比较显示Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ值均有统计学差异，而Ｓｃｒ值差异仅局限于ＣＫＤ３～５期。并且血清Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ，Ｓｃｒ与” Ｔｃ— ＤＴＰＡ清除率呈显著相关，尤其Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ相关性更好。结论：血清Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ在各期ＣＫＤ中均能准确反映肾小球滤过功能， 尤其能敏感提示早期肾功能损害，可成为判断肾功能损害程度的敏感指标，而且方法简便、敏感。 ［关键词】 半胱氨酸蛋白酶抑制剂Ｃ慢性肾脏病 肾功能 Ｓｔｕｄｙ ｏｌｉ Ｖａｌｕｅ ｏｆ Ｓｅｒｕｍ Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ ｆｏｒ Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ Ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ Ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ Ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓｅａｓｅ ＷＥＩ Ｘｕｅｑｕａｎ，ＭＡ Ｑｉｎｇｍｉｎｇ，ＺＨＡＯ Ｘｕｅｚｈｉ，ｅｔ ａｌ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＮｅｐｈｒｏｌｏｇｙ，Ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｃｈａｎｇｚｈｅｎｇ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｇｈａｉ（２００００３） ＡＢＮＩ＇ＲＡＣＩ＂Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｗａｓ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｔｏ ｓｔｅｉｍａｔｅ ｔｈｅ ｖａｌｕｅ ｏｆ ＣｙｓｔａｔｉｎＣ ｃｏｍｐａｒｄ ｅｗｉｔｈ ｓｅｒｕｍ ｃｒｅａｔｉｎ，ａＳ ａ ｍａｒｋｅｒ ｆｏｒ ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔ ｉｔｗｈ ｃｈｒｏｎｉｃ ｋｉｄｎｅｙ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｓｅｒｕｍ ｓａｍｐｌｓ ｅｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ １２９ ｃａｓｅｓ ｗｉｔｈ ｖａｒｉｏｕｓ ｓｔａｇｅ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｋｉｄｎｅｙ ｄｉｓｅａｓｅ，ａｎｄ ＧＦＲ ＷａＳ ｅｓｔｉｍａｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｐｌＳｍａ ｃｌａｅａｒａｎｃｅ ｏｆ ９９ｍ Ｔｃ—ＤＴＰＡ．Ｓｅｒｕｍ ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ＷａＳ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｕｓｉｎｇ ｌａｔｅｘ ｐａｒｔｉｃｌｅ ｅｎｈａｎｅｅｄ ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙ，ｓｅｒｕｍ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ ＷａＳ ｄｅｔｅｃｔｄ ｅｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ ｕｓｉｎｇ Ａｕｔｏｍｅｆｉｃ ｂｉｏｅｈｅｍｉｅｓｔｒｙ Ａｎａｌｙｚｅｒ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｓｅｒｕｍ Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ ｌｅｖｅｌｓ ｗｅｒｅ ｆｏｕｎｄ ｌｏｗｅｒ ｉｎ ａｌｌ ｔｈｅ ＣＫＤ ｇｒｏｕｐｓ ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ｃｏｎｔｒｏｌｓ （Ｐ＜０．０５ ｉｎ ｅａｃｈ）．Ｂｕｔ ｓｅｒｕｍ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅｌｅｖｅｌｓｗｅｒｅｏｎｌｙｆｏｕｎｄ ｓｉｎｉｇｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｔｈｅｇｒｏｕｐｓｆｒｏｍＣＫＥ０ ｔｏＣ ．ｏｍｐａｒｃｄ ｅｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌｓ．Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ９９ｍ Ｔｃ—ＤＴＰＡ ｗｅｒｅ一０８６２ ｆｏｒ ｓｅｒｕｍ Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ，一０．７４５ ｆｏｒ ｓｅｒｕｌＴｌ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ．Ｃｏｎ－ ｃｌｕｓｉｏｎ：Ｓｅｒｕｍ Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ ｉＳ ａ ｍｏｒｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｍａｋｅｒ ｆｏｒ ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ ｇｌｏｍｅｒｕｌｒ ｆｉａｌｔｒａｔｉｏｎ ｆｔｍｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃａｎ ｓｈｏｗ ｅａｒｌｙ ｒｅｎａｌ ｉｍｐａｉｒ— ｍｅｎｔｉｎ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｎｉｃ ｋｉｎｅｙ ｄｉｄｓｅａｓｅ． ＫＥＹⅥ叼ｌＲＤＳ Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ Ｃｈｒｏｎｉｃ ｋｉｎｅｙ ｄｉｄｓｅａｓｅ Ｇｌｏｍｅｒｕａｌ ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｆｕｎｃｔｉｏｎ 肾小球滤过率（ＧＦＲ）是评价肾功能的重要指标， 比血清Ｓｃｒ更灵敏反应肾小球滤过功能受损的血清标 菊粉清除率是测定ＧＦＲ的“金标准”，但患者须静脉 志物，但针对Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ在患者慢性肾脏病（ｃｈｒｏｎｉｃ 滴注菊粉且测定方法复杂易受葡萄糖干扰。核素标 ｋｉｄｎｅｙ ｄｉｓｅａｓｅ，ＣＫＤ）不同肾功能改变中的对比研究在 ９ｍＴｃ—ＤＴＰＡ清除率测得的ＧＦＲ 记物清除率测定准确，但对检测技术及设备的要求较 国内尚少。本文以９高，仅在少数大医院核医学科应用，不适于临床常规 测定。临床上常用血清Ｓｅｔ作为判断ＧＦＲ的指标，但 此方法易受内源性和分析时的多种因素影响ｕ Ｊ，尤其 在ＣＫＤ早期诊断时不够敏感。血清半胱氨酸蛋白酶 抑制剂（Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ）是一种非糖基化的碱性低分子量 蛋白质，在体内可自由通过肾小球并在近端肾小管被 分解代谢，其产生速率恒定，不受炎症、肌肉量、性别 等因素影响 Ｊ。许多研究结果表明Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ是一项 ①②△第二军医大学附属长征医院肾内科，肾脏病研究所甘肃省临夏州人民医院（临夏７３１１００） 通讯作者 （上海为金标准，应用乳胶颗粒增强免疫透射比浊法对各期 ＣＫＤ患者的血清Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ水平作了测定，比较Ｃｙｓ— ｔａｔｉｎ Ｃ与Ｓｃｒ在评价ＣＫＤ肾小球滤过功能中的应用 价值。 资料与方法 １正常对照组４６例，无慢性肾脏病及糖尿病、 高血压等相关病史，其中男２４例，女２２例，平均年龄 ２００００３） 维普资讯 http://www.cqvip.com 医结合肾病杂志２００７生２ 筮 鲞筮２塑Ｃｊ！ ： 型 Ｚ： ！！： Ｑ： ・９１ ・ （４０．６８±２６．６０）岁。 ２慢性肾脏病患者组选取２００５年～２００６年 间于我院肾内科门诊及住院患者１２９例，其中男 ６６例，女６３例，平均年龄（４４．６８±１８．３５）岁。按照患 者ＧＦＲ及ＣＫＤ分期分成５组；ＣＫＤ分期根据２００２年 美国Ｋ／ＤｇＱＩ专家组提出的分期标准。 ３方法以血浆中 Ｔｃ—ＤＴＰＡ清除率为金标 准，于ＧＥＳＴＡＲＣ ６ 匝３００计数器上测９９ｎ Ｔｃ—ＤＴＰＡ 的放射活性。采用空服血清（测前一２０℃保存，１个 月之内完成），用乳胶颗粒增强免疫透射比浊法检测 血清Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ浓度，试剂盒为广东虹业抗体科技有 限公司提供的商品试剂盒。仪器为美国德灵公司ＢＮ 一１００全自动特定蛋白分析仪。用全自动生化分析仪 检测血清Ｓｃｒ。 ４统计学方法各组数据统计以（ ±ｓ）表示， 应用ＳＰＳＳ １０．０统计软件进行相关性及统计学分析； 均数差异性用ｔ检验，以Ｐ＜０．０５为有统计学意义。 结 果 １正常对照组与不同ＣＫＤ组及不同ＣＫＤ组间 血清Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ、Ｓｃｒ平均值比较 检测结果见表１。 经统计分析发现，与正常对照组比较，各期ＣＫＤ组 Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ的值均有统计学差异，其中ＣＫＤ１期组与 正常组比较（Ｐ＜０．０５），其余各组（Ｐ＜０．０１）；而各期 ＣＫＤ组Ｓｃｒ值与正常组比较，ＣＫＤ１、ＣＫＷ２期无统计 学差异（Ｐ＞０．０５），ＣＫＤ３～５期时才有统计学差异 （Ｐ＜０．０１）；另外各期ＣＫＤ组间比较显示Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ 值均有统计学差异（Ｐ＜０．０１），而Ｓｃｒ值差异仅局限 于ａＫＤ６～５期（Ｐ＜０．０１）。 表１ 正常对照组与不同ＣＫＤ期各组患者血清 Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ、Ｓｅｔ、ＧＦＲ值的检测比较（ ±Ｓ） 组别 Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ（ｍｇ／Ｌ） Ｓｅｒ（ｔａｍｏｌ／Ｌ） ＧＦＲ（ｍｌ／ｍｉｎ） ＣＫＤ１期３６ １．３６±０．４３ ９１．２±４１．２１ ９９．６９±２６．２７ Ｑ 期 １８ ２．１２±０．６８一 １０４．０＋－７４．４０ ７７．２６±２８．９４ ＣＫＥＢ期 ２７ ２．８９±Ｏ．９８ △△１４９．Ｏ±６３．５６ △△ ４８．１４±１７．３７ ＣＩＫＤ４期 ２０ ３．５０－＋１．２３ ３６８．０－＋１６８．０１ ３２．７９－＋１１．５４ （ＫＤ５期２８ ４．５４±１．８７ △△９１２．０±３６６．０９ △△１１．４１＋－８．６７ 注：与正常对照组比较， Ｐ＜０．０５，一Ｐ＜０．０１；各组间比较， △Ｐ＜０．０１ ２血清Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ，Ｓｃｒ与９９ Ｔｃ—ＤＴＰＡ清除率 的相关性分析 ２个指标与 Ｔｃ—ＤＴＰＡ清除率均 呈显著相关性（见图１），相关系数（ｒ）分别为一０．８６２、 一０．７４５。 讨 论 Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ是一种非糖基碱性蛋白质，由１２０个 氨基酸组成，它能从肾小球自由滤过，然后由近曲小管 毒 ＴＣ—ＤＩＰＡ清除率（ｍｌ／ｍｉｎ） 图１ ＴＣ—ＤＴＰＡ清除率与Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ、 Ｓｃｒ的相关性分析 重吸收并迅速分解代谢，故其血浆浓度取决于个体的 ＧＦＲ Ｊ。Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ在体内生成速度恒定，应用乳胶 颗粒增强免疫透射比浊法检测Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ方法简便、 结果准确，既无需接触同位素又可避免血清肌酐检测 过程中不易正确留取标本及受内源性因素干扰而影 响结果的可靠性［ ．５ Ｊ。大量研究显示，ＧＦＲ下降时 Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ的升高比Ｓｃｒ早，通过Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ的变化比 Ｓｃｒ更容易观察到ＧＦＲ的细微变化，Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ是优 于Ｓｅｔ的ＧＦＲ内生标志物Ｌ６ Ｊ。但也有不同的报 告 Ｊ目前，国内已有不少实验研究报道，但多限于方 法学评价，临床应用研究尚不多见。 临床对于肾功能损坏的速度特别关注，因为它对 于临床决定治疗的时机非常关键。临床实践证明，当 肾脏滤过功能下降５０％时，Ｓｃｒ才可见升高，此外Ｓｃｒ 受年龄、肌肉量的影响大，不能灵敏反映ＧＦＲ的下 降。Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ可能是一个较Ｓｃｒ理想反映ＧＦＲ的血 清学标志物。尤其更能敏感提示早期的肾功能损害。 本研究发现各期ＣＫＤ患者间，以及与正常对照组比 较Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ值有统计学差异，而Ｓｃｒ值的差异仅局 限于ＣＫＤ３～５期间。并且血清Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ，Ｓｃｒ与 ‰ Ｔｃ—ＤＴＰＡ清除率呈显著相关，尤其Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ相关 性更好，相关系数（ｒ＝一０．８６２）明显大于后者 （ｒ＝一０．７４５）。提示在慢性肾脏病不同程度肾功能损 害尤其在肾功能损伤的早期阶段时，血清Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ更 能准确反映肾小球滤过功能，给临床及时选用不同的针 对性的治疗措施提供依据；有临床推广应用价值。 维普资讯 http://www.cqvip.com ・９２・ 医结合・肾病杂志２００７生２旦筮墨鲞筮 塑ｇ！ ２Ｑ ！！ ！：垦 ： ６．Ｄｈａｘｎｉｄｈａｒｋａ ＶＲ，Ｋｗｏｎ Ｃ，Ｓｔｅｖｅｎｓ Ｇ．Ｓｅｒｕｍ Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ ｉｓ ＳＵ— 参考文献 ｐｅｒｉｏｒ ｔｏ ｓｅｒｏｒｎ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ ａＳ ａ ｍａｒｋｅｒ ｏｆ ｋｉｄｎｅｙ ｆｎｃｔｉｕｏｎ：ａ ｍｅｔａ １．方炜，张庆怡．。肾小球滤过率的检测及进展．国外医学‘泌尿 系统分册，１９９７，１７（２）：１７８—１８０． ２．Ｒａｎｄｅｒｓ Ｅ，Ｅｒｌａｎｄｓｅｎ ＥＪ．Ｓｅｒｕｍ Ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ ａｓ ａｎ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ— ｍａｒｋｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｎａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ—ａ ｒｅｖｉｅｗ．ＣＩｉｎ Ｃｈｅｍ Ｌａｂ Ｍｅｄ， —ａｎａｌｙｓｉｓ．Ａｍ Ｊ Ｋｉｄｎｅｙ Ｉ）ｉｓ，２００２，４０（２）：２２１—２２６． ７．Ｎｅｗｍａｎ ＤＪ，Ｔｈａｋｋａｒ Ｈ，Ｅｄｗａｒｄｓ ＲＧ，ｅｔ ａ１．Ｓｅｒｕｍ ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ａｕｔｏｍａｔｅｄ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ：ａ ｍｏｒｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｍａｒｋｅｒ ｏｆ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ＧＦＲ ｔｈａｎ ｓｅｒｏＨ１ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ．Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ，１９９５，４７ １９９９，３７（４）：３８９—３９５． ３．Ｆｉｎｎｅｙ Ｈ，Ｎｅｗｍａｎ ＤＪ，Ｇｒｕｂｅｒ Ｗ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｉｔｉａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｂｙ ｐａｒｔｉｃｌｅ——ｅｎｈａｎｃｅｄ ｉｍｍｕｎｏｎｅｐｈ— （１）：３１２—３１８． ８．Ｃｏｉｌ Ｅ，Ｂｏｔｅｙ Ａ，Ａ１ｖａｒｅｚ Ｌ，ｅｔ ａ１．Ｓｅｒｕｍ ｃｙｓｔａｔｉｎ Ｃ ａｓ ａ ｎｅｗ ｍｓｒｋｅｒ ｆｏｒ ｎｏｎｉｎｖａｓｉｖｅ ｅｓｔｉａｔｉｍｏｎ ｏｆ ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｅｌｏｍｅｔｒｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｂｅｈｒｉｒｉｇ ｎｅｐｈｅｌｏｍｅｔｅｒ ｓｙｓｔｅｍｓ（ＢＮＡ，ＢＮＩ）． ａｉｎ Ｃｈｅｍ，１９９７，４３（６ Ｐｔ １）：１０１６—１０２２． ａｎｄ ａｓ ａ ｍａｒｋｅｒ ｆｏｒ ｅａｒｌｙ ｒｅｎａｌ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ．Ａｍ Ｊ Ｋｉｎｅｙ Ｄｉｄｓ． ２０００，３６（１）：２９—３４． ９．ＯｄｄｏｚｅＣ，Ｍｏｒａｎｇｅ Ｓ，ＰｏａｕｇａｌＨ，ｅｔ ａ１．ＣｙｓｔａｔｉｎＣｉｓｎｏｔｍｏｒｅ— ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｔｈａｎ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｅａｒｌｙ ｒｅｎａｌ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ｉｎ— ４．黄萍，李国贤，黄爱霞．测定血清胱抑素一Ｃ在评估肾功能中 的意义．临床肾脏病杂志，２００３，３（２）：６０—６３． ５．许讯辉，邹建洲，丁小强，等．血清胱抑素一Ｃ：一种简便测定 肾小球滤过率的标志物．中国临床医学，２００１，８（３）：２４０— ２４】． ａｔｐｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｄｉａｂｅｔｓ．Ａｅｍ Ｊ Ｋｉｎｅｙ Ｄｉｄｓ，２００１，３８（２）：３１０— ３１６． （收稿：２００６—０７—１１修回：２００６—０８—２１） ・短篇论著・ 冬虫夏草在肾间质纤维化大鼠模型中的作用 及其对ＴＧＦ—ｌ３１ 仅一ＳＭＡ的影响 闵亚丽① 于 黔① 肖 俊② ［摘要］ 目的：探讨冬虫夏草在肾小管间质纤维化大鼠模型中肾脏保护作用及其可能的作用机制。方法：采用单侧输 尿管结扎术（ＵＵＯ）致肾小管间质纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为３组：假手术组、模型组、虫草治疗组。手术后第９ ｄ处 死各组大鼠，用免疫组化半定量检测各组肾脏ＴＧＦ一岛、ａ—ＳＭＡ、Ⅳ型胶原的表达，Ｍａｓｓｏｎ染色评定各组肾小管间质损害程 度。结果：模型组ＴＧＦ一岛、ａ—ＳＭＡ、Ⅳ型胶原的表达及肾小管间质损伤指数明显高于假手术组（Ｐ＜０．０１），而虫草治疗组 明显低于模型组（Ｐ＜０．０１）。结论：冬虫夏草可能通过下调ＴＧＦ一８ｌ，抑制肾小管上皮细胞、成纤维细胞转化为成肌纤维细胞 防治。肾小管问质纤维化。 ［关键词】冬虫夏草 肾小管间质纤维化ＴＧＦ一 ａ—ＳＭＡⅣ型胶原 肾纤维化是各种肾脏疾病慢性进展直至发生终末期。肾衰 维化模型手术方法如下：用２％戊巴比妥钠按４０ ｍｇ／ｋｇ腹腔注 竭的共同通路。肾小管间质病变程度是决定１０年肾脏存活率 射麻醉，麻醉生效后将大鼠固定、去毛备皮，打开腹腔找到左侧 的最重要的影响因素，其影响程度较。肾小球病变的严重程度更 输尿管，结扎后缝合切口，关闭腹腔。假手术组打开腹腔后分 为重要…。ＵＵＯ模型是一种致肾小管间质纤维化的较成熟的 离左侧输尿管，并不结扎即关闭腹腔。于手术后第９ ｄ处死各 部分用１０％中性福尔 模型，ＴＧＦ一 被公认为是致纤维化的重要因子之一，ａ—ＳＭＡ 组大鼠。各组分别取梗阻侧肾组织标本，是成肌纤维细胞的标记物。冬虫夏草是我国传统的补肾壮阳 药，但关于冬虫夏草在肾小管间质纤维化中的作用很少报道。 型中的作用并对其抑制纤维化进展的可能机制进行探讨。 材料与方法 马林固定３ ｄ后脱水、石蜡包埋、切片。 ２半定量免疫组化检测ＴＧＦ一８、ａ—ＳＭＡ及Ⅳ型胶原表 ａｎ厚的石蜡切片常规脱蜡至水，用蒸馏 我们在本试验中观察了冬虫夏草在肾小管问质纤维化大鼠模 达采用ＳＡＢＣ法。３ ｔ水新鲜配制的３％Ｈ２Ｏ２消耗内源性过氧化酶，将切片浸入 Ｔｒｉｓ—ＥＤＴＡ（ｐＨ ９．０）液中在微波炉进行抗原热修复３０ ｍｉｎ （其中高火２０ ｍｉｎ，中火１０ ａｉｒｎ），室温冷却２０ ｍｉｎ，或０，４％胃 ｎ。滴加正常山羊血清室温 雄性Ｗｉｓｔｒ大鼠（由贵阳医学院动 酶（Ⅳ型胶原）３７℃消化３０ ｍｉａｎ圭寸闭非特异性抗原，甩去多余的液体后滴加兔抗人 物室提供，二级），体重（１３６．６８±４．８５）ｇ，常规下饲养数天后随 ２０ ｍｉ机分为３组：假手术组、模型组、虫草治疗组，每组各６只。虫 ＴＧＦ一 多克隆抗体或小鼠抗人ａ—ＳＭＡ多克隆抗体（Ⅳ型胶 １动物模型及分组均按１：１００稀释，４℃冰箱过夜，分 草治疗组于手术前１ ｄ开始按２．５ ｇ・ｋｇ ・ｄ一 虫草水提取液 原滴加小鼠抗人Ⅳ型胶原），灌胃给药，假手术组、模型组正常进水。ＵＵＯ致肾小管间质纤 别加生物素标记羊抗兔 ；Ｇ（ＴＧＦ一岛）、马抗小鼠ＩｇＧ（ａ—ＳＭＡ）、 ①②贵州省贵阳市第一人民医院肾内科 （贵阳５５０００４） 中山大学附属第一医院。肾内科博士研究生（广州５１００８０）
