维普资讯 http://www.cqvip.com 第１３卷第５期 中国实验方剂学杂志 Ｖ０１．１３。Ｎｏ．５ ２００７年５月 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｅ Ｍａｙ，２００７ 毛细管气相色谱法测定薄荷煎剂中薄荷脑和 （一）一薄荷酮的含量及变化 葛尔宁 （浙江中医药大学中心测试室，浙江杭州 ３１００５３） ［摘要］ 目的：测定薄荷煎剂中薄荷脑和（一）一薄荷酮等有效成分的煎出量及随时间的变化规律。方法：采用毛细管气相 色谱法；毛细管柱（岛津ＦＱＰ－４９４—１，２５ ｍ×０．２ ｍｍ），柱温：６ｏ℃保持２ ｍｉｎ，５℃・ｍｉｎ 升温至８５℃，１０℃・ｍｉｎ 升温至１５０℃， １５℃・ｍｉｎ 升温至２４Ｏ℃保持１ ｍｉｎ分流进样，分流比：１００：１；进样口温度：２５０℃；检测器：ＦＩＤ，温度：２５０℃。结果：薄荷脑和 （一）一薄荷酮在（０．００３ ９—０．０３９） 和（０．００２ ５—０．０２５） 范围内与色谱峰面积呈线性关系，ｒ分别为０．９９９ ３，０．９９９ ６０结论： 文火煎煮２．５ ｍｉｎ左右，煎剂中的薄荷脑和（一）一薄荷酮含量达到高峰，煎煮１０ ｍｉｎ后含量消失过半。 ［关键词］薄荷脑；（一）一薄荷酮；薄荷煎剂；毛细管气相色谱法 ［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ｂ ［文章编号］ １００５—９９０３（２００７）０５—０００７—０３ 薄荷为常用中药，其味辛散、性凉，常用于感冒 国药典有关薄荷的用法仅用“入煎宜后下”一语带 风热、皮肤瘙痒等症，因所含有效成分易在沸水煎煮 过 。有关用毛细管柱气相色谱法对薄荷油中及相 中分解挥发，故煎药时常以后下为主，不宜久煎。化 关成药中薄荷脑和（一）一薄荷酮含量的检测在国内 学成分主含薄荷脑、（一）一薄荷酮等…。笔者查阅有 已有许多报道 ，而采用该法对薄荷煎剂中有效成 关资料，薄荷后下乃众医家之共识 Ｊ，但后下煎煮多 分进行煎煮时的跟踪检测等相关报道则甚少。本文 少时间则几无定论，现代中药研究也无相关报道，中 采用毛细管柱气相色谱法对薄荷煎剂中的两种主要 成分薄荷脑和（一）一薄荷酮进行分时采样检测，以确 ［收稿日期］２ＯＯ６．１０．２３ 定相关中药汤剂中薄荷后下的最佳煎煮时间。 ［通讯作者］ ＊葛尔宁，Ｔｅｌ：（０５７１）８６６１３５８９；Ｅ－ｍｌａｌ：ｇｅ—ｅｒ— １仪器和试剂 ｎｉｎｇ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ 岛津ＣＲ４Ａ系列气相色谱仪，毛细管气相色谱 法王寺的生晒品，其干燥方法与其它样品不同有关。 药，２００５，３６（７）：１０９７．１１００． （２）采集自广西田阳的１０号样品单独分为一类，仅 ［５］ 武政，张勉，张朝凤，等．３６批何首乌药材质量的ＨＰＬＣ 在百色地区遍用的田阳产何首乌其在形态学研究中 指纹图谱评价研究［Ｊ］．中国药学杂志，２００６，４１（４）： 与其它产地何首乌有差异，但是否为一个新的何首 ２５７．２６０． 乌变种仍有争论 ’ｍ ，本研究为何首乌的品种整理 ［６］ 刘振丽，宋志前，乔淑贞，等．制何首乌高效液相指纹 图谱分析［Ｊ］．中成药，２００５，２７（４）：３７８—３８０． 提供了新的证据。 ［７］ 谢培山，林巧玲．白芍总苷的薄层色谱指纹图谱实验 ［参考文献］ 研究［Ｊ］．中药新药与临床药理，２００４，１５（３）：１７１—１７３． ［８］ 解奉江，赵荣华，赵声兰，等．清蒸与黑豆汁蒸何首乌 国家药典委员会．中华人民共和国药典［ｓ］．一部，北 中有效成分的比较［Ｊ］．中草药，２００５，３６（７）：１００４－ 京：化学工业出版社，２００５．１２３． １０ｏ６． ［２］ 徐国钧，何宏贤，徐珞珊，等．中国药材学［Ｍ］．北京：中 ［９］ 中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志［Ｍ］． 国医药科技出版社，１９９６．１２５． 北京：科学出版社，２５（１）：１０２．１０３． ［３］ 史国兵．炮制对何首乌中有效成分含量的影响［Ｊ］．中 ［１０］ 傅军，严寒静，梁从庆，等．不同采集地何首乌的质量 国医院药学杂志，２００３，２３９（２）：９５．９７． 评价［Ｊ］．广东药学院学报，２００６，２２（３）：２５３—２５４． ［４］ 罗瑞芝，贾伟，赵利斌，等．何首乌研究进展［Ｊ］．中草 ・ ７・ 维普资讯 http://www.cqvip.com 第１３卷第５期 ２００７年５月 中国实验方剂学杂志 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｅ Ｖｏ１．１３．Ｎｏ．５ Ｍａｙ，２００７ 柱：岛津ＦＱｅ－４９４．１，２５ ｍ×０．２ ｍｍ极性柱；对照品： 薄荷脑（中国药品生物制品检定所），（一）．薄荷酮 （Ｓｉｇｍａ公司）；实验用试剂均为分析纯。薄荷叶采自 本校中药种植园。 ２对照品溶液和被测样品溶液的制备 对照品溶液：精密称取薄荷脑７．８ 用甲醇稀 释并定容于５ ｍＬ量瓶中。分别精密吸取浓度为 ０．５５ ｍｇ／ｍＬ的（一）．薄荷酮对照品溶液５，１２．５，２５， 于０，２，４，８，１６ ｈ精密吸取该样品溶液０．５ Ｌ进样， 测定上述两种物质的峰面积积分值，ＲＳＤ为１．５％ （薄荷脑）；ＲＳＤ为１．６％（（一）．薄荷酮），精密度和 稳定性均良好。 ６样品测定 取１６个样品溶液各０．５ Ｌ进样，记录气相色谱 图（见图１）。根据各图谱中薄荷脑和（一）．薄荷酮两 种成分的峰面积，由上述２个回归方程算出各样品 ３７．５，５０ ，分别用甲醇稀释并定容于５只０．５ ｍＬ 微量瓶中。 样品溶液：称取３份干燥的薄荷叶药材粉末各８ ｇ，精密称定；取３只圆底烧瓶，各加入５００ ｍＬ水，用 同一调压器调压加热的电炉文火加热至沸，加入上 述３份药材用文火煎煮，在０至３．５ ｍｉｎ内每３０ ｓ取 一次样，３．５至２５ ｍｉｎ内再取９样，每次０．８ ｍＬ，记 录每次提取样品后的总溶液量。分别对应混和３份 ＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝¨ 样品溶液，共取１６个待测样品，各样品用３倍量的 乙醚提取３次，合并醚液，挥干，残留物用甲醇稀释 至２ ｍＬ，再经离心、取上清液、过０．４５ ｍ微孔滤膜 后待测。 ３色谱条件 毛细管柱（岛津ＦＱＰ－４９４－１，２５ ｍ×０．２ ｍｍ），柱温： ６０℃保持２ ｍｉｎ，５℃・ｍｉｎ 升温至８５℃，１０℃・ｍｉｎ １５０℃，１５℃・ｍｉｎ 升温至２４０℃，保持１ ｍｉｎ；分流进 样，分流比：１００：１；进样口温度：２５０℃；检测器：ＦＩＤ，温 度：２５０℃；对照品和样品进样量均为０．５ 。 ４线性范围 分别精密吸取上述薄荷脑对照品溶液０．１０， ０．２５，０．５０，０．７５，１．Ｏ０ ｍＬ，置５只１０ ｍＬ量瓶中，用 甲醇稀释至刻度，再取该５个薄荷脑对照品稀释液 和上述（一）．薄荷酮对照品稀释液各１００ Ｌ对应混 和，分别精密吸取该混和对照品溶液各０．５ Ｌ进 样，以对照品峰面积ｙ为纵坐标，进样量 （ ｇ）为横 坐标绘制标准曲线，薄荷脑进样量在０．００３ ９ ｇ～ ０．０３９ ｇ、（一）．薄荷酮进样量在０．００２ ５ Ｌ～０．０２５ Ｌ范围内与峰面积呈良好的线性关系。回归方程 分别为：Ｙ＝６１２ １５３ ＋３３５，ｒ＝０．９９９ ３（ｎ＝ ３）；Ｙ＝８６５ ６７８ ＋１６５，ｒ＝０．９９９ ６（ｎ＝３）。 ５精密度和稳定性 精密吸取５号（２．５ ｍｉｎ采样点）样品溶液０．５ Ｌ，按含量测定方法连续进样５次，测定峰面积， ＲＳＤ为２．５％（薄荷脑）、２．３％（（一）。薄荷酮）；分别 ・ ８ ‘ 川 ５ ７ ５ １０ 时问（ｍｊｎ） 图１样品煎煮２．５ ｍｉｌｌ时的气相色谱图 １．（一）．薄荷酮２．（＋）一薄荷酮３．新薄荷酮４．薄荷脑 中薄荷脑和（一）．薄荷酮的含量，重复三次取平均 值，以煎煮时间ｔ为横坐标，药汤中薄荷脑和（一）． 薄荷酮的含量为纵坐标绘制趋势图（见图２），设第 一样为３０ ｓ点，以曲线拟合法对趋势图中峰值区域 （１．５ ｍｉｎ～３．５ ｒａｉｎ）及峰后区域（３．５ ｍｉｎ～２５ ｒａｉｎ）进 行区间分段拟合，求得汤中薄荷脑和（一）。薄荷酮含 量随煎煮时间的变化方程为： Ｙ１ （薄荷脑）：５．９２ ｔ 一５１．９４３ ｔ ＋１４７．７８ ｔ一１２２．５９ （３．５ ｒａｉｎ≥ｔ≥１．５ ｍｉｎ） ｙ２ｌ［（一）．薄荷酮］＝０．３２ ｔ 一３．８３ ｔ ＋ｌ３．２２ ｔ一１０．７５ （３．５ ｒａｉｎ≥ｔ≥１．５ ｍｉｎ） ｙ ２（薄荷脑）＝０．０１７ ｔ 一０．８６１ ｔ＋１３．１４５ （３．５ ｒａｉｎ≤ｔ≤２５ ｍｉｎ） ［（一）．薄荷酮］＝０．００６ ｔ 一０．２８３ ｔ＋３．７８２ （３．５ ｒａｉｎ≤ｔ≤２５ ｍｉｎ） 把上４式微分得： ｄＹ ，／ｄｆ＝１７．７６ ｔ 一１０３．８９ｔ＋１４７．７８ （３．５ ｒａｉｎ≥ｔ≥１．５ ｍｉｎ） ｄＹ２１／ｄｔ＝０．９６ ｔ 一７．６６ ｔ＋ｌ３．２２ （３．５ ｒａｉｎ≥ｔ≥１．５ ｍｉｎ） 维普资讯 http://www.cqvip.com 第１３卷第５期 ２００７年５月 中国实验方剂学杂志 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｅ Ｖｏ１．１３．Ｎｏ．５ Ｍａｙ，２００７ ｄＹＩ２／ｄｔ＝０．０３４ｔ一０．８６１ 择较短的３０ Ｓ，但此采样密度在峰值区域仍显不够， 见图２，为此在该区域选择更短的１５ Ｓ采样间距采 （３．５ ｍｉｎ≤ｔ≤２５ ｍｉｎ） ｄｌ，２２／ｄｔ：０．０１２ｔ一０．２８３ （３．５ ｍｉｎ≤ｔ≤２５ ｍｉｎ） 集数据再次实验，并以此实验数据来推导式：Ｙ，，和 ｌ，２，，以求方程 ，和ｌ，２，的准确拟合。 由图２及拟合方程分析得知，薄荷后下入药后 的最佳煎煮时间为２．５ ｍｉｎ左右，此时汤中薄荷脑等 有效成分含量将达到高峰，煎煮１０ ｍｉｎ左右，汤中有 效成分含量将减半，煎煮２３ ｍｉｎ以后将减至高峰时 的２０％以下。本实验结果为中药薄荷的煎煮方法提 令上４式等于零，解方程（二次方程可用数值逼近 法）可算得：当ｔ ２．５ ｍｉｎ时，药汤内薄荷脑含量达 到最高，ｔ ２．５２ ｍｉｎ时，药汤内（一）．薄荷酮含量达 到最高，当ｔ ２５．３ ｍｉｎ时，药汤内薄荷脑含量降至 低点，仅为峰值时的２０％左右，ｔ一２３．６ ｍｉｎ时，药汤 内（一）．薄荷酮含量降至低点，仅为峰值时的２０％左 右。峰点含量：薄荷脑／薄荷药材为：１．８２９ ｍｇ／ｇ， （一）．薄荷酮／薄荷药材为：Ｏ．２３４ ｍｇ／ｇ。 供科学依据，对临床科学煎药有一定的指导意义。 水煎薄荷的得油率通常较低，所以本实验测得 的薄荷脑及（一）．薄荷酮含量均不高，但却更接近汤 药中上述两种物质的实际含量。由气相色谱图分析 得知，本方法检测薄荷药材中薄荷脑及薄荷酮类成 ｌ２ 分的含量，效果颇佳。色谱图中薄荷脑及薄荷酮类 ｎ ｌ！｜ １Ｊ １｛１Ｊ １Ｊ 成分的特征峰非常明显，与其他峰的分离度也很好， 完全能够满足薄荷脑及薄荷酮类成分质量检测标准 的要求。 皇 ９ 皇 一 一 田 ６ ［参考文献］ 肖培根．新编中药志［Ｍ］．北京：化学工业出版社，２００２． ３９６—４０１． 槎 许济群，王锦之．方剂学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社， １９９５．６９—８６． 国家药典委员会．中华人民共和国药典［ｓ］．一部，北 煎药时间（ｍｉｎ１ 京：化学工业出版社，２００５．２６１． 图２煎出量随煎药时间的变化规律 ●一●：薄荷脑（ｍｇ）ｏ—ｏ：（一）一薄荷酮（ｍＥ） 郑纯，曾洁．高效毛细管气相色谱法测定保心安油中 （一）．薄荷酮、薄荷脑和桂皮醛的含量［Ｊ］．药物分析杂 志，２０ｏ３，２３（２）：１００． ７讨论 高海．气相色谱法测定薄荷油中三种主要成分的含量 ［Ｊ］．药学通报，１９８８，２３（７）：４１４． 郑虎占，董泽宏，佘靖．中药现代研究与应用［Ｍ］．第五 卷，北京：学苑出版社，１９９８．４６５６—４６７０． 本实验采用在沸水中加入药材的方法来模拟薄 荷后下的煎煮过程，鉴于薄荷中的薄荷脑等主要有 效成分易被煎煮挥发，所以开始时的采样点间距选 欢迎订阅《中国实验方剂学杂志》 《中国实验方剂学杂志》是经中国科技部批准，由国家中医药管理局主管，中国中医科学院中药研究所和中国中西医结合 学会中药专业委员会主办的国家级专业性学术刊物。已被评为“中国科技论文统计源期刊”（中国科技核心期刊）；“万方数据 数字化期刊群”、“中文科技期刊数据库”、“中国学术期刊综合评价数据库”来源期刊；“中国期刊网、中国学术期刊光盘版”全 文收录期刊；并被评为“中国中医药优秀期刊”及“中国学术期刊优秀期刊”。本刊创刊于１９９５年１０月。本着以提高与普及相 结合的办刊方针。主要设置：药剂、药理、Ｉ临床、综述、基层园地、消息等栏目，交流方剂的药效学、毒理学、药物动力学、药物化 学、制剂学、质量分析、配伍研究、Ｉ临床研究、学术专论以及方剂主要组成药物的研究结果与最新进展。 本刊从２００６年开始改为月刊，ｌ６开本，７２页，标准刊号：ＩＳＳＮ１００５—９９０３；ＣＮ１１－３４９５／Ｒ。每期定价９元，全年１０８元。国内外 公开发行，国内由北京市报刊发行局办理总发行，邮发代号：２－４１７；国外由中国国际图书贸易总公司办理发行，代号：ＢＭ４６５５。 欢迎订阅。本编辑部也办理邮购。地址：北京市东直门内北新仓ｌ８号，《中国实验方剂学杂志》编辑部。邮编：１００７００，联系人： 一何希荣，联系电话：（０１０）６４０１４４１ｌ转２８４９，电子邮件：ｃｚｄ＠ｖｉｐ．ｓｉｎａ．ｃｏｍ ・９・
