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抗氧化活性测定方法的比较

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抗氧化活性测定方法的比较 之相礼和热创作

人体衰老和多种疾病均与自在基有关,探求自然抗氧化剂具有紧张意义.黄酮、多糖、多肽、酚类等生物活性成分均具有抗氧化活性,抗氧化活性的挑选方法可分为体外和体内2种测试体系.

体外:抗氧化活性可以用在特定条件下,样品对检测体系中自在基的肃清才能、抗油脂过氧化才能及样品的还原才能、总抗氧化才能等来衡量和表征.经常运用的方法有羟基自在基(·OH)肃清才能法、1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH法)、2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐(ABTS法)、超氧阴离子自在基法(O2-·)、邻苯三酚自氧化法、β-胡萝卜素漂白法、硫代巴比妥酸法、铁离子还原才能测定(FRAP法)、总酚测定法、ORAC法等方法.体内:次要有DNA氧化损伤法、蛋白质氧化损伤法、线粒体氧化损伤法.

其中DPPH法和ABTS法操纵较简单便捷,不必要特殊的检测设备,只在需固定工夫下记下其紫外分光光度丈量值后计算其自在基肃清率,缺陷是分歧物质具有组成和结构的差别,与 DPPH·、ABTS+·的反应速率分歧,反应到达均衡的工夫分歧,将反应工夫固定在某一值时,可能对抗氧化剂的抗氧化性评价带来错误的判别,且DPPH自在基会和其他自在基发生反应.邻苯三酚自氧化法缺陷是检测波长、缓冲液的组成及pH值、邻苯三酚浓度等关键测定条件存在着较大差别.β-胡萝卜素漂白法的缺陷是β-胡萝卜素本人有抗氧化活性,对样品活性的测定结果有影响.FRAP法次要用于食品业,优点是简单易操纵、可以反复,缺陷是无法测定硫醇化合物的还原才能.ORAC法是国际上通用的评价食品氧化的尺度方法,缺陷是仪器成分较复杂,检测成本较高.

现在普遍运用的体外抗氧化活性目标一样平常都采取分光光度法,运用分光光度计丈

量各种颜色成分含量的变更.分光光度法操纵较简单、便捷,不必要特殊的检测设备,只在需固定工夫下记下其紫外-可见分光光度丈量值后计算其活性大小,具有成本低、服从高、样品量少等优点.分光光度法缺陷是会遭到样本本身颜色和浑浊度的影响和限定,颜色深的样品测得的数据偏差大,甚至得到错误的结果;分歧物质组成和结构存在差别,与各种自在基的反应速率分歧,反应到达均衡的工夫分歧,将反应工夫固定在某一值时,可能对抗氧化剂的抗氧化性评价 带来错误的判别.外界环境要素对实验结果也存在肯定程度的影响,有些抗氧化活性实验在冬天低温时不容易成功,测得的数据每每没有规律.

我觉得在测定样品的抗氧化活性时,各种方法都有本人的优缺陷,要根据需测物质来决定用什么方法,比方DPPH法的自在基选择性强,和睦只要一个羟基的芳香酸、无羟基的类黄酮反应,这类物质需用其他方法测定.若对检测结果要求高的可用ORAC法,如果做两个活性物质的抗氧化活性的对比可用多种方法测定后综合比较.在实践运用中,要根据样品的物理、化学特征灵活采取多种方法综合评价其抗氧化活性,使实验结果愈加客观和真实.

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