检验医学与临床２０１１年１１月第８卷第２２期Ｌａｂ Ｍｅｄ Ｃｌｉｎ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１１，Ｖｏ１．８，Ｎｏ．２２ ・论 著・ 标本置温度与时间对血细胞分析结果的影响 杨玉芳（山东省东营市第二人民医院检验科２５７３３５） 【摘要】 目的 探讨标本放置温度与时间对血细胞分析结果的影响。方法 回顾性分析东营市第二人民医院 检验科１００例标本的放置时问与温度，根据放置温度的不同分为：室温组和冰箱组。然后分析不同放置时间的结 果。结果标本室温保存时，随着时间的延长，红细胞（ＲＢＣ）总数变化不规律，血小板计数（ＰＬＴ）、白细胞（ＷＢＣ）总 数及淋巴细胞（Ｌｙｍｐｈ）、中间细胞（Ｍｉｄ）直接计数逐渐上升，而中性粒细胞（Ｇｒａｎ）直接计数呈下降趋势，血红蛋白 （Ｈｂ）含量变化不明显。标本冰箱冷藏保存时，随着时间的延长，ＲＢＣ总数、Ｇｒａｎ直接计数呈下降趋势，而ＰＬＴ计 数逐渐上升，ＷＢＣ总数、Ｈｂ含量、Ｌｙｍｐｈ、Ｍｉｄ直接计数变化不明显。结论【关键词】血细胞分析； 温度； 时间； 影响 Ｄ０Ｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－９４５５．２０１１．２２．０２５ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７２－９４５５（２０ｌ１）２２ ２７４０—０２ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｍｅｎ ｓｔｏｒａｇｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｔｉｍｅ ｏｎ ｔｈｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌｓ ＹＡＮＧ Ｙｕ—ｆａｎｇ（Ｄｅｐａｒｔ— ｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ｐｅｏｐｌｅ ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｄｏｎｇｙｉｎｇ Ｃｉｔｙ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ ２５７３３５，Ｃｈｉｎａ） 抗凝血室温保存应在７ ｈ内完成标本 的测定；抗凝血冰箱冷藏保存只要在２２ ｈ内完成标本的测定，对结果影响不大。 ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｄｉｓｃｕｓｓ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｍｅｎ ｓｔｏｒａｇｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｔｉｍｅ ｏｎ ｔｈｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １００ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ ｆｒｏｍ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ ｏｕｒ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｒｏｏｍ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｆｒｉｇｅｒａｔｏｒ ｇｒｏｕｐ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔＯ ｔｈｅ ｓｔｏｒａｇｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ．Ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｏｓｅ ｔＷＯ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ ｗｅｒｅ ｓｔｏｒｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｒｏｏｍ ｔｅｍｐｅｒａ— ｔｕｒｅ，ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ＲＢＣ ｐｌｔ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｆｌｕｃｔｕａｔｅｄ ａｎｄ ｔｈｅ ＷＢＣ ａｎｄ Ｌ，Ｍ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｇｒａｄｕａｌｌｙ ｒｏｓｅ ａｓ ｔｉｍｅ ｐａｓｓｅｄ，Ａｎｄ Ｇｒａｎ ｄｉｒｅｃｔ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ．Ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ ｗｅｒｅ ｓｔｏｒｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｆｒｉｇｅｒａｔｏｒ，Ｇｒａｎ，ＲＢＣ ｄｉｒｅｃｔ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｄｅｃｌｉｎｅｄ ａｎｄ ＰＬＴ ｃｏｕｎｔ ｇｒａｄｕａｌｌｙ ｒｏｓｅ ａｓ ｔｉｍｅ ｐａｓｓｅｄ，ａｎｄ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ＷＢＣ，Ｈｂ，Ｌｙｍｐｈ，Ｍｉｄ ｗｅｒｅ ｎｏｔ ｏｂｖｉｏｕｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ｂｌｏｏｄ ｓｔｏｒｅｄ ｉｎ ｒｏｏｍ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｓｈｏｕｌｄ ｂｅ ｃｏｍｐｌｅｔｅｄ ｗｉｔｈｉｎ ７ ｈｏｕｒｓ．Ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｔ ｗｉｌｌ ｎｏｔ ｂｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａｆｆｅｃｔｅｄ ｉｆ ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｉｓ ｃｏｍｐｌｅｔｅｄ ｗｉｔｈｉｎ ２２ ｈｏｕｒｓ ａｎｄ ｔｈｅ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ｂｌｏｏｄ ｉｓ ｓｔｏｒｅｄ ｉｎ ｒｅｆｒｉｇｅｒａｔｏｒ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌｓ ａｎａｌｙｓｉｓ；ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ；ｔｉｍｅ； ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ 血细胞分析是临床最常规检验项目之一，是一种通过一些 仪器的检测对血液中细胞成分进行分析的技术。对疾病的诊 断、疗效监测等具有重要指导价值。影响血细胞分析的因素很 份，一组放置室温，另一组放置到４℃冰箱中，０．５、１．０、１．５、 ２．０、３．０ ｈ后，随机抽取两组中标本各２管，充分混匀后用仪器 测定，取平均值。 １．４统计学方法计量资料采用 ４－Ｓ表示，组内不同时间段 各项目结果采用ｒｉｄｄｉｔ分析，行两组间项目对应性分析采用ｔ 检验。Ｐ＜Ｏ．０５为差异有统计学意义。 ２结 果 多，在临床上常见到工作人员将血液标本预稀释后放置一段时 间才进行测定，或者放置在不同的温度下，这会对测定结果造 成一些影响¨１］。本文对此进行实验分析，以引起临床医生的 注意。 １资料与方法 １．１一般资料～２．１ 稀释标本放置不同温度、不同时间血细胞分析，各时间段 检验科抽取１００例标本，标本所属人年龄２５ 红细胞（ＲＢＣ）、平均红细胞体积（ＭＣＶ）、白细胞（ＷＢＣ）、中性 ５５岁，其中男５８例，女４２例。所有标本均是清晨抽取外周 粒细胞（Ｇｒａｎ）、中间细胞（Ｍｉｄ）、淋巴细胞（Ｌｙｍｐｈ）、血小板计 数（ＰＬＴ）、平均血小板体积（ＭＰＶ）结果比较见表１。 ２．２ 各时间段４℃储存下ＲＢＣ、ＭＣＶ、ＷＢＣ、Ｇｒａｎ、Ｍｉｄ、 Ｌｙｍｐｈ、ＰＬＴ、ＭＰＶ检测结果见表２。由上表１、２统计学中可 静脉血，用乙二胺四乙酸二钾抗凝混匀待用。 １．２仪器１．３方法法国Ｓｅｂｉａ ２ＡＦ血细胞分析仪仪器配套进口试剂 本实验中根据放置温度的不同，分为室温组和冰 及新样品杯。 以得出，血细胞分析各指标室温下随储存时间的增长，均有所 变化，差异有统计学意义（Ｕ一７．０５－－８．２０，Ｐ＜Ｏ．０５）。组间结 果比较，Ｍｉｄ、Ｌｙｍｐｈ、ＰＩ Ｔ差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。 箱组，对两组标本进行了时间阶段性的测验，并进行结果分析。 将抗凝血液充分混匀后，每份血液平行稀释２份，则每组１００ 表１稀释标本室温下不同时间内血细胞结果比较（ ±Ｓ， 一１００） 检验医学与临床２０１１年１１月第８卷第２２期 Ｉ ａｂ Ｍｅｄ Ｃｌｉｎ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１１，Ｖｏ１．８，Ｎｏ．２２ 表２稀释标本４℃储存下不同时间内血细胞测试结果比较（ｊ±ｓ， 一１００） ３讨 论 生变化。 在实际工作中大多医院使用末梢血标本进行血细胞分析， 因此，本文认为血细胞分析应尽量采用ＥＤＴＡ－Ｋｚ抗凝 而且许多情况下是先准备好稀释液去病房或门诊将采集血标 血，若使用预稀释标本测定，置室温条件下，应在１ ｈ内测定完 本预稀释，经过一段时间后才能拿回实验室进行测定ｌ２Ｊ，由此 毕，必要时放于４℃冰箱保存可延长测定时间，但也不宜超过 对测定结果产生了影响。 ２ ｈ，否则ＰＬＴ数量以及ＷＢＣ分类必须用手工法进行，才能保 本文实验结果表明，稀释标本后置室温与放置４℃冰箱储 证结果的准确性 ］。由此可见，静脉血进行血常规检测在抽血 存，血细胞分析ＲＢＣ、ＭｃＶ、ＰＬＴ、ＭＰＶ、ＷＢＣ即刻测定结果基 ３０ ｍｉｎ至２４ ｈ内测定结果较稳定。 本一致，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；但同一条件下各项指 标的结果时间段不同结果有所不同，２ ｈ后变化差异有显著 参考文献 性。稀释标本置室温２ ｈ后与冰箱储存２ ｈ后的结果，Ｍ．ｄ、 ［１３李胜发，程大林．血小板可逆聚集在全血细胞分析中的影 Ｌｙｍｐｈ、ＰＬＴ的变化差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。 响ＥＪ］．临床检验杂志，２００３，２１（１）：３７—３８． 分析发生以上变化的原因，一是血液离开人体后，血细胞 Ｅ２］俞胜琴．血液样本采集后放置时间对血常规测定的影响 的渗透压发生变化。血液经稀释后随放置时间的增长，细胞内 ＥＪ］．中西医结合杂志，２００３，１２（２４）：２６９９—２７０１． 水分子与稀释液中离子相互交换，细胞内渗透压升高；ＰＬＴ体 ［３］史善富．不同温度、时间对血常规检测结果的影响［Ｊ］．中 积较小，其细胞膜较薄，在稀释液中易被破坏，放置时间越长， 国工业医学杂志，２００４，１７（５）：３２９—３３０． 破坏越多；另外ＰＬＴ还可发生聚集，产生巨大ＰＬＴ等 Ｊ。血 ［４］孙冶，黄萃，刘胜勇，等．标本静置时间对血细胞分析仪测 细胞分析仪对ＷＢＣ的分类是利用稀释标本加溶血剂后，ＲＢＣ 定结果的影响［Ｊ］．临床检验杂志，２００２，２０（３）：１９０—１９１． 被溶解而破坏，ＷＢＣ胞浆外渗使ＷＢＣ脱水而收缩，各种ＷＢＣ ［５］郭文静，柏世玉，刘学军．两种不同标本收集方法对血细 核大小不同，胞浆颗粒大小也不同，收缩后的各种ＷＢＣ大小 胞计数的影响ｒＪ］．泰山卫生，２００１，２５（１）：４２． 不同而达到分类 ］。随着预稀释标本放置时间的增长，ＷＢＣ 因渗透压的变化，体积发生一定的变化，导致分类细胞比例发 （收稿日期：２０１１－０７—２３） （上接第２７３９页） 综上所述，应用血清检测对Ｈｐ感染患儿进行检测有利于 采集样本部位、数量等因素影响；非侵人性检查不需获得胃黏 病情的判定，经济简便，无创伤，具有较高的敏感性、特异性、非 膜组织，采用胃液、血清、唾液、粪便等标本进行检测。有报道， 侵入性，患儿易接受，而且能反复进行，值得推广应用。 血清学检测在流行病学调查及是否需要内镜检查进行初筛是 极为有利的 ］，因为Ｈｐ菌体表面存在多种抗原组分，如尿素 参考文献 酶、脂多糖、黏附索等成分¨６］，这些抗原均可刺激宿主产生免疫 １－１］马东礼，孙丽芳．幽门螺杆菌感染与性别和年龄关系的试 反应，产生ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ抗体，血清学主要检测的是可长期存 验探讨［Ｊ］．检验医学与临床，２００７，４（１２）：１１７７—１１７８． 在于血清中的ＩｇＧ。血清学检测简单快速，具有较高的敏感 ［２］张万岱，徐智明．幽门螺杆菌研究现状及共识［Ｊ］．世界华 性、特异性、非侵入性，此外，标本来源方便，适合多种情况下的 人消化杂志，２０００，８（３）：１０８４—１０８８． Ｈｐ检查，特别适合于儿童。对Ｈｐ阳性者再行胃镜检查，以明 ［３］Ｌｉ ＹＪ，Ｈａｎ ＦＣ，Ｙａｎ ＸＪ，ｅｔ ａ１．Ｃｌｏｎｉｎｇ，ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ａｎｄ ｅｘｐ 确复发性腹痛病因，有利于早期诊断及针对性治疗，进而提高 ｒｅｓｓｉｎｇ ｏｆ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｇｅｎｅ ｏｆ ＨＩ ｐｙｌｏｒｉ ｔｏｘｉｎ［－Ｊ］．Ｊ Ｆｏｒｔｈ— 治疗效果。本研究结果显示，学龄组患儿Ｈｐ感染率显著高于 Ｍｉ１Ｍｅｄ Ｕｎｉｖ，２００２，５（４）：２９—３２． 学龄前组，说明随着年龄增加阳性率也随着增加，这大概与现 ［４］许苏眉，李龙．儿童上腹反复疼痛与幽门螺杆菌感染的关 在都是独生子女及儿童喂养状况大致相近有关。随着科技的 系［Ｊ］．中国现代医学杂志，２００６，１６（１２）：１８５２—１８５４． 发展，出现了许多新的血清学技术：快速免疫色层法一库力斯伯 ［５］Ｃｈｅｎ Ｚ．ＥＬＩＳＡ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉ ｕｒｅａｓｅ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｏｆ 法、血清学可溶性Ｈｐ抗原检测、斑点金免疫渗透试验和 Ｃａｍｐｙｌｏｂｓｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ａｎｄ ｉｔｓ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｍ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇ ｈｕａ Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法。但是由于Ｈｐ感染数周后血液中才出现特 Ｙｉ Ｘｕｅ Ｚａ Ｚｈｉ，１９９１，７１（８）：４３４—４３６． 异性抗体，阴性者血液中也可存在交叉反应性抗体（如空肠弯 ［６］成虹，胡伏莲，谢勇，等．中国幽门螺杆菌耐药状况及耐药 曲菌感染），且Ｈｐ根除后血液中抗体在一段时间内仍维持在 对治疗的影响——全国多中心临床研究［Ｊ］．胃肠病学， 阳性水平，故血清学阳性不能完全肯定患儿有活动性感染，阴 ２００７，１２（９）：５２３ ５３０． 性也不能排除初期的感染。因此，血清学抗体的检测主要用于 易感人群的筛查以及流行病学调查。 （收稿日期：２０１１—０６—３０）
