・１４４・
广东医学 ２０１６年７月第３７卷（增刊） ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌ Ｊｕｌ．２０１６，Ｖｏｌ．３７，Ｓｕｐｐｌ．
而较其他方法更快速。应用本方法，克氏针的定位很重要，本组有１例术后双下肢长度差达８ｍｍ的病例，是因为髋臼侧的克氏针定位太低进入髋关节，磨髋臼时需拔除此克氏针而在其上方重新定位，导致误差加大。这种方法也存在一定误差，分析其原因是２次测量发生的体位变化、人工关节偏心距的变化、手术操作及臀中肌牵拉导致克氏针的变形移位。
总之，髋臼发育不良患者在行人工全髋关节置换手术时，为做到双下肢等长，术者应在术前准备、术中测量、术中试验等多个环节做好工作。但因为髋臼发育不良患者的髋臼变形，术中磨锉的髋臼窝与术前计划的位置可能发生较大的改变，导致术前计划的准确性下降，而术中常用的试验方法因为软组织挛缩及术中松解而变得不准确。因此术中测量方法就显得尤为重要。本研究对比分析了两种术中测量方法，显示克氏针定位测量法明显优于体表标志测量法，且克氏针定位测量法操作简单，值得在临床手术中推广应用。
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（收稿日期：２０１６－０１－２２ 编辑：陈兵）
佛山地区２４３３例不育男性精液质量分析
刘冰，林志远
广东省佛山市禅城区中心医院检验科（５２８０３１）
【摘要】 目的 探讨精液常规分析、精子形态分析、顶体酶活性测定在诊断男性不育中的应用价值。方法 按照ＷＨＯ技术规范，对２４３３例不育男性患者的精液进行常规、精子形态分析、顶体酶活性定量检测。结果 ２４３３例标本中，顶体酶活性降低１０７１例（４４畅０２％），正常精子形态百分率≤１５％６３９例（２６畅２６％），精子活动率异常５５８例（２２畅９３％），ａ级精子异常４８３例（１９畅８５％），液化时间异常３７２例（１５畅２９％），精子密度异常２９４例（１２畅０８％）。结论 精液常规分析、精子形态分析、顶体酶活性测定是评价精液质量的重要指标，多种精子质量检测技术的应用，可以提高男性不育的诊断率。
【关键词】 精液常规分析；精子形态学分析；顶体酶活性测定；男性不育
本研究通过对２４３３例不育男性的精液进行常规检测、精子形态观察及顶体酶活性测定，探讨这些检测技术在男性不育诊断中的应用价值。结果报告如下。１ 资料与方法
１．１ 一般资料 选取２０１３年１月至２０１５年１２月期间前来我院不孕不育门诊就诊的男性患者２４３３例，年龄１９～５６岁，平均（３３畅４±１２畅３）岁，主诉婚后同居１年以上未采取任何避孕措施而未育，体检未发现明显睾丸、附睾、输精管异常，均无性功能障碍史，无外伤及遗传性疾病家族史，共计２４３３例精液标本纳入分析。１．２ 精液常规检测方法 所有分析对象参照枟ＷＨＯ人类精液及精子－宫颈黏液相互作用实验室检验手
册枠第４版要求禁欲２～７ｄ，手淫法留取精液，收集在广口、消毒、无毒、带盖的塑料容器中，立即保温送检并置于３７℃条件，待标本完全液化后记录精液的气味、颜色、黏稠度、ｐＨ值、体积数等，采用计算机辅助精液分析技术（ＣＡＳＡ）对精子密度、精子活动率、精子活动力等参数进行分析。正常标准按照ＷＨＯ标准：精液量≥２ｍＬ；ｐＨ值介于７畅２～８畅０；精子密度≥２０×１０・
－１
６
－１
６
６０％；精子活动力ａ级＞２５％或ａ＋ｂ级＞５０％，以上指标均符合标准者界定为精液常规正常。１．３ 精子形态观察 载玻片预先经７０％的酒精洗涤，取１滴完全液化的精液于处理过的载玻片上，拉薄
ｍＬ或精子总数＞４０×１０・ｍＬ；精子活动率＞
广东医学 ２０１６年７月第３７卷（增刊） ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌ Ｊｕｌ．２０１６，Ｖｏｌ．３７，Ｓｕｐｐｌ．
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涂片，完全干燥后，使用体积比为１∶１的乙醚与９５％酒精的混合液固定５～１５ｍｉｎ，经改良巴氏染色法染色，封片后于油镜下按照ＷＨＯ标准，计数２００个精子，得出正常形态精子的百分率，以正常形态精子率≥１５％为精子形态正常。１．４ 顶体酶活性测定 充分混匀液化后的精液，根据
６
参加反应的精子数为７畅５×１０个及精子密度，计算所需的精液量，严格按照试剂盒说明书操作，经分光光度计比色后计算出精子顶体酶活性。正常参考值为：
６
４８畅２～２１８畅７μＩＵ／１０精子。１．５ 仪器与试剂 主要仪器：ＷＬＪＹ－９０００伟力精子
彩色质量检测仪、Ｇ－２０白洋高速离心机、７５２紫外光
栅分光光度计、３７℃电热恒温水浴箱、２４℃电热恒温孵育箱。试剂：深圳华康生物医学工程有限公司提供的改良Ｋｅｎｎｅｄｙ法测定精子顶体酶活性定量试剂盒。１．６ 统计学方法 采用ＳＰＳＳ１５畅０统计软件，计量资
２
料比较用ｔ检验，计数资料比较采用礸检验；Ｐ＜０畅０５为差异有统计学意义。２ 结果
２．１ 精液检测主要参数异常率情况 在２４３３例精液标本中，单项检测参数异常各年龄阶段的分布情况见表１。
例（％）
≥４１岁（ｎ＝３６３）１９（５．２）１６（４．４）
倡倡
表１ 各年龄阶段精液标本单项参数异常情况（ｎ＝２４３３）
项目ｐＨ值＜７．２≤２０岁（ｎ＝６６）３（３．６）倡４（６．１）
６
－１
２１～３０岁（ｎ＝１０４２）２４（２．３）倡３８（３．７）８９（８．５）
倡倡
３１～４０岁（ｎ＝９６２）２９（３．０）倡３５（３．６）１０６（１１．０）１２６（１３．１）１５３（１５．９）１８６（１９．３）２０５（２１．３）倡４０２（４１．８）
合计７５（３．１）９３（３．８）２９４（１２．１）３７２（１５．３）４８３（１９．９）５５８（２２．９）６３９（２６．３）１０７１（４４．０）
精液量＜２ｍＬ
精子密度＜２０×１０・ｍＬ液化时间＞６０ｍｉｎａ级精子≤２５％精子活动率≤６０％正常形态精子率＜１５％
顶体酶活性＜４８畅２μＩＵ／１０精子 倡与≥４１岁年龄组比较Ｐ＜０畅０５
６
１２（１８．２）１４（２１．２）１０（１５．２）７（１０．６）
倡倡
８７（２４．０）９０（２４．８）１０１（２７．８）１２５（３４．４）９０（２４．８）８６（２３．７）
１４２（１３．６）２３７（２２．７）２６１（２５．１）
８（１２．１）倡１６（２４．２）
３０１（２８．９）倡５６３（５４．０）
２．２ 异常形态精子缺陷形态情况 对正常形态精子
百分率＜１５％的６３９例标本于油镜下观察２００个精子形态，分别统计异常形态精子中头部缺陷、颈部／中段缺陷、尾部缺陷的精子总数及各类缺陷形态所占的百分比，见表２。
表２ ６３９例异常形态精子缺陷形态情况
缺陷形态大头精子梨形头精子锥头精子小头精子无定形头精子双头精子圆形头精子双头精子空泡样头精子顶体过小头精子颈部／中段缺陷精子尾部缺陷精子
各类缺陷精子总数（ｘ珋±ｓ）４１３４．５±１２．５３２７９．６±１０．２１０４５．０±１１．６８９３．４±１２．９７６１．７±１３．６５１０．９±１１．８３４２．３±１０．０２７８．４±９．５１１３．１±１０．２７２．３±１２．２１０５１．７±１１．３６９２．５±８．７
出现形态缺陷的患者所占比例（％）
３６．２３２．０１０．２８．７７．５４．９３．３２．７１．１０．７９．２５．５
分别为抽烟３６２例（２０畅６％）、抽烟＋肥胖２３９例
（１３畅６％）、抽烟＋饮酒１６８例（９畅５％）、抽烟＋饮酒＋肥胖１４３例（８畅１％）。３ 讨论
由于食品安全问题日益加重、生活习惯改变、工作压力加大、环境污染加剧以及个人不良嗜好等多方面因素的影响，不孕不育的发生率逐年递增。资料显示，人群中有１０％～１５％的育龄夫妇存在不育问题，而由男性因素引起的占５０％，精液常规分析是评价男性生育能力的基本常用指标。本文检测的２４３３例不育男性精液标本中，精液常规分析按照ＷＨＯ标准为正常的只有６７５例，异常率占到了７２畅３％。常规检测项目单项异常率最高的分别是：精子活动率下降；ａ级精子减少；液化时间延长及精子密度下降。近年来，随着科技的进步，许多医疗机构在精液常规检测中引入了ＣＡＳＡ，很大程度上解决了人工检测的繁琐性、主观性，为男性生育能力评估提供了精子活动的客观动态参数，使得检测结果更加可靠、客观、标准，为临床评估、诊断、治疗提供了更加详细的参数。不育男性精液质
［１］
量与年龄之间是否具有相关性，一直存在不同看法，有的专家研究认为，单纯从内分泌学角度研究认为，年龄不太影响性激素分泌及睾丸生精细胞的功能。但本研究表１的数据显示，在精液ｐＨ值、精子密度、液化时间、正常形态精子率、精子活动率的异常统计中，≥４１岁年龄组的异常百分比均高于其他年龄组，且前四
［２］
２．３ 精液检测结果异常患者个人情况分析 在２４３３例精液标本中，常规、形态、顶体酶检测结果全部正常的有６０２例，我们对其余１８３１例结果有异常的患者，进行了针对个人生活习惯、身体状态等情况的调查，收回有效问卷１７６１份。统计了比例较高的几种情况，
・１４６・
广东医学 ２０１６年７月第３７卷（增刊） ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌ Ｊｕｌ．２０１６，Ｖｏｌ．３７，Ｓｕｐｐｌ．
项与其他年龄组比较，差异有统计学意义（Ｐ＜０畅０５），可能是伴随着年龄增长，机体代谢功能下降、体内有害物质累积、染色体退行性变等因素，均有可能导致精液质量下降。随着国家生育的调整，将会激发更多夫妇的生育热情，相对高龄夫妇而言，备孕阶段不仅要重视女方的身体检查，男性的孕前检测、保健对于满足生殖健康需求、减少出生缺陷、促进优生优育也至关重要。
精子形态学检测是评价男性生育力的重要指标，只有形态正常的精子达到一定比例，才有可能使精子具备正常的运动能力。体外受精研究表明，正常形态精子率与受精率呈现出显著的正相关。当正常形态精子率＜１５％时，体外受精显著减少。相关资料表明，头部畸形占比率相对稍低的人怀孕概率相对偏大。本研究中，共有６３９例（２６畅２６％）的被测标本存在精子形态异常，最常见的为精子头部形态缺陷，例如大头、梨形头、锥形头、小头等。统计后发现，精子头部缺陷的占到了８５畅２％。头部缺陷会使精子运动迟钝、缓慢、缺乏动力而无法到达输卵管与卵子结合，导致受精失败；另外也会影响精子头部顶体的功能，使其丧失受精能力。越来越多的研究发现，精子形态不仅与精子ＤＮＡ的完整性关系密切，还可影响精子的运动能力，而且与
复发性流产之间也存在一定关系［３］
。精子形态观察的引入，弥补了精液常规检测的不足，从形态学角度对男性生育能力参数做了很好的补充，成为一项逐渐受到重视的检测指标之一。
精子顶体酶是一种受精过程中重要而且特殊的丝氨酸蛋白水解酶，它通常以无活性的顶体酶原形式存在于精子顶体内膜与赤道部膜上，当精子头部进入卵透明带时，顶体酶原被激活，水解卵细胞的透明带，以形成通道利于精子和卵子的结合；同时顶体酶还可以降低宫颈黏液的黏度，提高精子的穿透力，故其活性降低不仅影响对卵丘的分解而且也会削弱对透明带的穿透。在本文研究的２４３３例精液标本中，顶体酶活性
降低的占到了４４畅０２％，与男性不育关系密切［４］
。６７５例精液常规分析正常的标本，其精子顶体酶活性＜
４８畅２μＩＵ／１０６
精子的只有７３例，而精液常规分析参数异常的１７５８例标本中，顶体酶活性下降的有９９８例，差异有统计学意义（Ｐ＜０畅０５），这表明精子顶体酶活
性的测定对精液质量的分析意义重大［５］
。
男性不育病因复杂，往往是多种因素同时存在，应结合其他方面综合考虑。服用药品、精神状态、个人不良习惯嗜好、工作环境等诸多因素均可引起男性不育。通过对本研究１７６１例精液异常不育男性个人生活习惯、身体状态等情况的调查发现，抽烟、肥胖、饮酒等情况比较突出。抽烟已被证实对精液质量，特别是精子
密度有不良影响［６］
，长期大量吸烟可导致男性精液质量下降和精子ＤＮＡ的损伤，从而影响男性生育。和正常体重人群相比，肥胖会导致男性生殖激素水平异常、
脂质类激素和脂肪细胞因子的释放增加从而降低精子质量，改变精子蛋白质组，导致勃起功能障碍，并可能
引起男性不育［７］
。饮酒对精子质量的影响说法不一，一些研究显示酒精会损害精子的ＤＮＡ，加重精子ＤＮＡ碎片化指数，有引起不育的可能，而有的研究则认为适度饮酒可以保护氧化作用，利于精子质量。但从医学角度分析，医生还是建议不育男性适度运动、控制体重、均衡饮食、纠正不良生活习惯，从自身出发将不育因素降至最低。
由于具体情况的不同，许多单位还尚未开展精子形态学观察以及顶体酶活性测定，单纯依靠精液常规分析很难全面、准确、客观地判断男性不育的真正原因，为患者的诊断和治疗带来不便，精子形态观察和顶体酶活性测定从精子形态分析、受精能力评估方面弥补了常规分析只能从精子运动能力方面判断的不足，为男性不育、评估男性生育能力提供了相对完整的数据支持。而且，不育男性精液往往是多个检测参数叠加异常，只有进行全面的参数检测，才可以为临床分析
病因，确定下一步检查提供有价值的线索［８］
。近年来，随着人工授精、体外受精－胚胎移植技术的兴起与成熟，越来越多的检测技术如：精浆生化学、免疫学、影像学、遗传学、内分泌学、分子生物学等学科检测被不断应用，为男性不育提供了更加全面、有力的实验依据，
有效指导医生为患者选择有效、经济的助孕方案［９－１０］
，为更多不育患者带来生育希望。
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（收稿日期：２０１６－０６－２１ 编辑：杜冠辉）
