第九章吸光光度法

1•与化学分析法相比，吸光光度法的主要特点是什么？

答：①灵敏度高 ②仪器设备简单，操作简便，快速

③准确度较高 ④应用广泛

2•何谓复合光、单色光、可见光和互补色光？白光与复合光有何区别？

答：⑴复合光指由不同单色光组成的光；

单色光指其处于某一波长的光；

可见光指人的眼睛所能感觉到的波长范围为

400-750 nm的电磁波；

将两种适当颜色的光按照一定的强度比例混合若可形成白光，它们称为互补色光；

⑵白光是是一种特殊的复合光，它是将各种不同颜色的光按一定的强度比例混合而成有 复合光。

3•简述朗伯-比尔定律成立的前提条件及物理意义，写出其数学表达式。

答：确定前提为：①入射光为平行单色光且垂直照射；②

吸光物质为均匀非散射体系；③

无荧光和光化学现

吸光质点之间无相互作用；④辐射与物质之间的作用仅限于光吸收过程， 象发生。

其物理意义如下：当一束单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时，其吸光度 与吸光物质的浓度 c及吸收层厚度 b成正比。

A

.............. I 0

其数学表达式为：

1

A = lg lg Kbc

It T

K值？ K值受什么因素的影响？

1mol/L和吸收层厚度为

4•摩尔吸收系数 K在光度分析中有什么意义？如何求出 1cm时，吸光物质对某波长光的吸光度。

答：⑴摩尔吸光系数 K在光度分析中的意义：当吸光物质的浓度为

A

(2) 在吸光物质的浓度适宜低时，测其吸光度

A，然后根据

bc

计算而求得。

(3) 值受入射光的波长，吸光物质的性质、溶剂、温度、溶液的组成、仪器灵敏度等因 素的影响。 5•何谓吸光度和透射比，两者的关系如何？

答：吸光度A是指入射光强度I。与透射光强度It的比值的对数值。

透射比T是指透射光强度It与入射光强度I。的比值。

I

两者的关系如下： AWg-0 =lg

It

1 T

6•在光度法测定中引起偏离朗伯 -比尔定律的主要因素有那些？如何消除这些因素的影响？

答：⑴物理因素：①非单色光引起的偏离 的偏离。

⑵化学因素：①溶液浓度过高引起的偏离 消除这些影响的方法：采用性能较好的单色器

②化学反应引起的偏离。

采用平行光束进行入射，改造吸光物质

②非平行入射光引起的偏离

③ 介质不均匀引起

使之为均匀非散射体系，在稀溶液进行，控制解离度不变，加入过量的显色剂并保持溶液中 游离显色剂的浓度恒定。

7•分光光度计的主要部件有哪些？各部件的作用是什么？

答：分光光度计的主要部件有：光源、单色器、吸收池、检测系统、信号显示系统。

光源能提供具有足够发射强度、稳定且波长连续变化的复合光。 单色器的作用是从光源发出的复合光中分出所需要的单色光。

吸收池是用于盛装参比溶液、试样溶液的器皿。

检测系统是利用光电效应把通过吸收池后的透射光变成与照射光强度成正比的光电流， 再进行测量。 信号显示系统的作用是检测光电流强度的大小，并以一定的方式显示或记录下来。

8. 吸收光谱曲线和标准曲线的实际意义是什么？如何绘制这种曲线？ 答：吸收光谱曲线是吸光光度法选择

测量波长的依椐， 它表示物质对不同波长光吸收能力的 分布情况。 由于每种物质组成的特性不同决定了一种物质只吸收一定波长的光， 所以每种物 质的吸收光谱曲线都有一个最大吸收峰， 最大吸收峰对应的波长称为最大吸收波长， 在最大 吸收波长处测量吸光度的灵敏度最高。在光度分析中，都以最大吸收波长的光进行测量。

吸收光谱曲线的绘法： 在选定的测定条件下， 配制适当浓度的有色溶液和参比溶液， 分 别注入吸收池中， 让不同波长的单色光依次照射此吸光物质， 并测量此物质在每一波长处对 光吸收程度的大小（吸光度） ，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，即可得。

标准曲线是微量分析常用的一种定量分析方法。 在一定的测定条件和浓度范围内， 吸光 度与溶液之间有线性关系， 以浓度为横坐标， 吸光度为纵坐标， 一般可得一条通过坐标原点 的直线，即工作曲线。利用工作曲线进行样品分析时，非常方便。

标准曲线的绘法： 首先在一定条件下配置一系列具有不同浓度吸光物质的标准溶液 （称 标准系列），然后在确定的波长和光程等条件下，分别测量系列溶液的吸光度，绘制吸光度 - 浓度曲线，即为标准曲线。

9. 吸光光度法测定对显色反应有何要求？从哪些方面来考虑显色反应的条件？ 答：要求：选择性要好、灵考虑显色反应的条件为： 显色剂的用量； 溶液的酸度；时间和温度；有机溶剂和表面活 性剂；共存离

敏度要高、对比度要大、有色化合物要稳定、组成要恒定，显色 反应的条件要易于控制。 子的干扰及消除。

10. 溶液的酸度对显色反应的影响表现在哪些方面？如何选择和确定最适宜的酸度？ 答：溶液的酸度对显色

反应的影响表现在以下几个方面： 对被测物质存在状态的影响； 对显 色剂浓度和颜色的影响；对络合物组成和颜色的影响。

选择和确定最适宜酸度的方法是：固定被测组分 .显色剂和其它试剂的浓度，配成一系 列酸度不同的显色溶液， 测量其吸光度， 绘制吸光度—酸度曲线， 曲线中吸光度最大且恒定 的酸度区间即为显色反应适宜的酸度范围。

11. 为了提高测量结果的准确程度，应该从哪些方面选择或控制光度测量的条件？ 答： 1、选择合适的入射

波长。一般为最大吸收波长，如果有干扰时，可选择用灵敏度较低， 但能避开干扰的入射波长。

2、控制准确的读数范围。一般控制在

或浓缩试样、改变吸收池的厚度。

0.15-0.80，为此，可通过控制试样的称量、稀释

3、、选择适当的参比溶液。

12. 为什么示差光度可以提高测定高含量组分的准确度？ 答：应用差示光度法测定高含量组分时， 由于利用

稍低于试样溶液的标准溶液作参比， 所测 试样溶液的吸光度则是标准参比溶液和试样溶液浓度之差的吸光度， 即两溶液吸光度之差与 两溶液浓度之差成正比：

AA= K !C= K （GCs）

由于C比AC大得多，故测定 C的误差就比 心的误差小得多。

示差光度可以提高测定高含量组分的准确度的原因，是因为用稍低于试样溶液浓度的 标准溶液作参比，

调节 T% 为 100%时，相当于把光度计读数标尺进行了扩展。

13. 简述用摩尔比法测定络合物络合比的原理。

答：在一定的条件下，假设金属离子 M与络合剂R发生下列显色反应（略去离子电荷）： M+nR=MR n

为了测定络和比n ,可固定金属离子的浓度 CM，改变络和剂的浓度 CR，配置一系列CR/CM 不同的显色溶液。在络和物的九ma.x处，采用相同的比色皿测量各溶液的吸光度， 并对CR/CM

作图。在显色反应尚未进行完全阶段，此时 CR/CM实际上在转折点附近，由于络和物多少有离解，故实测的吸光度要低一些。

E所对应的CR/CM=n。

14. 双光束分光光度计与单光束分光光度计相比有什么不同？有哪些特点？

答：它们的不同点有：双光束分光光度计比单光束分光光度计结构复杂， 自动扫描，价格昂贵，用途广泛，光路设计要求严格。

双光束分光光度计具有较高的测量精密度和准确度， 结构分析。

2+

可实现吸收光谱的

而且测量方便快捷，特别适合进行

15•有50.00 mL含Cd 5.0 ^g勺溶液，用10.0 mL二苯硫腙-氯仿溶液萃取（萃取率~ 100%） 后，在波长为518 nm处，用1 cm比色皿测量得 T=44.5%。求吸收系数a、摩尔吸收系数 K 和桑德尔灵敏度s各为多少？

解：依题意可知

5.0 10 10 10’

= 5.0 10 g/L

_4

入/nm K co/L Xnol Xcm -1 -1 -1 -1 510 3. X 10 5.52 X03 4 656 1.24 X0 1.75 X0 4 K M/L Xmol Xcm

被萃取后Cd2+的浓度为：

A=-lgT=-lg0.445=0.35

a

A 0.35 rc ”c2i bc 1 5.0 10

0.35

4 = 7.0 10 L g cm

4

-1 -1

K=

5.0 00 1 -

112.41

4 =7.869 10

： 8.0 10 L mol cm

4 -j

J

S = M Cd /

112.41

4 =1.4 为

-3 -2

16.钴和镍与某显色剂的络合物有如下数据： 已知：A1=0.476 A2=0.374

0 （43 cm

8.0 \"04

将0.376g 土壤试样溶解后配成 50.00 mL溶液，取25.00ml溶液进行处理，以除去干扰物质，

然后加入显色剂， 将体积调至50.00 mL.此溶液在510 nm处吸光度为0.467,在656 nm处吸 光度为0.374,吸收池厚度为 解：根据题意列出方程组

4 11

17.某钢样含镍为

克？

0.12 %，用丁二肟显色，

K =1.3 XO L • mol • cm •若钢样溶解显色以

后，其溶液体积为 100.0 mL,在入=470 nm处用1cm的吸收池测量，希望测量误差最小， 应称取试样多少

解。要使测量误差最小，则

T=e-1=0.368 In T=-1

-5

c=

-0.434

XnT=3.34 X 10 moI/L

应采取的质量m」34曲°」弦叫他

kb

0.0012

答：应采取的质量试样为 0.16g

18•用硅钼蓝分光广度法测定硅的含量。用下列数据绘制标准曲线: 硅标准溶液的浓度/mg • mL-1 吸光度（A） 0.050 0.210 0.100 0.421 0.150 0.200 0.250 0.630 0.839 1.01 测定试样时称取钢样 0.500 g,溶解后转入50 mL容量瓶中，与标准曲线相同的条件下测得 吸光度A=0.522 ,。求

试

样

中

硅

的

质

量

分

数

。

解：

由图得ab=4.200

根据题意得

硅的质量百分数 Si% — 100%

M

△ V

二

— 100% ms

0522

50 104200

100% 0.500 = 1.24%

二

；

答：试样中硅的质量百分数为 1.24%。

19.钢样0.500g溶解后在容量瓶中配成 100 mL溶液。分取20.00 mL该溶液于50 mL容量 瓶中，其中的 Mn2+

氧化成MnO4后，稀释定容。然后在 入=525nm处，用b=2 cm的比色皿 测得A=0.60。已知k525=2.3 X03 L • mol-1 • cm-1，计算钢样中 Mn的质量分数（% ）。

解：A=kbc

c 二

A kb

0.60

2.3 103 2

3

= 1.3 10-4 mol • L

试样中锰的质量 m=1.3 X10-4>0.05 g 04.94=17.86 10：-4 g m

Mn%=

17.86x10， 0.500

100% =0.36%

3cm

0.500

20.某有色溶液在1cm比色皿中的 A=0.400。将此溶液稀释到原浓度的一半后，转移至

的比色皿中。计算在相同波长下的

A和T值。

A2=?

解：设 b1=1cm b2=3cm A 1=0.400 C2=0.5C1

A1= K b1 C1 A2=K b2C2

得 A2=0.60

T =10 ^ =10^.^ 25%

2

21 •服从郎伯一比尔定律的某有色溶液，当其浓度为 c时，透射比为T。问当其浓度变化为

0.5c、1.5、和3.0c,且液层的厚度不变时，透射比分别是多少？哪个最大？

解：由 A=-lgT= K bc T =10一\"

(1)当 C2=0.5CC T2 -、T (2)当 C3=1.5C 时 T3 hP'T3

（3）当 C4=3.0C 时 T4=T3

T<1 T2最大

22.已知KMnO4的K 525=2.3 X03 L • mol-1 • cm-1，采用b=2cm的比色皿，欲将透射比 T的 读数范围15%— 70%，问溶液的浓度应控制在什么范围（以 卩g • mL-1表示）？若T值超出 了上述范围时应采取何种措施？

_0 434

解：根据公式 c= —.—4 lnT

kb

T=15% 时，C=

. —+

23\"0“2

-1

3

In0.15=1.79 1Q< mol/L

-4

P =1.79 >10-4mol/L M58.03X 103 卩 g • mL

=28.3 3 g mL

.

T=70% 时，C=

2.3域103 汇2

—U/+O*+ -5

3 ln0.70=3.36 1> mol • L

-1

P =3.36 >0 5 mol/L >58.03 > 10’ 3 g • rrFL5.3 3 g ml 1 浓度因控制在28.3— 5.3」g・ml-1，若超过范围

应适当稀释。

23.有一浓度为2.0> 10-4 mol • L-1的某显色溶液，当 g=3cm时测得A1=0.120。将其稀释一

倍后改用b2=5 cm的比色皿测定，得 A 2=0.200 （入相同）。问此时是否服从朗伯-比尔定律？ 解：假设此时

符合朗伯一比尔定律，

A=K be,则摩尔吸光系数

K1= 一

b1c1 3 2.0 10 - 4 K1工K

A1 0.120

=200

K2=

b2c2

A2

0.200 5 1.0 10^

假使条件不成立，即此时不符合朗伯一比尔定律

24.某一光度计的读数误差为 0.005，当测量的透射比分别为 9.5 %及90 %时，计算浓度测

量的相对误差各为多少？

解：光度计的读数误差为 dT=0.005 , T为透光率。 根据朗伯-比尔定律，浓度的相对误差 0.434dTdC

Er= 100%= 100%

C TlgT

当T为9.5%时

43405 Er=dC 100%=0^4d! !00% = o.o. 100%=-2.2%

C TlgT 9.5% lg 9.5%

当T为90%时

。Er= 100% = 100% = °. 100%=-5.2%

TlgT C 90%lg 90%

答：浓度测量的相对误差分别为 -2.2% 和-5.2%。

25.某吸光物质 X的标准溶液浓度、为 1.0 X 10-3 mol • L-1,其吸光度 A=0.699。一含 X 的

试夜在同一条件下测量的吸光度为 A=1.000。如果以上述标准溶液作参比，试计算:

试夜的吸光度为多少？ (1)

(2) 用两种方法测得的 T值各为多少？

解：试液的吸光度 A f=A X-AS=1.000-0.699=0.301 一般方法下，测得的标准溶液 TS=10-A=10-0.699 =20% Tx =10^ =10 二=10%

用示差法测得的TS=100% Tx =10亠=1O”301 = 50%

26•在Zn2++2Q2— ZnQ22-显色反应中，螯合剂浓度超过阳离子浓度 40倍以上时，可以认为 乙门2+全部生成ZnQ22- 。当 Zn 和 Q2+ 的浓度分别为 8.00X 10-4 mol • L-1 和 4.000X 10-2 mol • L-1

时，在选定波长下用 _1

mol • L , CQ=2.10

dC

0.434dT° 4340051cm吸收池测量的吸光度为

0.3。在同样条件下测量 cZn=8.00 X 10-4

0.273。求此络合物的形成常数。

X0-3 mol • L-1的溶液时，所得吸光度为

2+2- 40倍以上时，Zn全部转化为ZnQ, 2解：依题意得；当螯合剂的浓度超过阳离子

当 A1=0.3 时

— 4^^50.40

CZn2 8.00 10

22

故在 C2〜8.00 10CQ2_ = 4.00 10’ 时，Zn 全部转化为 Zn Q? 一 Zn

：

= 8.00 10

当 A 2=0.273 时

，(mol/L)

CZn2 8.00 10

有上

C

A2

I

故Zn 未完全转化为ZnQ22-，根据A= K be

2ZnQ2 2+

C

ZnQf -

0 273

则溶液中剩余的

C 2\"0273 8.00 10 — 6.00 10*(mol/L) ZnQ2_ 0.3

CZn2+ = 8.00x10, —6.00X10* =2.00x10*(mol/L)

CQ2_=2.10 10\" -2 6.00 10* =9.00 10*(mol/L)

再根据Zn2++2Q2-

C

2-

ZnQ2

0.414=2.78 1X XXCA+5.875 X0 X1 XCB

CB=3.69 X10 mol • L

-5

-1

2 3

ZnQf-

2

2.00 K平衡

27.有下列一组数据，求未知液中 A与B的浓度。

-1浓度/mol.L 吸光物质 波长/nm 6。2CZn^CQ-

J\" +

00

吸收池厚度/em 吸光度 A -4 440 590 440 590 440 590 1 1 1 1 1 1 0. 683 0. 139 0.106 0.470 1.022 0.414 5. 00X10 -5 B A+B 8.00 10 未知 解：设A、B在440nm时的摩尔吸光系数分别为'■- A1、‘' B1

A

A=

beA

_ AB1 B1

0.683 ‘ =1.366 103

1 5.00 10 1~8^心25 103

=beB

在，=590nm

时，A、B、k的分别为kA2、kB2

0139

0470—=2.78 M02 kB= jA^ .=5.875 103

1 bCB 1 8.00 10

2

kJ

bCA 5.00 10

两中溶

液混合

A2= ' A2 X) X3A+ ■ B2 b X?B

3

3

1.022=1.366 10 X1 XCA+1.325 10 X1 XCB 代入以上数据，解得 CA=7.12 10-4 mol • L-1 28. 2-硝基-4-氯酚为一有机弱酸，

质中，配制成三份试夜，在 中该酸不解离，其吸光度为

准确称取三份相同量的该物质置于相同体积的三种不同介

。在0.1 mol • L-1HCl介质

25oC与427 nm处测量各自的吸广度 0.062;在pH=6.22的缓冲溶液中吸光度为

0.356在0.01

mol • L-1NaOH介质中该酸完全解离，其吸光度为 0.855计算25°C时该的解离常数。

AHB -

A

其中， AB-、AHB分别是以B-、HB型体存在时的吸光度， A为在pH时的吸光 度。在本题

中：

AAB =0.062， AB =0.855

pH时的吸光度 A=0.356

A - AB「

AA

解：由酸碱解离常数公式:

- AB_

HB

- A

=6.22+ lg 0.356 - 0.855

0.062 -0.356

=6.48

解之得：Ka = 3.31 10-7

29. 1、2两种化合物的紫外吸收光谱

如图10-13,欲双波长分光光度法测定混合物中

1、

2 两种组分的含量，试用作图法选出相应的波长组合。

图1(1 - 13习题29的吸收光谱

解：根据双波长组合的选择的等吸收点法应满足的两个条件： 一是干扰组分在所选的

两波长处具有相同的吸光度； 二是被测组分在这两波长处具有较大的吸光度差的原则作图如 下：

由图可知，在测定组分 1时，选用的波长组合为 入i为248nm ;入2为270nm。在测定

组分2时，选用的波长组合为 入i为252nm ;入2为284nm。