量 ．．Ｉ ＶＥＴＥＲＩＮＡＲＹ 猪伪狂犬病净化案例 祖海涛，张长莹，王爱国 （勃林格殷格翰动物保健，上海２００１２０） 纠运动， ‘Ⅱ 仟措叫，： 嘶【Ｉ ， ２０１１年以来我国的ｊ若伪狂犬病（ＰＲ）发病牢明：ｌＩＩ增加， 抽搐，划船样，逐渐…现 歇性转ｌ多篇报道显，Ｊ 猪伪 尺痫毒（ＰＲＶ）发生Ｊ 变 ，变讳毒株 【Ｉ吐白沫，很快化亡，发病猪 体温一般 ４ｌ℃庄 。 敛病力增强，Ｉ＂ｌｉｂ］‘『 场Ｊ 产生ｒｉ艮多埘Ｂａｒｔｈａ Ｋ６１毒株疫苗 ２－２解剖病变 保护力质疑的 。随 旧家颁布《中长期动物疫病防治规划 解剖发病 只，ｒｌ『 在肝、牌等崆器 【 有米 人小的 ＿１色坏死点，喉 屯血，扁桃体…现灰『Ｉ色的坏北 。ｆｌ｛ （２０１２ ２０２０）））和各项鼓助的…台，以及养瞄场自 竞爷 坟『力币Ｉｌ儡利能 需求的提升，措伪狂火病的净化 成为行、Ｊｋ，ｆ－声。 现神经症状的ｆｆｊ苦，－叮 脑膜肿ＩＩ长，呐脊液增多。 勃林格殷格翰自２０１４ 呔歼始提…实施猪伪狂 病净化项Ｕ， ２．３ ＰＣＲ检测和基因测序 一 种５者场探索净化道路，经过ｌ午的实践和努力已 成 采取２ 发病猪 的脯组 ｛、扁挑ｆ本进行ＰＣＲ俭洲， ｌｇＢ ｇ－因片段扩增结 均 ｍ・ 。将分离剑的毒 效。卜向就跟人家分享使用Ｂａｒｔｈａ Ｋ６１毒株伪狂夫疫 免疫 结果ｇＥ平Ｉ结合系统方案实现猪场ＰＲ净化的成功案例。 株命名为ＳＨＸ ２０ｌ５，分别将ｇｌ 和ｇＢ序列测定 。 在 ＧｅｎＢａｎｋ 与什｛关Ｊ卜歹ｌＪ比埘，ｒＩ ＮＣＢＩ』 Ｉ库ＧｅｎＢａｎｋ卜 找ｒ经典毒株ｆＩ 【 近儿午ＰＲＶ变 毒株的ｇＥ／ｇｌ｛Ｊ卜列， 绘制遗传进化坩，ｇＩｃ荩 序列ｉ，￣ｔｔ结果 禾检测硎的蓐株 Ｉｊ ＪＳ ２０１１毒株（上海曾 医研究所童咒志６Ｊｆ究员分离的ＰＲＶ 爪伶洲 离的 １ 猪场背景 东某养猜集Ｉ卅，， 产纯种札洛克、ｋ ｎ、火『 Ｊ ｊ符。 其【ｆ１ Ａ、Ｂ、Ｃ场为集…ｆ１身选种繁育的核心场，母猪 模分 圳为６００、１２００、６００ ， 点式 产，全进全 ， 伪狂火 病均为阳性，Ｉｃ场为从Ｉ 外引种的核心猪场，猪伪狂火病为 变 强毒株）亲缘天系破近；ｇｔ｛坫【 序列埘比结 ｊ ｒｒＪ株（【ｌ合尔滨兽 Ⅲ究所仇 ｌ匕 ０研究 …性。这４个猪场均他川ｔ某国产ｒ… ｊ者伪狂火基 缺，夫疫苗 剑的 株｝＿（Ｂａｒｔｈａ Ｋ６１株）进行常规免疫，结伪狂尺病免疫 ｒ『＝为： ｍ衍普免４次／ ；ｆ Ｊ ５５日龄、９０口龄分圳免疫１次。 ＰＲＶ变异姒每株）采缘火系最近。 ３血清学检测结果 根据 诣场的猜伪扯火病 ｇＩ 抗体愉洲结果． 每 个指场各阶段ｊ昔 ｇＥ抗体阳性率分布情况。３个 场公指、 ２猪伪狂犬病的诊断 ２．１ 临床症状 ３个猪场偶尔会Ⅲ现 房仔ｊ嚣腹泻，个别仃ｊ若呕吐等表现， 部分 猪 ｆｆ｝观临床 ｌ定后不久表现不同橼度的神经症状， 备母猪肢 ， 到ｌ（）０％， Ｉ 猪的 毒阳 Ｈｉ丰均高＿『 ６０％，仃的｛０ 达 ２２ ｊ吉】龄Ｉｌｌｆ，指伪 尺 毒… 率也 ｋ ０巴５ １００％， 退３个 场ｒｆｌ，Ｃ场的ｇＥ抗体…性牢小ｉｉ．Ｉ： 人、 表１ 被检毒株与国内流行毒株同源・陛比较％ 图１ 产房仔猪神经症状 图２产房仔猪腹泻 图３ 扁桃体白色坏死灶 图４ 肝脏表面白色坏死点 图５ 脑脊液增多，脑膜肿帐 ２０１７ ３４卷 （１）２蝴Ｓ％ｑＮＩ：，ＩＮ【）ＵＥＩ ＲＹ ＳＣＩＥＮＣＥ猪业科学 ７７ 猪场兽医 雨 Ｈ● Ｈ” 畦 ∞帱Ｂ３∞１３ Ｚｔ ｍ耐簟＇￣ｒｍ，ｌｍ氍Ｉａ＇ｏ 囊Ａ抽 Ｆ＾．Ｅ ＡＦ‘０３“鲁 坩心神 批３７ １ ＳＤＷＦ２口８Ｋ．１５２６，１３奢ｔ ＇Ｙｏ，ｎｇ￣辅ｊ，哪篮．ａ ０∞¨ ＨＵＹＤａ８Ｋ．．１５２６，１３２１ ｏ ｍＨ” 畦 Ｈ．Ｎ１ ９∞５ Ｙ 帅Ｉ｝１ 呻ＫＰＯＯ９８８￣ ￡ｊ翻 ＡＦ１７￣９３７ ＰＲｖＴＪ 砷糊Ｈｅｒ￣ｎ ａｅＫＰ００９￣０ ＰＲｖＴＪ Ｌ＾口Ｅ＾Ｙ１７３￥２４ ＳＨ ２９＇５口Ｂ 删 ６０ ＰＲ ＢＪ．ＹＴ ＰＲＶ ２ｏ＇２ Ｙ ｌｄ＇州３Ｉ ●删雌 ＰＩｌ ｊ孓 ２Ｏ＇２ ＳＨＸ２＇０＇５鹾 ＰＲｖＺＪｏ１ ８ａ－ ａＪ ９７２１７ ３Ｃ ａＥ●（＿●＾７ 瑚Ｗ￣ｇ，Ｅ ＡＹＩ７０３＇ｅ Ｐ刚ＺＪｏ１ ＰＲＹＨ鬯Ｎ１ ＰＲＶＢ士ＹＴ ∞｜Ｉｌａ．ＩＦ ９糟１７ ＺＯＯ ４０，０ 瑚 ０ 删 １Ｗ １ｏｏ ０ ’５，０ ｔｏｏ ５。 ｓ杜１００） ¨ｔ蚶ｅ翻｝０ｅ３ｕ髓姐缸枷～州ｍｔ，●Ｓｕｈｉ■ｕｂｏｎ，“’０Ｏ｝ 图６ ｇＥ基因序列进化树分析 Ｉ｛ｊ勿ｇＦ，抗ｆ ｌ：日 ；＃十｝ｉ对梢ｆ氐。 根 Ａ、Ｉｊ、Ｃ３个猪场 ＩｌｌＩ缶味表现、解剖痫变、ｇＥ抗 图７ ｇＢ基因序列进化树分析 体伶｝ｌＪ１１Ｊ肢 Ｉ 妊摅因 列分析结 ，结台这几年伪 火病毒变 垃株的流 特点 综合分忻．町以判断这３个ｊ 场感染的 伪 火 均 Ｈ前＇｜要流行的ＰＲＶ变 毒株。 发病ｊ耗场 囊 － Ｉ－＿．＿＿－ 、 ，Ｉ ｌ 薹 ２ Ｏ ８ ６ ４ ２ 吠拖－￣－，ｒｚ 化 ２Ｉ１ ， ・ ，防控Ｊ１Ｉ 很大。 使川 产品忡；扦伪ｉ￡尺病疫 进行 绝疫，ｆｆＩ址从血清学结果行术 场的ＰＲＶ野毒 …：率依然 ４ Ａ Ｂ场猪伪狂犬病的控制 ４．１ 首次调整免疫程序和生产管理措施 ４．１．１ 更换疫苗并悯整免疫程序 根 Ａ、Ｂ两场的临ｒ未表现和 场ｇＥ抗体测的情况 埘 伪 病疫苗肢 免疫 序做女¨下ｉ 整：所仃猪伪 火 病疫苗。更换疫苗时． ２ Ｏ ８ ６ ４ ２ 口０ Ｏ ０ ０ ０ ０ 婶婶 咻 誉＿ 啡 曩曩重曩■曩Ｉ 鐾Ｉ审 ● ■■■曩 星ｆ甘啦 照■■■■■■ 星ｆ廿普 一 ｌ ＪｌＪ… ９Ｉ Ｊ雕蕾罾蚕 曩疆■暑‘ｇＥ抗体阳性率 日 抗体阳性率 ■■■■●Ｉ 毂时普 ｍ凝廿普 ＾ 疆■■■■ｌ 蜀 慢茼均虹换为勃林中ｆ｝公司的ｊ并伪 曩■日■Ｉ 鳃甘 普口 疆■■■●■■ 挺哩粒瑶匮ｍ Ａ ．＇—■—■曩 姆疃韫瑶匮 鲰喏恒瑶埕『 研仃公 、ｆ：上猪普见１ 份，１个门后』Ｊ『１强免疫 次，以 觚３个』｛ 绝一次，妊次免疫的ｌ卉ｌｊ 均为１头份；新ｑ 仃ｊ｝ｊ ｆ Ｅ昕的３ ｄ内滴 免崾１ 份，５ 龄、９周龄肌＿＾Ｊ 射 场 ｇ 瓣喏垃聿颦匮＊ 饱 延备ｌ 份。其他疫苗的免疫程序吖 做调整。每个季度埘 ｍ重蚕““Ｈ “ 挺喏霞瑶暇 ｇ 馘 性蝣匮。＿【Ｂ 避喏恒瑶匮｜Ｉ。晕ｆ曙艋毒荦睦ｆ＝＿举 ｌ几 ｎ 抗体阳性率 ｊ｝｝悱怍 次抗体榆洲， ：根椭｛＝＝：；＝测结Ｉ粜７＝乏时渊警 疫程序。 ４．１．２ 产管理和生物安全措施调整 衍场的操作办Ｉｈｉ，要求猪场在做疫苗接种时，种衍・ ｊ 一针 ，， Ｋ措群・栏一针 ，ｊｆ：要求专门技术人员埘猪 毅豫絮姆溉搬挺织挺擐穗豫积撅絮絮靼挺 － 抗体阳性军 醒 璺！毒阜惶ｆ 晕ｌ昨毋ｉ毪匮。Ｎ川 ■■■■●－ 姆略髂船埕『＝士口 卜∞ Ｉ＿＿ ＝＝＝＝昌 是塞塞塞骂莲蓬莲程ｏｇ莲罐莲莲惶ｏ＝ｏ落蹉枉ｏｇ 崛 ：芸薹蔷蔷翟藿蔷爱蠢藿鍪警蔷簧 毂 懂毒譬匾 果 图ｉ ０ Ｂ场ｇＥ、ｇＢ抗体检测结果 ｆ 定后ｌｌｆ按种疫苗。每个季度对伞场做一次彻贼的灭鼠。 １）ｆ 房严格嵛养，如必须寄养时，需在ｆ『猪ｍ生后 ４～４８ ｌ１『．１、ｌ进仃； 本次调整３个月Ｊ 对Ａ、【｛阔场的衍群进 抗体检测， ｌ￣１Ｕ，Ｊ‘对ｊ 场伏行ＭｃＲｅｂｅｌ管理法 Ｕ ７）乏其他生物安全措施： 结果如图９、【矧１０所示。 由于ＰＲＶ感染后，猪群会终身带蓐，种措群虹新速度仃 限，短时问内阳性半没仃太人变化。从检测结果行，Ａ场 卜 ：、 割、断尾『｛Ｉｊ严格消 ； 长 群ｇＥ抗体阳性牢｝Ｊ月 下降，临『未卜也比较稳定，酏｝１ＪＪ 率Ｉ 降 ２）小 之 更换针 ， ３）ｊ苦 Ｉ 病后， 将病ｊ杼移争 他猪栏，受【］猪只疾病较 Ａ场ＰＲＶ 硎ｒ较好的控制。１３场猪群ｇＥ抗体 乃严重，埘 实施安乐死； 叫显，而且可以发现，１０剧龄以前ｇＦ．抗体逐渐Ｆ降，以 ５ ｄ以 ； ｌ０瑚龄左朽的短时 可能干丁拼伪狂夫野毒感染。结合措样 ４）每栋猪合Ｉ 计惭奶、转 ，仔猪断奶后立刻转入保育禽， 后ｇＥ抗体义逐渐增加，从抗体的变化规律可以推惭，Ｂ场 许埘 房 呔济洗、消毒、 ５） 格的批次 、全进 出、 ・刈‘一转 ，禁止上具、 的临床表 平【Ｉ猪场的 产管理，发现猪群 ｌ０ 龄从保育龠 转入育肥舍后，存 ｝ＪＩ】 的发烧、咳嗽＿表现。 时Ｉ３猪场育 吧含的湿度较大、育肥台没有做刮严格的全进全…，部分达 育肥禽 饲养，Ｉ 时育ＪＪ巴含仔花猪群混 、凋拦的观象。 人ＩＪｊ、指 之间的交义； ６）严禁 同口龄豫只之１【ｊ】按触、混群； ，ｔ＂…－Ｌ￣定地点消洗、消薄。 ７）严禁种ｊ者和商 猪群接触，措 销售时运猪车辆需要 到出售日龄的猪只 为体重较小继续 ４．１．３血清学监测埂结果分析 ４．２第２次调整免疫程序和生产管理措施 ７８ 猪业科学￣Ｖ￣ＩＮＥＩＮＩ）ＵＳｑ、Ｉ 、ＳＣＩＥＮＣＥ ２０１７ ３４卷 ０２期 ＶＥＴＥＲＩＮＡＲＹ 量 ．．Ｉ ’ ４．２．１ 测榷免疫程序 通过 次渊 ，Ａ场的商一 抒群Ｉ ＲＶ ｒ较＂控制， 由Ｊ Ｃ场 伪ｊ 尺 １ …一＇Ｉ，ｈ牢较 ，防 …，，ｆ 物玄全 ～ 力 人， ｔｔ．１‘ ●Ｊ重ＩＩＩＩ＿睡阻 、Ｉ｜瞳疆阻 ， 圳悱闪祟较多。乃净ｆＩ匕ｃ场；行伪 ． 感染Ｉｔ・ｒ川 Ｊ ．推移，为巡饱似源抗体刈疫 ｒ见疫的影响、捉 ｊＩ 人＝痫外ｆ 留彩 育种所取 的优秀， 种，决定果Ｈｊ消群／ ，断疫｝竹埘仃１巴 群的保护．将Ａ场生Ｋ 群绝疫稃 渊格乃 ｍ新建斛的 案求净化ｊ并伪 Ｈ ｆｌ：ｊ￣－３（１内滴 免疫，９删龄、１２ ｇＩ＇￣Ｈ）Ｌ肉注 病。ＪＩ体方案乜 以 骤： ＿－＿Ｉ 新ｑｉ １）消 Ｃ场，将优秀干叶ｉ 转人八、Ｂ场ｆ 养，Ｃ场 进 ．．一圜 特行，｝Ｊ】呔消洗、消 ， 埘设备进行改造、维修、 ，ＪＪｊ时、 ； －Ｉ－－．－辫 ＿Ｉ疫。｝３场 疫 Ｊ 变。 ， ４．２．２ ｄ－：产管 和生物安全措施渊 ｛＝【｛ 首次抗体俭洲的结果，以肢衍场所 在的¨题，ｆ１ 仃，Ｉ 管 、 物安全的膳础卜，对｝｛场作…如Ｆ渊 ： １）育肥 ， 格做到个进全…，蚪加灿育肥禽的窄 、消毒、 ｒ燥Ｉ：作； ２）川ＩＩ，Ｊ 经过’ 年的ｉ』ＩｉｌＪ整，Ａ、Ｉｊ场通过疫＊免疫、 ｉ Ｊ 箭 、生物安全 措施他；行伪 欠病 硎有效 浦ｌＪ＿ 眯稳定讣能培钳…阴 ｝，ｋｌｉ￣－簖利・ｊ＊； Ｉ＿＿Ｉ＿’舅 ｌＩ＿Ｉ＿！疆 ， Ｉｌｌｄ龋夺． ３）从Ｉ Ｉ Ｖ ！ｒ， Ｊ性Ａ、Ｂ场及Ｉ ＲＶ ｉ 颤ｆ垌・ｒ ｎ Ｅ场Ｉ～ ●●．Ｊ疆醺 挑选１３～２０川龄伪 尺 ２）保 ， 转人 ｉｉ ＩＬＬ 禽ＩＩ・ 一时 转 ，严禁 ３）加姒痫ｊ符、 亍抒的淘汰 符埋Ｊ：怍； 、 芒 ； 所ｆ『后备种 Ｊ 备利ｌｊ｝ｆｊ韭入Ｃ场， 离制球， ＩＩ瞳霞疆夸 转人ｃ场前彳 少肌肉 Ｌ－ｇ．Ｈ安种措伪扛犬疫 ２次，待ｃ场后箫 衍数 达ｊ 『ｊ怀 止（４５０ ＩＥ右）， Ｉ卜０『和｝１， 对Ｃ场封群，转为『］繁ｒ１ ； ４）埘后备种猪进行系统筛 币Ｉｌ淘汰： ４）ｊｆ｝群转入育忆禽前Ｊ １川内饲料【１１添＿ＪＪｌ１抗 祟平ｌＪ电 多ｆｌｉ｛．ｉ￣行 健。 ４．２．３ 消学 测及结果分析 １２。 ① ｌ转入Ｃ场 胴后进行第１次『［Ｊ！ｌＪ，ｇＥ抗体 ｌ＇ｈ Ｕ『Ｊ｝５ －？人， ｊ 继缄 Ｃ场 离川养；② 次榆洲４ Ｊ． 后， 州 ３个Ｊ｛后埘Ａ、Ｉ｛ 场的指群做抗体检测，伶ｆ【ｌ！ｌＪ结 女¨ １ １、 对浚批次０Ｉ入 所仃撕 ｌ 次呆ｍ捡洲ｇｌＣ抗体；③盘Ｊｊ・批 ｕｒ见， 前！次十［ｊ比，Ａ场１０ Ｊ 龄以Ｉ～ ，此次｝ ｌ Ｊ的ｇＥ抗体 ，Ｊ ： 连续２次ｇＥ抗体检测均为『５Ｊ】性，ｉ／：『｛ 做 所有 蔓 隔离侧眷， 人 ｆ吐猪 ；④每一 牢仃研Ｉ 降，说ＩｌＪ】通过』ＪＩＩ妊母 的疫Ｉ ｆ 免疫、 的免疫 Ｊ ， ． 物友食 措施，并不断用 川 后 指更换 批措转入Ｃ场Ｊ 的 ６ 、 １０” 分圳按种１次ｊ符伪 尺 拎测／＇．ｔ－ｊ杆、公ｊ｝ｊ ｆ：土 ，、卜 以Ｊ ，母ｊ符腓的伪 火野毒Ｉ；Ｉ Ｍ－：牢仃所降低， 病疫苗；⑤Ｃ场Ｉ 耵，Ｉｊ ：后，觚个夺瞍 ｆ５ＩＩ．Ｈ－种 ｆ’上 体『Ｊ、】ｇ１ 抗体 幢、迪过母源抗体他递给ｆｒ 的ｇｉｇ抗体 于并伪扛ｌ火痫ｇＥ抗体， 按照一定比例伶洲 长ｊ 肝，发现 淌度… 降 ；ｄ－．ｋ育吧ｊ｛｛群的ｇＥ抗体ｍ性丰也日』】ｌＩ 降低， 能０ｇ …刚性：Ｊ 箭 。Ｉ；场测 小 ，通过』Ｊ【１强 霄合转人育肥禽 划淘汰。连续 次所仃ｊｆｆ Ｉ的柃＝：Ｉ｛！ｌＪ结 均为 Ｊ悱， ｌ５月一 ，以Ｊ 每个胥度埘 群按 ・ 判断ｊ告场为伪 尺病 ｔ＇￣９ｄ－：产符州ｆ¨生物安 ，结合Ｉ卜确的 芷 定比例抽拎ｇＥ抗体。 绝嫂，２２＿『『ｆ１＿Ｊ龄的ｆ『Ｉ巴 群ｇｇ抗体阳 率从之前的ｌ００％Ｉ 降 ４０％，ｌＩｆｉｉｌ未上也趋于稳定，｜兑明Ｉｊ场的ｊ｝ｆ伪狂尺病也 ５）执ｆ 卡ｆ｝的，卜， ：箭 干¨，ｆｉ物发 措施，定ｊ９】对 【 培 训，提高 Ｅ￣ｇｄ－：物安 意 ！。 纠仃放控 ，随后将Ｉ３场的生ｋ 群绝疫程 州整为新， ｒ ｊ ｌ｝１ Ｊ ３（１ ＩＬ］滴ｆ 免疫，９周龄、ｌ２ Ｊ 龄ＨＪ¨幻“！ ・】 嫂。 历时 年之Ｊ ，ｃ场实现ｒ 伪 足痫 薄 并 投入Ｉｒ常，１ 。 的［Ｊ杯， ５ Ｃ场猪伪狂犬病的净化 ６总结和讨论 病毒变异力Ｉ１人ｒ 伪 防控的准Ｊ笾，在ｆ戈案例Ｉｌ１ｊ并 忐 Ｍ－＇Ｆ－－ 场流行毒株也是ＰＲＶ变 株，伏战ｉ，Ｄｌ，ｑ，【ｌＩ】他 ｇ￡抗体阳性率 －ｇ８抗体鹰性牵 『 的情况卜，通过ｉ 啪 施 伪 尺疫Ｉ竹的免疫，仍然 ， Ｉｌ＿结合 的 产 以仃放控制临床症状、减少野蓐循环， 后 种 。 管ｆ 平ｌＪ叫ｉ物安全措施， ｒ以逐渐降低 场Ｉ ＲＶ ｍ・ 率』 肯 场具体情况吖 ㈦，疾病防控措施 因时 地芹川 ｆ’１ ， 疫｝ｗ是ＰＲＶ控制 净化中的 嘤［ＪＩ，但伙践中／ｆ 过度依 赖螋 免疫，ｆＩ 合卵免嗖的艇础Ｊ：，结合 场具体・ 况 施 严格（１９ｄ－物安伞措施、合理的临洲制眨也是 ｇＥ抗体阳性率 。ｇＢ抗体阳性牵 重要的。 对于 伪 尺病的 化，￣ＩＩＦｒ Ｊ 他 法，消群／ 新 建舯是更 Ｉ 述仃放的，然 ｊ成本也 高。伏战ｉｌｉ＿ ｝ｔ｛ 具体 ，场 选择适介『ｌ 的 案。疾病净化是・个系统【： 需要ｌ１Ｉ】‘ 、 心以肢。０ 持吖 懈的努力！ （收稿Ｈ ：２０ｌ６ ０８ ｌ ） 图１ ２ Ｂ场ｇＥ、ｇＢ抗体检测结果 ２０１７ ３４卷 （）２划ＳＷＩＮＥ ＩＮＩ）ＵＳＴＲＹ ＳＣＩＥＮＣＩ 猪业科学 ７９
