肺炎支原体肺炎患儿补体、免疫球蛋白含量与炎性应激反应的相关性分析

中国临床医生杂志2019年第47卷第12期

肺炎支原体肺炎患儿补体、免疫球蛋白含量与炎性应激反应的相关性分析

张延峰,王栋梅,杨琳东吟(陕西省延安市人民医院儿科,陕西延安716000)

摘摇要:摇目的摇探讨和分析肺炎支原体肺炎(mycoplasmapneumoniaepneumonia,MPP)患儿血清中补体、免疫球蛋白含量与炎性应激反应指标的相关性分析。方法摇选取陕西省延安市人民医院2016年6月至2018年12月收治的MPP患儿(216例),根据病情轻重分为重症组(78例)和轻症组(138例),并取按照数表法随机选取同期健康体检儿童102例为对照组,测定三组血清中相关补体、免疫球蛋白含量和炎性应激反应介质浓度以及炎性应激分子表达量,对三组上述指标进行比较,并对MPP患儿各补体、免疫球蛋白指标含量与炎性应激反应介质浓度和炎性应激分子表达量进行相关性分析。结果摇三组血清补体3、血清补体4和免疫球蛋白M含量比较,重症组>轻症组>对照组(P<0.01);三组免疫球蛋白A含量比较,重症组<轻症组<对照组(P<0.05);而三组免疫球蛋白G含量比较,差异无显著性(P>0.05);三组血清可溶性细胞黏附分子1、可溶性白细胞分化抗原40配体、重组人高迁移率族蛋白框1、肾上腺皮质相关激素、氧自由基产物浓度为以及Toll样受体2,Toll样受体4,白细胞表达补体受体11b,白细胞表达补体受体18,髓过氧化物酶,NADPH过氧化酶的表达含量比较,重症组>轻症组>对照组(P<0.01);与炎性应激介质相关性:MPP患儿血清补体3、血清补体4、免疫球蛋白M与其呈正相关(P<0.01),而免疫球蛋白A与其均呈负相关(P<0.05),免疫球蛋白G与其浓度无相关性(P>0.05);与炎性应激分子相关性:MPP患儿血清补体3、血清补体4、免疫球蛋白M浓度与其均呈正相关(P<0.05),而免疫球蛋白A浓度与其均呈负相关(P<0.05),免疫球蛋白G与其表达量无相关性(P>0.05)。结论摇MPP患儿血清中免疫球蛋白和补体含量具有明显变化,其变化程度与病情严重程度显著相关,免疫球蛋白和补体异常与MPP病程中炎症应激反应的过度激活密切相关。关键词:摇肺炎支原体肺炎;免疫球蛋白;补体;炎性应激反应;相关性

中图分类号:R725.6摇摇文献标识码:A摇摇文章编号:2095-8552(2019)12-1474-04doi:10.3969/j.issn.2095-8552.2019.12.031

摇摇肺炎支原体肺炎(mycoplasmapneumoniaepneumo鄄

重症组(78例)和轻症组(138例)。重症组:男42例,女36例,患儿年龄2~9岁,平均(5.6依0.8)岁;轻症组:男66例,女72例,患儿年龄2~10岁,平均(5.7依0.6)岁。按数表法随机选取同期在本院体检健康102例儿童作为对照组,其中男46例,女56例,年龄3~9岁,平均(5.6依0.9)岁。三组在性别、年龄等方面比较差异无显著性(P>0.05)。

1.2摇纳入和排除标准摇纳入标准:淤所有患儿入院MPP诊断和病情程度划分均符合《诸福棠实用儿科学》(第7版)中有关MPP的相关标准[3];于病程均<8d,为急性发病期。排除标准:淤伴有急性支气管炎、支气管哮喘、肺结核以及其他感染疾病;于自身免疫疾病、过敏体质;盂入院前接受免疫治疗、抗生素治疗。1.3摇标本采集方法摇全部MPP患儿在治疗前清晨空腹抽取肘静脉血10ml,对照组体检儿童清晨空腹抽取肘静脉血10ml。将5ml静脉血在离心机上以2000次/min离心20min,将分离的血清置入-70益冰箱内

nia,MPP)是指肺部受到支原体感染后引起的急性呼炎症和应激反应在MPP患儿的病程中处于明显激活状态,病情严重者可导致重症肺炎同时合并多器官功能障碍的发生率会明显增加[1]。补体和免疫球蛋白是机体内进行免疫调节反应的重要物质,其中补体通过介入炎症反应和免疫应答参与支原体感染后局部组织的损伤过程,而免疫球蛋白通过参与MPP体液免疫反应对支原体进行直接清除[2]。为了探讨MPP患儿血清中免疫球蛋白、补体含量与炎性应激反应相关指标之间的相互关系,本研究对收治的MPP患儿的相关资料进行分析,并与同期健康体检儿童进行对照,现报道如下。1摇资料与方法

1.1摇临床资料摇选取本院2016年6月至2018年12月收治的MPP患者216例,并根据病情严重程度分为

吟

吸系统感染性疾病,是儿科常见的呼吸道感染性疾病。

通信作者

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待用。将另外5ml通过EDTA做抗凝备用。1.4摇观察指标和检测方法

1.4.1摇血清补体和免疫球蛋白摇血清补体3(comple鄄蛋白M(immunoglobulinM,IgM)、免疫球蛋白A(im鄄

白细胞表达补体受体18(CD18)、髓过氧化物酶(my鄄eloperoxidase,MPO)、NADPH过氧化酶(NOX2)表达量测定:取经EDTA行抗凝备用的5ml静脉血样本以荧光孵育的方式进行培养,并进行洗涤和离心处理,采用美国BD公司生产的FACSCanto域流式细胞仪对TLR2、TLR4、CD11b、CD18、MPO、NOX2进行荧强度测定。

1.4.4摇观察指标摇淤对三组上述血清补体和免疫球蛋白、炎性应激反应介质、炎性应激分子等检测指标进行比较。于对全部患儿上述血清补体和免疫球蛋白的含量与炎性应激反应介质浓度、炎性应激分子荧光强度进行相关性分析。

1.5摇统计学处理摇将检测所得数据采用SPSS19.0统计软件进行处理,计量资料以(x依s)表示,三组间指标比较采用方差分析,全部患儿变量间相关行分析采用2摇结果

Pearson检验,结果以P<0.05表示差异具有显著性。

誗论著誗摇1475

ment3,C3)、血清补体4(complement4,C4)和免疫球munoglobulinA,IgA)和免疫球蛋白G(immunoglobulin

G,IgG)含量检测:采用日立7600全自动生化分析仪,对IgM、IgA、IgG和C3、C4使用酶联免疫吸附法进行浓度测定;补体和免疫试剂盒的试验操作均根据试剂与仪器说明书严格进行。

1.4.2摇炎性应激反应介质摇可溶性细胞黏附分子1(solublecelladhesionmolecule1,sICAM1)、可溶性白重组人高迁移率族蛋白框1(highmobilitygroupproteinB1,HMGB1)、肾上腺皮质相关激素Cor、氧自由基产物MDA的含量测定:采用北京泰林东方商贸有限公司生产的日立7600全自动生化分析仪,采用酶联免疫吸附法对sICAM1、sCD40L、HMGB1,Cor、MDA进行浓度测定。试剂盒购自潍坊市康华生物技术有限公司。试验操作均根据试剂与仪器说明书严格进行。1.4.3摇炎性应激分子摇对Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)、白细胞表达补体受体11b(CD11b)、

细胞分化抗原40配体(solubleCD40ligand,sCD40L)、

2.1摇三组血清补体和免疫球蛋白含量比较摇C3、C4、IgM在对照组、轻症组和重症组的含量呈明显升高趋势,且差异具有显著性(P<0.01),而IgA含量却呈明显下降趋势(P<0.01),IgG含量在三组中比较,差异无显著性(P>0.05)(表1)。

表1摇三组血清补体和免疫球蛋白含量比较(g/L)

组别重症组轻症组对照组FP

例数78138102

C32.12依0.211.75依0.171.12依0.1326.3950.000

C40.63依0.080.41依0.090.31依0.0623.2960.000

IgM1.81依0.231.49依0.181.04依0.0924.8790.000

IgA0.43依0.040.75依0.081.48依0.1228.4820.000

IgG8.67依0.878.72依0.688.65依0.752.7920.315

2.2摇三组炎性应激反应介质含量比较摇对三组sI鄄重症组上述指标明显高于轻症组(t=16.287,P=0.000;t=12.436,P=0.000;t=16.736,P=0.000;t=15.536,P=0.000;t=15.847,P=0.000)和对照组(t=

CAM1,sCD40L,HMGB1,Cor,MDA的含量进行比较,

11.235,P=0.000;t=12.858,P=0.000;t=12.479,P=0.000;t=14.537,P=0.000;t=16.853,P=11.379,P=0.000;t=11.379,P=0.000;t=12.779,P=0.000;t=15.7,P=0.000;t=13.958,P=0.000)(表2)。0.000);同时上述指标轻症组含量明显高于对照组(t=

表2摇三组炎性应激反应介质含量比较

组别重症组轻症组对照组FP

例数78138102

sICAM1(ng/ml)683.56依79.47537.75依46.67223.56依35.95

26.9940.000

sCD40L(pg/ml)23.57依3.6716.74依5.538.76依2.2518.6970.000

Cor(ng/ml)268.75依32.85215.45依21.971.17依16.96

25.4880.000

HMGB1(ng/ml)186.24依22.57138.13依21.5669.36依15.1622.70.000

MDA(nmol/ml)15.86依1.2712.79依1.176.81依0.5719.0580.000

2.3摇三组炎性应激分子表达含量比较摇对三组TLR2,TLR4,CD11b,CD18,MPO,NOX2的表达含量进

1476摇誗论著誗

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行比较,其含量检测值为重症组>轻症组>对照组,差异有显著性(P<0.01)(表3)。

表3摇三组炎性应激分子表达含量比较

组别重症组轻症组对照组FP

例数78138102

TLR22.45依0.232.17依0.121.03依0.1125.5370.000

TLR42.12依0.151.依0.191.08依0.1222.80.000

CD11b2.86依0.272.17依0.210.83依0.1329.6570.000

CD183.45依0.222.76依0.251.18依0.2125.6380.000

MPO2.35依0.211.83依0.260.86依0.1926.7950.000

NOX22.85依0.152.21依0.271.77依0.2623.8790.001

2.4摇MPP患儿补体、免疫球蛋白的浓度与炎性应激反应介质的浓度相关性分析摇经分析,MPP患儿C3、C4、IgM与sICAM1、sCD40L、HMGB1、Cor、MDA均呈正相关(P<0.05),而IgA与sICAM1、sCD40L、HMGB1、

Cor、MDA均呈负相关(P<0.05或P<0.01),IgG与上4)。

述炎性应激反应介质的浓度无相关性(P>0.05)(表

表4摇MPP患儿补体、免疫球蛋白的浓度与炎性应激反应介质的浓度相关性分析(r/P)

指标C3IgMIgAIgGC4

sICAM10.238/0.0260.218/0.026-0.315/0.0170.205/0.0290.335/0.012

sCD40L0.323/0.0190.352/0.009-0.325/0.0150.1/0.0310.331/0.011

HMGB10.231/0.0270.318/0.018-0.407/0.0030.381/0.0060.455/0.008

Cor0.253/0.0210.221/0.028-0.533/0.0000.239/0.0260.371/0.007

MDA0.328/0.0290.344/0.010-0.436/0.0000.397/0.0210.386/0.004

2.5摇MPP患儿补体、免疫球蛋白的浓度与炎性应激分子表达量荧光强度相关性分析摇经分析,MPP患儿NOX2荧光强度均呈正相关(P<0.05),而IgA浓度与

指标C3IgMIgAIgGC4

TLR20.351/0.0090.228/0.027-0.315/0.0170.235/0.0260.381/0.003

TLR40.373/0.0070.282/0.021-0.325/0.0190.278/0.0230.228/0.032

TLR2、TLR4、CD11b、CD18、MPO、NOX2荧光强度均呈负相关(P<0.05),IgG与上述炎性应激分子表达量荧光强度无相关性(P>0.05)(表5)。

C3、C4、IgM浓度与TLR2、TLR4、CD11b、CD18、MPO、

表5摇MPP患儿补体、免疫球蛋白的浓度与炎性应激分子表达量荧光强度相关性分析(r/P)

CD11b0.221/0.0280.391/0.004-0.453/0.0000.391/0.0020.437/0.000

CD180.343/0.0110.369/0.006-0.513/0.0000.295/0.0220.371/0.007

MPO0.327/0.0190.393/0.003-0.4/0.0000.427/0.0010.375/0.004

3摇讨论

导致全身炎症反应和激活机体应激反应,目前该致病机制尚不明确。研究显示,MP感染与细胞体液免疫密切联系,机体发生MP感染后可刺激B细胞或T细胞活化进而产生免疫反应[4]。免疫球蛋白是参与体液免疫应答反应的主要活性物质,该物质主要经活化的B细胞分泌并释放入血产生IgM、IgA、IgG,发挥免疫效应进而导致系统和免疫组织损伤,因此临床上对MP感染者血清中不同免疫球蛋白含量进行检测便可对机体感染程度和病情进行评估[5]。IgM是病原菌感

MPP是儿童常见的呼吸系统疾病,MP感染后可

染机体后最早出现浓度增高的免疫球蛋白,对机体早期感染的诊断和感染程度评估具有一定临床意义。IgG则是机体感染病原菌后浓度逐渐升高的免疫球蛋白,且在恢复期浓度达到最高值,主要反应机体既往感染情况。IgA是常见的免疫球蛋白,主要在儿童的呼吸道上皮和其他黏膜组织上产生免疫屏障作用,IgA在合成不足时会导致病原菌在机体局部定植或感染的风险率增加[6]。C3、C4是补体激活途径中最常见的免疫活性物质,MP感染后能够使机体补体激活促使免疫细胞浸润、活化,最后导致机体发生自身免疫损伤[7]。本研究分析结果可知,在MPP患儿的血清检测

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中C3、C4、IgM含量明显高于对照组,且重症组含量明显高于轻症组,但IgA在对照组、轻症组和重症组血清检测中含量却明显呈下降趋势,而IgG含量无明显变化,表明患儿感染MP后会增加C3、C4、IgM的分泌含量,而MP感染会导致IgA分泌不足,在急性期与IgG无相关性。

和应激反应MP的持续感染能明显激活患儿体内的炎性反应

。炎性反应的最突出特征为炎性因子的级联释放过程。其中细胞因子sICAM1能够起到细胞间黏附作用,sCD40L具有细胞间趋化作用,可促使各种炎性细胞产生的感染灶发生局部黏附、趋化和浸润。细胞因子HMGB1具有使炎性反应保持连续激活状态的作用。同时,炎性反应在激活过程还会出现氧化应激反应产物生成明显增多和内分泌激素显著增加的现象[8]时调节能量和水钠代谢平衡。Cor是一种肾上腺皮质合成激素,同时对细胞膜结构具有,在应激反应稳定作用,避免机体组织发生过度损害。MDA是细胞脂质成分在氧自由基合成过程中的氧化产物,与应激过程中组织损伤的严重程度关系密切[9]果显示,三组血清sICAM1、sCD40L、HMGB1、Cor、MDA。本研究结浓度比较,重症组>轻症组>对照组(P<0.05),说明在MPP免疫球蛋白和补体与炎性反应的相关性进行分析显示病变中炎症和应激反应呈明显激活状态,同时对C3、C4、IgM呈正相关,而与IgAsICAM1、sCD40L、HMGB1、Cor、MDA与sICAM1、sCD40L、HMGB1、Cor、

均MDA介质的浓度无相关性均呈负相关(P<0.,表明在05),IgGMPP与上述炎性应激反应病变中免疫球蛋白和补体含量与炎症应激反应的激活具有显著相关性。种类MPP的信病变中炎症和应激介质的释放同上游中多

号分子的表达以及作用显著相关。TLR2识别和发生活化后经过细胞内信号通路的传导以启动和TLR4是常见的模式识别受体,在对MP进行多种炎症介质的表达[10]性粒细胞,属于一种活化分子。CD11b,CD11b、CD18与CD18存在于中受到病原菌传递炎症信号产生活化反应,进一步激活中性粒细胞,中性粒细胞在激活后能大量表达MPO,并通过对电子链的传递影响来促使活性氧生成和激活氧化应激反应

[11]

的代谢酶。,除了在肺内表达量高MPO,NOX2,也是一种催化活性氧生成

可使NADPH转化成超氧阴离子[12]CD11b,CD18,MPO,NOX2。本研究结果的表达含量比较显示,三组TLR2,,重症组TLR4,>

誗轻症组>对照组(P<0.05),表明MPP论著誗摇1477

病变中炎症应激分子处于过度活化并能增加炎症激活和应激反应,同时对免疫球蛋白和补体炎症应激反应的相关性分析,MPPCD18、MPO、NOX2患儿C3、C4、IgM浓度IgA荧光强度均呈正相关与TLR2、TLR4、(P<0.CD11b、05),而光强度均呈负相关浓度与TLR2、TLR4、CD11b、CD18、MPO、NOX2(P<0.05),IgG与上述炎性应激分荧子表达量荧光强度无相关性(P>0.05),表明在MPP病变中免疫球蛋白和补体含量与炎症应激分子的过度活化密切相关。

综上所述,MPP患儿血清中免疫球蛋白和补体含量具有明显变化,其变化程度与病情严重程度显著相关,免疫球蛋白和补体异常与MPP病程中炎症应激反应的过度激活密切相关。

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(本文编辑:习秋云)