腺病毒和慢病毒载体测序实验方案
一 实验目的: 搞清楚公司目前常用的几个腺病毒和慢病毒载体序列，进行空载体测序
二 实验方法；选取公司常用的腺病毒和慢病毒载体，比如慢病毒载体H201，Y201，H101，H104，Y007;腺病毒载体AOV001，AOV002和AOV003.
通过腺病毒和慢病毒转化感受态细胞stbl3，LB培养，LB平板挑选单克隆摇菌过夜，送菌液去测序。采用通用引物测序的方法，根据细胞平台主管黄老师提供的信息，腺病毒载体测序引物：pDC315F: acg tgg gta taa gag gcg；pDC315R: cga tgc tag acg atc cag；慢病毒载体测序引物CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG；先测序一部分，在此基础上继续设计引物，测通
三 实验步骤
1 配置好LB液体培养基和LB固体培养基。
2按SOP的要求转化，把空载体转化进感受态细胞stbl3中 3 超净台中操作，在离心管中加入0μL不含抗生素的LB培养基，置于37℃摇床上，200rpm震荡培养45min；
4 超净台中操作，取100μL转化液涂布于含抗生素(如氨卞)的LB平板培养基，置于37℃孵箱，过夜培养。
5 按SOP得要求涂平板，挑菌和摇菌。
6 送菌液测序
7 通过测序获得载体一部分序列，继续设计引物，测通质粒
四 实验的问题：因为不知道载体的序列，不方便设计引物，增大测序的困难；先使用别人推荐的引物
五 预知的实验结果
测通慢病毒H201，Y201，H101，H104，Y007; 测通腺病毒AOV001，AOV002和AOV003
