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高羊茅对土壤中菲、芘污染的修复机制研究

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第29卷第2期 2010年 6月 Journal of Chengdu University(Natural Science Edition) 成都大学学报(自然科学版) Vo1.29 NO.2 Jun.20lO 文章编号:1004—5422(2010)02—0107—05 高羊茅对土壤中菲、芘污染的修复机制研究 潘声旺 ,魏世强 (1.成都大学环境科学与工程研究所,四川成都摘610106;2.西南大学资源环境学院,重庆400715) 要:采用盆栽试验法,研究高羊茅对土壤中芘、菲的去除效果与修复机制.结果显示:试验浓度范围(O~ 322 rag・ I1)内,高羊茅能在芘、菲污染土壤中正常生长,且对污染物有较好的去除效果.种植高羊茅70 d后, 菲、芘去除率分别为52.82%一83.28%、47.27%~75.39%;平均去除率分别比对照1(加0.1%N )高63.04%、 57.48%,比对照2(无NaN3)高45.59%、41.8%.修复植物也具有一定的积累作用,根部、茎叶部积累量随土壤中 菲、芘含量增加而增大;生物浓缩系数则随菲、芘含量增加而减小,且根部大于茎叶部、芘大于菲.修复过程中, 非生物因子、植物积累、植物代谢、微生物降解对菲去除的贡献率分别为5.1%、0.29%、3.42%、l7.47%,对芘 去除的贡献率分另q为2.56%、1.87%、3,4%、15.68%;植物一微生物问的交互作用对菲、芘去除的贡献率则高 迭41.88%和36.54%.说明植物一微生物交互作用是土壤中菲、芘去除的主要原因. 关键词:植物修复;多环芳烃;高羊茅;土壤 中图分类号:X53 文献标识码:A 0 引 言 多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons,PA|{s) 的幼苗,经蒸馏水洗净后备用.供试土壤为紫色土, 其理化性质如下:有机质22.3 g.kg~,CMC为27.43 cmol・kg~,pH值为7.19,速效N、P、K分别为114.6、 24.7、94.8 mg.kg~. 是环境中普遍存在的一类持久性有机污染物,其性 质稳定、水溶性差,在环境中的含量逐年上升.在我 国,局部土壤PAHs含量高达l02 ・kg。。~104 /.tg・kg‘。,部分交通干线、厂矿和城郊附近已达到1()s ttg・kg 数量级l1】,严重威胁着土壤的生态安全和人 类健康.目前,有效修复土壤PAHs污染已成为环境 保护领域的焦点问题. 与传统修复方法相比,植物修复投资少、效益 高、环境友好,其发展潜力巨大.但植物修复技术起 步较晚,其修复机制还不甚明确 】.本研究选择菲、 芘为PAHs代表物,以分布广、适应性强的地被植物 高羊茅(Festuca anmdinacea)作为修复材料,探讨其 对菲、芘污染的修复作用及机制,以期为PAHs污染 1.2试验方法 盆栽试验于温室内进行,试验周期70 d.土样采 集后,风干,过3 mill筛.将一定量的菲、芘经丙酮溶 解后,均匀洒在土样表层,待丙酮挥发后,多次搅拌、 混匀,各制备6个污染水平,初始浓度如表1所示. 表1土壤中菲、芘初始浓度 注:T0代表对照土样、未加NaN3;ND代表没有检测出E ̄4s(n=3). 土壤的生态修复提供依据. 不同污染水平的土壤上,分别设置4种处理:① 处理1(CK,).无植物,加0.1%NaN3(抑制微生物活 动)D ;②处理2(CK2).无植物,不加№N3;③处理3 1材料与方法 l。1试验材料 ( ).种植物,加0.1%NaNs;④处理4(,IR4).种植 物,不加NaN1.取各土样2 kg装盆,50%田问持水量 下室内平衡7 d.除CK 、CK2外,每盆栽幼苗lO株. 以7 d龄高羊茅幼苗为试验材料.种子经双氧 水处理后,无菌条件下催芽、培养7 d.选择大小相近 收稿日期:2010—03—15. 基金项目:国家科技支撑计划基金资助项目(2007BAD87B10—05);国家“863计划”基金资助项目(2006AA107_A27). 作者简介:潘声旺(1973一),男,博士,从事污染生态学研究. ・ l08・ 成都大学学报(自然科学版) 算式为, R=(C0一c1)X 100/C0 第29卷 试验期间,田问持水量维持在50%(称重补水).各 处理重复5次.种植70 d后整株采样,根、茎叶分 离,冲洗干净后,冷冻干燥,研磨过1.0 rnln筛, 一其中,c。为土壤中PAHs初始浓度,c|为取样时残 留浓度. 20℃下低温保存,钵中土样混匀后,四分法采集, 风干,过20目筛,低温保存,待分析. 1.3样品测定 2结果与分析 2.1高羊茅的修复作用 PAHs的提取、净化方法参照文献[4]中相关方 法,HPLC测定,DAD检测器,甲醇加水(83:17)为流 动相,菲、芘检测波长分别为246、235 nn1.依照此条 件,菲、芘检测限分别为42.6、54.2 Pg・L一,土样中 菲、芘回收率(外标法,下同)分别为96.78%(n=7, RSD<5.52%)、94.93%(n=7,RSD<5.82%),植物 样为95.36%(n=7,RSD<4.28%)、94.11%(n=7, RSD<5.06%). 2.1.1菲、芘污染对高羊茅生长的影响. 生长70 d后,不同污染水平下高羊茅的生长状 况如表2所示.表2数据显示:菲污染土壤中,单株 生物量、株高、根冠比、根面积(亚甲基兰吸附法测 定)与对照组(T0组)问差异不显著(n=25,P> O.05),但根冠比、根面积均大于T0组,高污染(T5) 环境中,株高、生物量表现出受抑制趋势,但差异不 1.4数据处理 显著(n=25,P>0.05);芘污染土壤中,高羊茅的生 长状况与菲污染时相似.实验数据说明,在试验浓度 范围内,菲、芘污染对高羊茅生长影响较小. 数据处理采用SPSS13.0进行Duncan’s多重比较 (Duncan’s Multiple Range Test).PAHs去除率(R)计 表2不同污染水平下高羊茅的生长状况 2.1.2高羊茅对土壤中菲、芘的去除作用. 试验末期,不同处理土壤中PAHs残留量如表3 所示.表3数据显示:随着添加浓度的增加,土壤中 菲、芘浓度也逐渐增大;相同添加浓度下,残留浓度 的高低顺序为,CKI>'1"It3>CK2>TR.,除CK1、TR3 外,不同处理间差异显著(n=5,P<O.05);4个处理 中,TR4所在土壤的PAHs残留量最低,与其他处理 问差异极显著(n=5,P<O.01). 表3不同处理条件下土壤中PAils的残留量差异 注:*为同列数据后不同大、小写字母标记表明Duncan’s多重比较差异极显著(p<O.O1)或显著(p<0.o5). 在去除效果上,植物一微生物处理系统(TR.) 中,菲的去除率为52.82% 83.28%,平均为 13.3%,平均去除率分别比,IR4处理土壤低 63.o6%、45.59%、59.35%.芘的情况与菲类似,TR4 68.16%;CK,、CK2、 处理菲的去除率分别为 一30.08%、4.43%一 中芘的去除率为47.27%~75.39%,平均为 3.32%~6.65%、14.73%60.04%;CK1、CK:、TR3中芘的去除率分别为1.82% ^ 、 长蜂 第2期 ∞ jIi ∞ 笱 ∞ 俘 竹 5 潘声旺,等:高羊茅对土壤中菲、芘污染的修复机制研究 O ・109・ 一3.21%、12.28%~24.23%、3.96%一l3.44%,平 均去除率分别比rI1R4处理低57.48%、41.8%、 52.22%.相同条件下,芘的残留浓度高于菲,可能与 芘的分子量大、难降解,在土壤中滞留性更强有 关[5】.4种处理中,IR4的菲、芘的去除率最高,说明 利用高羊茅修复菲、芘污染土壤在理论上是可行的. 2.1.3高羊茅对菲、芘的富积作用. 添加在土壤中的PAHs除部分残留在土壤中 外,也有相当一部分被植物体吸收、积累,积累量的 多少与污染物的性质、浓度以及植物自身的生理特 征等因素密切相关.70 d后,不同污染水平下土壤中 PAHs残留浓度、植物体内累积浓度问的对应关系如 图1所示. Tl(3.56) 72(9.88)T3(25.22)T4(64.56)i5(151.95) 初始(残留)浓度/(mg k ) 1o0 5o O T1({.98)T2(13.52)1"3(33.O1)T4(75.44)T5(169.48) 初始(残留)浓度/(mg.k ) 注:CR、岱为PAHs在根系、茎叶内积累浓度;R-BCFs、S-BCFs为 根系、茎叶内生物浓缩系数;括号内数值为PAHs残留浓度. 图1高羊茅对菲、芘的积累作用 从图1中可以看出:随着PAHs添加浓度的增 加,土壤残留浓度逐渐增大,植物体内积累浓度也明 显升高,且积累浓度与添加浓度成正相关.植物不同 部位的菲、芘积累浓度也不一样,相同处理条件下茎 叶中菲、芘含量远小于根.在供试浓度范围内,土壤 中菲的残留浓度为3.55~151.95 mg・kg~,高羊茅 根部、茎叶中菲的积累浓度分别为9.86—36.84、 3.14~12.9 mg・kg一;芘的残留浓度为4.98~169.48 mg・kg~,根、茎叶中芘的积累浓度分别为57.72~ 237.8、l8.57 112.35 mg・kg~.有学者研究认为: PAHs在植物体内不同部位积累差异可能与自身脂 肪含量的不均匀性有关(高羊茅根部、茎叶部脂肪含 量分别为0.77%、0.16%).在相似添加浓度下,高羊 茅根、茎叶中芘含量大于菲,根对土壤芘的吸收量也 明显大于菲,这可能与芘的logKow较大有关(菲、芘 的l3 ogKow分别为4.2 46、4., 88) J.0  分析高羊茅对土壤中菲、芘的生物浓缩系数 ∞ 彗 幡婚鬏霉 (bioconcentration factors,BCF ̄)结果表明,BCFs随土 壤中PAHs残留浓度的增大而减小,且芘大于菲.图 1还显示:植物不同部位对PAHs的BCFs也不一样, 如高羊茅根部菲、芘的BCFs分别为0.24~2.78、1.4 ~11.59,茎叶部菲、芘的BCFs分别为0.08—0.89、 0.66~3.73,相同环境浓度下,根部的BCFs大于茎 叶部.因其根冠比较小(见表2),茎叶仍然是高羊茅 富集菲、芘的主要部位. 2.2植物修复机制分析 土样中PAHs的去除主要源于各种非生物因子 (如渗滤、吸附、光解、挥发等)和生物因子(如植物代 谢、积累、微生物降解、植物一微生物交互作用等)的 共同作用.本试验中,CK 中PAHs的去除主要源于 各种非生物损失;CK2中PAHs的去除源于非生物 降解、微生物降解; 中PAHs的去除则是非生物 损失、植物代谢及植物积累;侃中PAHs的去除主 要是非生物降解、植物、微生物的共同作用.在不考 虑因子间交互作用的情况下,各处理土壤中PAHs 的表观去除率可用以下公式表述: R1=Ta (1) R2=Ta+Tm (2) R3=Ta+砸+ (3) R4=Ta+乃 +乃 +Z +Tdm (4) 式中,尺1、 2、R3、尺 分另0为CK1、CK2、TR3、TR 中 菲、芘的去除率;Ta、 、 、Tm、Tdm分别代表非 生物性损失、植物积累、植物代谢、微生物降解、植物 一微生物交互作用在PAHs去除过程中的贡献率. 分析各处理渗滤液、土样、植物样中菲、芘含量,得到 各因子在PAHs修复过程中的表观贡献率如表4所 示. ・ llO・ 成都大学学报(自然科学版) 表4生物、非生物因子在修复PAHs污染土壤过程中的贡献率 第29卷 本试验中,CK.中菲、芘降解率分别为3.32%一 6.65%(平均值m=5.1%)、1.82%~3.2l%(m= 2.56%),说明非生物性损失不是PAHs去除的主要 途径.植物积累部分占菲、芘总量的0.12%~0.54% (m=0.29%)、1.o2%一3.12%(m=1.87%);代谢部 分占菲、芘总量的0.99%一6.11%(m=3.42%)、 1.12%~7.11%(m=3.4%),说明植物吸收(包括植 物代谢、积累)也不是PAHs去除的主要途径.相比 之下,微生物降解、植物一微生物交互作用对PAHs 去除的贡献较大.具体而言,微生物降解去除 l1.4l%一23.43%(m=17.53%)的菲,10.46%~ 21.02%(m=15.68%)的芘,植物一微生物交互作用 去除36.98% 46.55%(m=41.88%)的菲,36.54% 一40.93%(m=36.54%)的芘. 3讨论 植物的吸收、积累或根际矿化作用是植物一微 生物系统中PAHs的去除途径之一.植物可以吸收、 积累部分PAHs,吸收速率与植物自身的生理适应 性、PAHs的生物有效性呈正相关-7】.同时,在氧化还 原酶、水解酶等胞外酶的作用下,部分PAHs转化为 能被植物细胞直接吸收的小分子物质【8】,部分以原 始状态积聚在植物体内.本研究表明:在PAHs去除 过程中,仅3.7l%的菲、5.27%的芘被植物直接积累 或代谢.由此可见,植物的积累或代谢作用并不是土 壤中PAHs去除的主要原因. 微生物降解是PAHs去除的另一途径,其降解 能力与微生物种类、数量及其生理活性密切相 关-9J引.本研究中,当CK,微生物活性被抑制后,两 对照组(CK2、CK )中菲、芘残留量差异(即微生物降 解部分)分别占其添加总量的17.53%、15.68%,说 明土壤(土著微生物)对PAHs污染具有一定的自净 能力,但与菲、芘的总去除率(68.16%、60.o4%)相 比,微生物降解也不是PAHs去除的主要原因. 在根际环境中,根系分泌物、胞外酶有时能提高 根际微生物活性,促进生物转化【1 .植物的存在不 仅能增强微生物活性,扩大根际微生物区系的活动 范围,也能改善根际土壤的理化性质,提高土壤酶活 性,促进PAHs去除[】引.植物一微生物间的交相互作 用有时还能降解植物或根际微生物单独作用所不能 去除的污染物_1引.本研究中,植物一微生物交互作 用去除的菲、芘量分别占其总添加量的41.88%、 36.54%,占被去除菲、芘总量的61.44%、60.86%, 其作用超过非生物降解、微生物降解、植物直接作用 等因子的去除作用之和.可见,植物的存在明显促进 了土壤中菲、芘的降解.此外,土壤酶活性的监测结 果也显示:植物一微生物系统中多酚氧化酶、脲酶、 脱氢酶活性明显高于同污染水平的其他处理,呈现 T1%>CK2>TR3>CK】的变化趋势,例如T3污染水 平下,70 d后,脱氢酶在 IR、CK2、TR3、CKt菲污染 土壤中酶活性依次为0.185、0.124、0.087、0.075 ttL・p-g~,在芘污染土样中的酶活性依次为0.175、 0.116、0.079、0.067 ttL・vg~.此说明植物的存在强 化了根际微生物的活性,植物一微生物交互作用是 提高PAils去除的根本原因. PAHs在土壤与植物间分配富集关系可用生物 浓缩系数进行评估,BCFs越大表明植物对污染物的 富集能力越强n引.本研究中,植物体内PAHs的积累 量随土壤中初始添加量的增加而增大,而根系、茎叶 内BCFs随PAHs添加量增大而减小.不同组织内 PAHs积累量差异较大,根部大于茎叶部,芘的要大 于菲.这可能与生物浓缩系数和PAHs溶解度、Kow 间存在一定相关性有关,即随PAHs溶解度的增加 而增大,随Kow值的增大而减小[1 .植物组织中高 浓度脂溶性物质的存在能提高PAHs的溶解度,进 而加剧PAHs的积累. 4结 论 (1)在试验浓度(0—322mg・kg )范围内,高羊 茅能够在菲、芘污染土壤中正常生长,表现出较好的 第2期 潘声旺,等:高羊茅对土壤中菲、芘污染的修复机制研究 Chemical Engineering Progress,2000,96(7):61—69. 生长适应性,植物根面积、根冠比均大于对照组. (2)高羊茅对菲、芘具有较强的修复作用.种植 70 d后,植物一微生物系统所在土壤中菲的去除率为 52.82%一83.28%,平均为68.16%;芘的去除率为 [7]xu s Y,Chen Y X,wu w X,et a1.Enhanced dissipatoin of phenanthrene andpyrene in spiked soils combinedplants cuhi— vat/on[J].Science ofthe Total Environment,2006,363(1):206 —47.27% 75.39%,平均为6o.o4%,修复效果明显. (3)高羊茅对菲、芘的积累量与土壤中PAHs添 215. [8]Liifana G,Maria A R.Potential ofextra cellular enzyraes in re— mediation fpololuted soils:a reu/ew[J].EnzylBe and Microbila 加浓度正相关,BCFs则与添加浓度负相关. Technology,2004,35(4):339—354. (4)试验期间,植物一微生物交互作用去除了 [9]Toner E J,【ce)Wal C.Rhizosphere gradients of Polycyclic Aro— 41.88%的菲、36.54%的芘,占被去除菲、芘总量的 matic Hydrocarbons dissipation in two i ̄dustrid soil and the im— 61.44%、60.86%,这是高羊茅修复菲、芘污染的最 pact of rahnscular mycorrhiza[J].Enviornmentla Science and 根本原因. Technology,2003,37(1):2371—2375. [10]Chen Y C,Katherinebanks M,Paulschwab A.Pyreen degrada— 参考文献: tion in teh rhizosphere fotall Fescue(Festuca arldlldillacea)and switchgrass(panicumvirgatum)[J].EnviormnentalScienceand [1]Li X H,Ma L L,Hu S F,et a1.Poly ̄dic aromatic hydrocrabon Technology,2003,37(1):5778—5782. in urban soilfrom Being,Ch/na[J].Journal of Enviormnental [11]Yi H,Crowley D E.Biostimulatoin of PAH dergtatag,on Sciences,2006,18(5):944—950. plants containing high concentratoisn oflinoleic ac/d[Jj.Envir— [2]GaoYZ,Zhu LZ.Plant uptake,acctanulatoin andtranslocation onmentalScienceandTechnology,2007,41(12):4382—4388. 研 andpyrene in soisl[J].Chemosphere,2OO4,55 [12]Wang J, Z Z,Su Y M,et a1.Phytoremediatoin oftu ̄ro— (1):1169一l178. lewnpolluted soil[J].Petroleum Science,2008,5(2):167— [3]KarI A T,Fu G M,Htmter M A.Irreversible adsorption ofnaph— 171. thalenc and tetrachorobiphertyl to lulu and surrogate sediment[J]. [13]Maila M P,Randima P,Cloete T E.Multispecies and monad. Environmental Science and Technology,1997,31(8):2176— ttwe rhizoremediaKon of poly ̄dic aromatic hydrocarbons 2185. (PAHs)pomteh soil[J].International JournalofPhytoremedi- [4]Pan SW,Wei SQ,Yuanx,eta1.TheRemoval andRemediatoin tion,2005,7(2):87—98. foPhenanthrene and Pyrene Soil byMixed Cropping foAlfalfa [14]Jon A,Amot,Frank A P C.A review ofbioconcentrtaionfactor and [J].Agricultural Sciences in China,2008,7(11): (BCF)and bioacaunala ̄nfactor(BAF)assentsfor 0r. 1355—1364. ganic chemicals in aquatic organisms[J].Environmentla Re- [5]Zhu L Z,Cao Y Z.Prediaion ofphenanthrecn uptake by pf views,2006,14(4):257—297. with a partition-limited model[J].Enviornn ̄ntla Polufion, [15]Tao S,Jiao X C,Chen S H.Accumu ̄ion and distributoin of 2004,131(1):505—508. polycyclic raomatic hydrocrabons in rice(0,)能staiva)[J].En- [6]Beath J M.Considerphytoremediationfor waste s c/eanup[J]. vironmentla Pollution,2006,140(3):406—415. Repair Mechanism Research on Pollution of Phenanthrene and Pvrene by Tall Fescue in Soil Shengwang .WEI Shying (1.Institute of Envimnnmnt Science and Engineering,Chengdu University,Chengclu,610106,China; 2.School of Resources and Environment,Southwest University,Cho ̄gqlng 400716,China) Abstract:Mieropot experiments were carried out to investigate the mechanisms of hte removal and accumu— lation of phenanthrene(Phe)and pyrene(err)by tall feseue(Festuca arundinacea).The results show that the growth of tall rescue is not affected by Phe or P)1r at their initial concentrations of0 to 322 mg・kg in soils and it can signiifcantly remove polyeyelie aromatic hydrocarbons(PAHs)from soils.After 10 weeks (下转第117页) 第2期 李 涛,等:一类四阶非线性系统的全局稳定性 Global Stability of 4一Order Nonlinear System L/Tao ,XIE Jingli ,SUN Char ̄un (1.Huaihua Vocational and Technical College,Huaihua 418000,China; 2.School of Mathematics and Computer Science,Jishon University,Jishou 4160(30,China; 3.Section 0f Mathematics Teaching and Research,Linayungang Technical Collgee,Linyungang 222006,China) Abstract:Analogism is a normal method of studying the global stability of nonlinear systems.Using this method,Liapunov’S function of a nonlinear system is formulated to derive sufficient conditions for its global stabiliyt when it has null solution. Key words:nonlinear system;Liapunov’S function;global stability (上接第111页) plantation.the extractable PAHs are lower in planted soils than those in unplanted soils.52.82%~83.28%of Phe or 47.27%一75.39%of P、rr are l ̄n'loved from the soils,respectively.附l fescue removes averagely 63.o4%of Phe or 57. 48%of from the soils as compared to CK1(wiht addiiton of 0。1%N ),and 45.59%of Phe or 41.8%of Pyr sa compared to CK2(without NaN3).伽fescue shows some abiliyt to accumulate PAHs from hte soils,the contents foPAHs irI its root and shoot inereflse wiht the increase of PAHs concentartions in the soils.The bioconcentration factors(BCFs) for PAHs tend to decrease with increasing concentrations of these contaminants in soil。the BCFs for P、rr are higher than htose for Phe,and the BCFs for Phe(0.08~O.89)6r Py]r(0.66~3.73)in shoots are much lower thna those in roots (0.24~2.78 and 1.4~11.59)at sanle treatment.Despite the plnatation oftall rescue evidently enhanced£he remedi— ation of PAHs in soils,contributions of biotic and abiotic factors to phytommediation process display distinct diversiyt. Abiotic lsos,plant accumulation,phytodegredation nad microbial degradation account for5.1%,O.29%,3.42%and 17. 47%of hte total removal of Phe,and 2.56%,1.87%,3.4%and 15.68%of P)rr from soils,respectively.In contrast, 41.88%of hte total removal of Phe or 36.54%of Pvr iS attributed to the contributions of plnat.microbial interactions. hTus plant—microbial interactions ale the main mechanisms for£he remediation of soil PAHs pollution. Key words:phytoremediation;polycyelic aromatic hydrocarbons;Festuca arundinacea;soil 

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