培养液中酵母菌种群数量的变化
一、血球板计数法 1、基本构造
A、盖玻片 B、载玻片
玻片中有四条下凹的槽
三个平台，中间的平台较宽， 中间又被一短横槽隔为两半，
每半边上面,刻有一个方格网（共两个）。
2、方格网形态
9个大格，中间大格用来计算
即E格用来计算，E格（放大后两种形态计）
一种是25X16形式：25中格，每一个中格又可以放大，由16个小格组成 一种是16X25形成：16中格，每一个中格又可以放大，由25个小格组成
总结：
1、即9大格拿一大格计数
2、这一大格有25中格（每个中格有16小格）或者16中格 （每个中格有25小格） 3、所以一大格有400小格
3、取样方法
两种取样方法
第一种：有80小格 第二种：有100小格
4、计算方法
以第一种的为计算方法： 25X16
1）、五点取样，即五个中格，每个中格16个小格（共80小格） 2）、如果算出80格共有总数A个，则每一个小格有酵母菌数为：G1=A/80 3）、则一个大格有400小格，所以一个大格有酵母菌数为：400G 4)、而每一个大格的体积为：
所以如果计算1ml培养液有多少酵母菌数公式为： 如果是25X16
400GX104=400X（A/80）X104
如果是16X25
400X（A/100）X104
思考：书本中是2mmX2mm，深度是0.1mm，如果用25X16的进行计数，80格总数为A个，则10ml的培养液中有多少个酵母菌？
大方格的长和宽各为2mm，深度为0.1mm，其体积为0.4mm3。 换算为1mL：1000/0.4 = 2.5×103 ，即1mL是 2.5×103个 0.4mm3。
则总数=（A/80）×400 X 2.5X103 X10
注意：如果小方格中的酵母菌太多（培养液中酵母菌太浓）则要进行稀释。则上面的计算就要再X稀释倍数 即如果是25X16
400GX104 X稀释倍数= 400X（A/80）X104 X稀释倍数
三、本实验问题及注意点
1、如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎样的措施？ 稀释
2、对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？
只计数相邻两边及其顶角的酵母细胞数（下图中红点都要计算）
3、血球计数板的清洁
血球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物，若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。
4、影响酵母菌的种群数量增长的因素可能是什么？
除了本实验中温度、营养以外还包括酵母菌菌种本身性质、接种时间、pＨ值、接种量、溶氧量等影响因素。 5、从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么？ 使酵母菌混合均匀。
6、本探究需要设置对照吗？如果需要,请讨论对照组应怎样设计和操作，如果不需要，请说明理由。 不需要，因不同时间取样已形成对照。 7、需要做重复实验吗？
需要。尽量减少误差。对每个样品计数三次,取其平均值。
二、探究：培养液中酵母菌种群数量的变化 1、问题：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？温度会影响酵母菌的生长吗？营养成分会影响酵母菌的生长吗？
2、作出假设：培养液中酵母菌种群数量开始一段时间是“J”型增长，由于营养物质的消耗，有害代谢产物的积累，PH值的改变，种群数量呈“S”型增长。 3、讨论探究思路
探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球计数板（2mm×2mm方格）、滴管、显微镜等 4、实验设计
将9支试管分成ABC三组，每组3支。A组为实验组，装培养液10 mL，酵母菌母液0.1mL,环境温度28℃。B组装培养液10 mL，酵母菌母液0.1mL,环境温度5℃，与A组形成温度条件对照。C组不装培养液，只装无菌水10mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度28℃，与A组形成营养条件对照。
5、实验操作：
(1)、配制无菌马铃薯培养液和酵母菌母液； (2)、预先设计分装。先每次用10mL刻度吸管吸取10mL培养液到A组和B组试管，用另一支10mL刻度吸管吸取10mL无菌水到C组试管。待分装完毕，每支试管加塞后把试管扎成捆后，然后用记号笔注明培养基的名称、组别、日期。 (3)、用高压蒸汽灭菌锅灭菌；
(4)、接种菌种：用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液，往每支试管中加入。（注意滴加量不要太多，避免初始菌数过多。）
(5)、培养：将 A、C试管置于 28℃的恒温箱中培养。将 B试管置于5℃的恒温箱中培养。（5℃的恒温箱可由某些型号冰箱保温室设定5℃时代替。）
(6)、计数和记录：每天取样时间大体一致，每次每组按序号取一支试管。计数过程中一定要遵守无菌操作规范，取样的吸管要干净且分开使用，每次取样前要试管振荡摇匀。显微镜下进行细胞计数后，立即将数据填到记录表格中。
6、分析结果，得出结论
将所得数值用曲线图表示出来，分析实验结果是否支持你所做的假设。
探究的结论：
酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下是呈 “S”型增长，但之后会下降。温度、营养成分会影响酵母菌种群数量的变化。
