麸炒白术“减酮减燥,增酯增效”炮制理论的再印证

麸炒白术“减酮减燥，增酯增效”炮制理论的再印证

课题组在前期研究中提出麸炒白术“减酮减燥，增酯增效”的炮制理论，并进行了初步探索，为进一步证明该理论的科学合理性，该研究通过测定白术麸炒前后白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ及苍术酮含量变化；比较测定白术生品、麸炒品对大鼠饮水量及尿量的影响；同时考察了白术生品、麸炒品影响脾虚大鼠4种胃肠激素、2种神经递质在血清中含量，试图印证麸炒白术“减酮减燥，增酯增效”炮制理论的科学合理性。

标签： 白术；炮制理论；减酮减燥；增酯增效

白术为菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根茎，始载于《神农本草经》，列为上品，性味甘、苦、温，归脾、胃经，具有益气健脾、燥湿利水、止汗安胎的功效。

白术在临床上常麸炒后入药，其生制品功用不同，属生熟异治之品。中医传统上认为生白术以燥湿健脾、利水消肿为主，麸炒后燥性缓和，借麸入中，增强健脾消食、和胃的作用。张仲岩在《修事指南》中提出“麸皮制去燥烈而和胃”，麸炒白术正是体现了“去燥烈而和胃”的作用。根据其炮制后既去燥性又健脾和胃的作用以及化学成分和药理作用的变化[1]，本课题组在前期研究中提出了麸炒白术“减酮减燥，增酯增效”的炮制理论[2]，并进行了初步探索。为了进一步证明该理论的科学性，本文在原来研究的基础上又增加了新的指标，进行深入研究。除研究白术麸炒前后活性成分白术内酯类、苍术酮含量变化外，同时还考察了白术生制品对大鼠饮水量和排尿量的影响，测定了大黄所致的脾虚模型大鼠血清中4种胃肠激素[生长抑素（SS）、胃泌素（GAS）、血管活性肠肽（VIP）、P物质（SP）]，2种神经递质[胆碱酯酶（CHE）、一氧化氮（NO）]的含量变化，比较白术麸炒前后化学成分及药理作用的深层次变化，力求进一步说明白术“减酮减燥，增酯增效”炮制理论的合理性。

1 材料

FA1004B电子天平（上海精密科学仪器有限公司）；KQ-250DB型数控超声波清洗器（昆山是超声仪器有限公司）；日本岛津LC-10ATVP液相色谱仪（SPD-10AVP检测器，LC-10atvp泵，AT-330柱温箱）；N2000色谱数据工作站；METTLER AE240型1/10万分析天平（瑞士METTLER）；Multiskan-MK3型酶标仪[赛默飞世尔（上海）仪器有限公司]；SHA-C（7084）型恒温振荡器（常州国华电器有限公司）；TGL-16C型离心机（上海安亭科学仪器厂）；BS600电子天平（上海有声衡器有限公司）；代谢笼。

白术内酯Ⅰ（批号111127）、白术内酯Ⅱ（批号111127）、白术内酯Ⅲ（批号111127）均购自四川省维克奇生物科技有限公司，苍术酮对照品为自制对照品，以上4种对照品经高效液相归一化法测定纯度均大于98%。甲醇为色谱纯，水为纯净水，其他试剂均为分析纯。

枸橼酸莫沙必利分散片，成都康弘药业集团股份有限公司，批号111002；氢氯噻嗪，江苏鹏鹞药业有限公司，批号120920。

酶联免疫试剂测试试剂盒大鼠SS，GAS，VIP，SP，CHE，NO均购自美国RD公司。

试验所用药材均购自安徽济人药业有限公司，经辽宁中医药大学王冰教授鉴定为菊科植物白术A. macrocephala的根茎，批号120326；蓼科植物掌叶大黄Bheum palmatum的根茎，批号120326。麦麸为市售品。

雄性SD大鼠，体重180～220 g，由辽宁长生生物技术有限公司提供，许可证号SCXK（辽）2010-0001。

2 方法

2.1 白术生品、麸炒品活性成分含量测定

2.1.1 白术麸炒品的制备 按照前期工作中考察的白术最佳麸炒工艺制备白术麸炒品，即投麸量10%，170 ℃，炒制2 min。

2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮对照品适量，加甲醇分别制成每1 mL含白术内酯Ⅰ0.256 mg、白术内酯Ⅱ 0.102 mg、白术内酯Ⅲ 0.216 mg、苍术酮1.951 mg的对照品溶液。

2.1.3 供试品溶液的制备 取白术样品适量，粉碎，过60目筛，精密称定2.00 g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20 mL，称定质量，超声30 min，放凉，称重，用甲醇补足减失质量，摇匀，静置，取上清液过0.45 μm滤膜，供测定。同法制备麸炒白术供试品并测定。

2.1.4 测定条件 Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ的流动相为甲醇-水（60∶40），柱温30 ℃，流速0.8 mL·min1，检测波长0～35 min，220 nm，35 min后，276 nm，进样量20 μL；苍术酮的流动相为甲醇-水（95∶5），检测波长220 nm，其他条件相同。

2.2 白术生品、麸炒品利尿实验

2.2.1 白术混悬液的制备 将白术生品、麸炒品饮片粉碎，过120目筛，加入3倍体积纯净水制成含生药0.3 g·mL-1的白术混悬液。

2.2.2 氢氯噻嗪溶液的制备 将药片粉碎用纯净水溶解，制成质量浓度12.5 g·L-1的氢氯噻嗪溶液。

2.2.3 实验动物的处理 取SD大鼠40只，随机平均分成4组，空白对照组

（a）、生品利尿组（b）、麸炒品利尿组（c）、氢氯噻嗪阳性药组（d）。实验前12 h禁食不禁水，将各组大鼠放入代谢笼中，记录3 h的累积尿量，而后白术生、麸炒品组按0.02 mL·g1给予白术生、麸炒品混悬液，阳性药组按0.02 mL·g1给予氢氯噻嗪溶液，空白组给予等体积的生理盐水，给药后立即将大鼠放回代谢笼，记录3 h的累积尿量，以给药后尿量减给药前尿量，记录为总尿量，重复3 d。2.3 白术生品、麸炒品对脾虚大鼠血清中SS，GAS，VIP，SP，CHE，NO含量的影响

2.3.1 大黄水煎液的制备 取大黄生品饮片适量，加入10倍纯净水浸泡，文火煎煮2次，每次15 min，提取液合并过滤，浓缩成含生药2 g·mL-1的大黄提取液。

2.3.2 白术混悬液的制备 同2.2.1项下方法。

2.3.3 炒麦麸水煎液的制备 取麦麸适量，按照前期工作中考察的白术最佳麸炒工艺制备炒麦麸，放冷后加入适当纯净水，煎煮1 h，浓缩制成质量分数为1 g·mL-1的炒麦麸水煎液。

2.3.4 莫沙必利溶液的制备 将药片粉碎用纯净水溶解，制成质量分数0.1 g·L-1的莫沙必利溶液。

2.3.5 动物处理 取SD大鼠50只，随机平均分成5组，空白对照组（A）、大黄模型组（B）、白术生品脾虚治疗组（C）、麸炒白术脾虚治疗组（D）、莫沙必利阳性药组（E）。

2.3.6 脾虚模型的建立 模型组、治疗组按0.02 mL·g1每日灌服大黄水煎液，空白组给予同体积生理盐水，各组隔天给食。14 d后给药各组动物均出现便溏、纳呆、少动、毛发枯涩、消瘦为主的“脾虚”症状[3-4]。

2.3.7 模型动物的治疗 脾虚模型复制成功后，各组处理如下：白术治疗组用白术混悬液按0.02 mL·g1（约4 mL），治疗时间为1周；空白对照组灌服同体积生理盐水，脾虚模型组灌服同体积生理盐水；阳性对照组用莫沙必利溶液按0.07 mL·g1（约1.4 mL）灌服。白术生品、麸炒治疗组每天给药2次，其余治疗组每天给药1次，连续给药7 d，末次给药前禁水24 h，用眼眶取血法取血2 mL，1万r·min1离心10 min，取上清液即为血清样品，转移至新EP管中，-20 ℃保存至测定。用ELISA试剂盒测定血清中SS，GAS，VIP，SP，CHE，NO的含量。实验过程中记录各组体重及进食量情况。

2.4 统计处理

所有数据经SPSS 19.0统计处理软件处理，并以±s表示，采用单因素方差分析。P＜0.05有显著性差异，显示具有统计学意义。

3 结果

3.1 白术炮制前后白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，苍术酮含量变化

白术经麸炒后，白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ含量均显著升高，白术内酯Ⅰ含量升高极为显著，而苍术酮含量显著降低，见表1。

3.2 白术生品、麸炒品对大鼠饮水量及尿量的影响

与空白组相比，麸炒品组大鼠在饮水量方面表现出显著性差异，白术生品组表现出极显著差异；与阳性药组相比，麸炒品组大鼠在排尿量方面表现出显著性差异，而与白术生品组无差异，见表2。

3.3 白术生品、麸炒品对脾虚大鼠体重及进食量的影响

分析造模第14天的体重和造模第10～14天的进食情况可知，在脾虚模型建立后，各组与空白组在体重和进食量方面均表现出显著性差异，除空白组外各组均表现出便溏，少动，毛发枯涩，脱肛等脾虚症状。比较治疗第5～7天的进食情况和治疗第7天的体重情况可知，除模型组与空白组在体重与进食量方面有显著性差异外，其他各组与空白组并未表现出显著性差异，见表3。

3.4 白术生品、麸炒品对脾虚大鼠血清中SS，GAS，VIP，SP，CHE，NO含量的影响

ELISA法检测各组大鼠血清中SS，GAS，VIP，SP，CHE，NO的含量。大鼠脾虚造模后，与空白组相比，模型组大鼠血清中SS，VIP含量显著升高，GAS，SP，CHE，NO含量显著降低；治疗组大鼠与模型组相比，SS，VIP含量显著降低，GAS，SP，CHE，NO含量显著升高。白术生品组、麸炒品均能将脾虚大鼠血清中SS，GAS，VIP，SP，CHE，NO含量调节至正常鼠水平，麸炒品较生品表现更出色的调节效果，见表4。

4 讨论

传统中医理论认为白术生用燥湿健脾，麸炒后燥湿作用减弱而健脾作用增强，前期研究提出白术炮制的理论为“减酮减燥，增酯增效”。通过试验进行验证，分析产生这一现象的原因是苍术酮结构不稳定可转化为白术内酯类成分，在具氧加热的条件下苍术酮可转化为白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ等成分[5]，本次试验中，白术经麸炒后苍术酮含量显著降低，白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ含量升高，其中以白术内酯Ⅰ的含量升高最为明显，这一结果再次验证了白术“减酮增酯”的炮制原理。试验中采用的切换波长法同时测定白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ含量，经课题组成员验证稳定快速适用。因白术内酯Ⅰ，Ⅲ检测波长为220 nm，出峰时间分别为14，17 min左右，白术内酯Ⅱ的检测波长为276 nm，出峰时间在35 min左右，所以前30 min检测波长为220 nm，30 min后切换波长为276 nm对三者出峰并无影响，此含量测定方法实用可行。

燥性是中药的重要药性，但现代研究中少有学者用现代科学手段对中药的燥性进行研究，中医理论认为“燥胜则干”，一般具有燥湿、利湿等功效。生白术性燥而祛湿利水，麸炒后燥性减缓而健脾。就白术生、麸炒品对大鼠饮水量及排尿量试验结果来看，白术生品在影响大鼠饮水量及排尿量表现出与“燥湿利水”功效相符的作用，麸炒品则未表现出如生品一般的利水作用。有研究认为，苍术酮为白术的主要燥性成分之一[5]，本次试验中，白术经麸炒后苍术酮含量下降极显著，大鼠饮水量减少，且利水作用较生品减弱，这一结果再次验证了白术“减酮减燥”的炮制原理。

脾虚证动物模型的研制始于1979年，其机制研究以脾主运化（胃肠功能、胃肠激素）脾主身之肌肉为主[6]。中药常用大黄建立脾虚证模型，因其性味苦寒，多食伤脾胃阳气。现代药理研究认为，大黄含蒽醌类衍生物，其中游离型蒽醌可导致腹泻、胃肠道缺血炎症等症状，而模型多表现为以大便溏泻、食欲减退、肌瘦无力、毛发枯涩为主的“脾虚”症状。在造模过程中，各组与空白组在体重与进食量方面表现出十分显著的差异性，加之观察大鼠在造模过程中表现出的症状与文献报道相似，说明脾虚模型复制成功。通过治疗后比较各组大鼠体重与进食量，除模型组与空白组在体重与进食量方面有显著性差异外，其他各组与空白组并未表现出显著性差异，说明白术生品、麸炒品对脾虚大鼠有着良好的治疗作用。

试验中脾虚模型组血清中SS，VIP升高，是因为大黄通过抑制基础胃酸、胃蛋白酶、胰液的分泌作用[7-8]，抑制胆囊浓缩和收缩功能[9]，抑制胃排空及小肠对碳水化合物及氨基酸的吸收[10]从而导致胃肠蠕动减弱，排空能力受阻，最终致消化与吸收能力障碍，表现出饮食减少、体质下降等症状。麸炒白术品组大鼠血清中SS，VIP含量较模型组显著降低，白术生品组与模型组相比并未表现出显著性差异，说明麸炒白术品较生品能更好的降低脾虚大鼠血清中SS，VIP，促进胃排空，兴奋回肠和胆囊收缩，促进胃肠蠕动，调节消化液分泌，进而缓解脾虚症状。

试验中脾虚模型组血清中GAS，SP，CHE，NO含量与空白组相比均有显著性变化，GAS含量减低可导致基础胃酸及高峰算排除量降低[11]，SP，CHE含量降低乙酰胆碱酯酶作用减弱，刺激5-羟色胺神经元释放组胺[12]，导致胃蛋白酶和内因子分泌减少，NO减少致使胃肠黏膜分泌加行，平滑肌收缩幅度减弱 [13]，以上4种激素含量的降低会导致食物稀化，出现泄泻，便溏等脾虚症状[14]。本试验中，白术生品组和麸炒白术组大鼠GAS，SP，CHE，NO含量较模型组均显著升高，且以上4指标水平麸炒品组高于白术生品组。这说明白术麸炒品较生品能更好的促进脾虚大鼠胃泌素、P物质、胆碱酯酶、一氧化氮分泌，从而改善黏膜局部供血[15-16]保护胃黏膜，促进胃酸分泌、胃肠蠕动，进而缓解以泄泻为表证的脾虚症状。

本文从白术麸炒前后化学成分变化，生品、麸炒品对正常大鼠饮水量和尿量的影响，对脾虚大鼠4种胃肠激素，2种神经递质在血清中含量影响3方面进行考察。将苍术酮含量变化与对饮水量、尿量的影响相结合，印证了白术“减酮减燥”的炮制理论；将白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ含量变化与对脾虚大鼠4种胃肠激素，2种神经递质在血清中含量影响结合，印证了白术“增酯增效”的炮制理论，将二者

结合，进一步证实了白术“减酮减燥，增酯增效”炮制理论的科学性与合理性。

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Verification of processing theory of “reducing ketone and dryness， and

increasing ester and effect” for bran-fried atractylodes

ZHAO Wen-long1， WU Hui1， SHAN Guo-shun1， JIA Tian-zhu1，2*

（1. College of Pharmacy， Liaoning Universtity of Traditional Chinese Medicine， Dalian 116600， China；

2. Liaoning Provincial Engineering Technology Research Center for Processing of

Traditional Chinese Medicine， Dalian 116600， China）

[Abstract] We previously proposed the processing theory of “reducing ketone and dryness， and increasing ester and effect” for bran-fried atractylodes， and made a preliminary study. To further verify the science and rationality of the theory， we determined the changes in the content of atractylenolide I， II， III and atractylon in atractylodes after and before being fried with bran， in order to compare the effect of raw and bran-fried atractylodes on the water intake and urination in rats in this study. The effect of raw and bran-fried atractylodes on the content of four gastrointestinal hormones and two neurotransmitters in serum was observed in an attempt to verify the science and rationality the processing theory of “reducing ketone and dryness， and increasing ester and effect” for bran-fried atractylodes.

[Key words] atractylodes； processing theory； decreasing ketone and dryness， and increasing ester and effects

doi：10.4268/cjcmm20132017