・９８０・ 史国药物与临床２０１１年８月第１１卷第８期Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｒｅｍｅｄｉｅｓ＆Ｃｌｉｎｉｃｓ，Ａｕｇｕｓｔ ２０１１，Ｖｏ１．１１，Ｎ０．８ ・医学检验・ 肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎患者 腹腔积液中大肠埃希菌的耐药性分析 朱宏斌王伟军 自发性细菌性腹膜炎（ＳＢＰ）是肝硬化晚期常见的并发 症，预后差，病死率高 １］。由于ＳＢＰ患者的临床症状与体征常 不典型，缺乏特异性，故对有腹腔积液的肝硬化患者常规行 诊断性腹腔穿刺，早期诊断、及时足量、有效抗生素治疗是改 善其预后的主要因素［２＿。ＳＢＰ的致病菌主要来自肠道。大多数 为Ｇ＿杆菌，其中以大肠埃希菌为主。由于抗生素广泛且不合 理的应用，特别是第三、四代头孢菌素的大量使用，使大肠埃 希菌耐药率逐年上升，其主要原因是产生了超广谱Ｂ一内酰胺 酶（ＥＳＢＬｓ）［３］。现对我院肝硬化并发ＳＢＰ患者腹腔积液中分 离出的５４株大肠埃希菌的耐药性及产ＥＳＢＬｓ的情况进行分 析，现将结果报告如下。 １材料与方法 １．１菌株来源 选择２００６－－－２０１０年我院住院治疗的肝硬化并发ＳＢＰ患 者腹腔积液中分离出的大肠埃希菌５４株。药敏纸片及ＥＳＢＬｓ 鉴定试剂均购自杭州天和微生物试剂有限公司，用肺炎克雷 伯菌ＡＴＣＣ７００６０３和大肠埃希菌ＡＴＣＣ２５９２２作ＥＳＢＬｓ测定 的阳性及阴性对照。 １．２细菌鉴定和药敏试验 采用法国生物梅里埃公司的Ｖｉｔｅｋ一３２型微生物分析仪 和ＧＮＩ＋鉴定卡进行细菌菌株；采用纸片扩散（Ｋ—Ｂ）法进行药 敏试验。 １．３ ＥＳＢＬｓ检测 １．３．１筛选试验：凡头孢他啶抑菌环直径≤２２ ｍｍ。头孢曲 松≤２５ ｍｍ。氨曲南或头孢噻肟≤２７ ｍｍ的菌株均为可疑菌 株。应进一步做确证试验。 １．３．２确证试验：用头孢他啶（３０ 片）和头孢他啶／克拉维 酸（３０ Ｉ．￣ｇ／ｌＯ Ｉ．Ｌｇ），头孢噻肟（３０ 片）和头孢噻肟／克拉维酸 （３０￣ｇ／ｌＯ ｇ）进行检测，当２种药物中任１种加克拉维酸与 不加克拉维酸的抑菌环直径≥５ ｍｍ时，即可确认为产ＥＳＢＬｓ 菌株。 ２结 果 从５４株大肠埃希菌中检出产ＥＳＢＬｓ菌株２５株。检出率 高达４６％。大肠埃希菌对头孢西丁、亚胺培南、丁胺卡那霉 素、哌拉西林／ｆ也唑巴坦和头孢哌酮／舒巴坦的耐药率均＜３０％； 基金项目：浙江省台州市路桥区科技局课题（２０１０Ａ２３０３０） 作者单位：３１７６００浙江省玉环中医院消化科（朱宏斌）；浙江省台 州医院路桥院区检验科（王伟军） 对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢 他啶、庆大霉素、复方新诺明、环丙沙星、氧氟沙星的耐药率 均＞５０％。产ＥＳＢＬｓ菌株对１７种抗生素的耐药性绝大部分均 高于非产ＥＳＢＬｓ菌株。见表１。 ３讨 论 ＳＢＰ是肝硬化失代偿期常见的并发症，发生率高达１０％ ～４０％［ ，其发病机制主要与肠道菌群失调。肠黏膜通透性增 加，肠道细菌移位有关，也与机体免疫力下降相关。腹腔积液 是良好的培养基，一旦感染则易诱发和加重肝功能衰竭进 程，导致多脏器衰竭致死亡，因此肝硬化患者合并腹膜炎及 早合理地使用抗菌素尤为重要。大肠埃希菌是肝硬化伴ＳＢＰ 患者主要的致病菌。产ＥＳＢＬｓ是大肠埃希菌对第三代头孢菌 素耐药的主要原因。ＥＳＢＬｓ由质粒介导，底物谱广，能水解大 多数青霉素类、头孢菌素类和单酰胺类抗生素：此外，产Ｅｓ— ＢＬｓ菌的耐药基因编码经常与其他抗生素的耐药基因联结而 使耐药性更加复杂；产ＥＳＢＬｓ菌还可以通过接合、转化、转导 等形式使耐药基因在细菌间传播，造成严重的耐药问题 。 本研究从肝硬化并发ＳＢＰ患者的腹腔积液分离的５４株 大肠埃希菌检出ＥＳＢＬｓ ２５株，检出率高达４６％。检出率与文 献［５，６］报道基本一致。药敏试验表明对头孢西丁、亚胺培 南、丁胺卡那霉素、哌拉西林，他唑巴坦和头孢哌酮／舒巴坦的 耐药率均＜３０％；对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑啉、头孢噻肟、 头孢曲松、头孢他啶、庆大霉素、复方新诺明、环丙沙星、氧氟 沙星的耐药率均＞５０％。产ＥＳＢＬｓ菌株对ｌ７种常用抗生素的 耐药性大部分高于非产ＥＳＢＬｓ菌株。这与产ＥＳＢＬｓ菌株在携 带有ＥＳＢＬｓ质粒上可同时携带有多个对氨基糖苷类、磺胺 类、喹诺酮类等抗生素的耐药基因有关＿７＿。大肠埃希菌对青霉 素类抗生素耐药率最高，一般不宜使用，这与文献［８］报道一 致。头孢菌素类药物中以头孢吡肟抗菌活性最强，本组耐药 率为３７％，原因可能是第４代头孢菌素对Ｂ一内酰胺酶亲和力 较低。能快速地通过细菌的外膜屏障与青霉素结合蛋白 （ＰＢＰ）结合而发挥较强的抗菌作用。头霉类抗生素由于含有 对ＥＳＢＬｓ酶相对稳定的７－ｃｔ甲基侧链．对大肠埃希菌的抗菌 活性优于前三代头孢菌素 ，本组头孢西丁耐药率为２６％。亚 胺培南是对大肠埃希菌抗菌作用最强．本组非产ＥＳＢＬｓ菌株 对亚胺培南的敏感率为１００％，产ＥＳＢＬｓ菌株对亚胺培南的 敏感率９６．０％。可见亚胺培南可作为本地区重症感染的首选 药物。丁胺卡那霉素对大肠埃希菌敏感性相对较高，但因其 中国药物与临床２０１１年８月第１１卷第８期Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｒｅｍｅｄｉｅｓ＆Ｃｌｉｎｉｃｓ，Ａｕｇｕｓｔ ２０１１，Ｖｏ１．１１，Ｎｏ．８ ・ ９８１ ・ 表１产ＥＳＢＬｓ菌株与非产ＥＳＢＬｓ菌株对１７种抗生素的耐药性 具有明显的肾毒性和耳毒性，临床一般不推荐使用。大肠埃 ［３］ 秦波，郭树华．自发性病原菌性腹膜炎．中华肝脏病杂志，２００３， 希菌以往对喹诺酮类较敏感，但近年发现其耐药性迅速上 １１（７）：４３９—４４０． 升，且喹诺酮类药物存在明显交叉耐药性，故临床医生在得 ［４］ 彭少华，李从荣，施菁玲，等．产超广谱Ｂ一内酰胺酶细菌的检测 到药敏结果前，不宜首选使用［９］。头孢哌酮，舒巴坦和哌拉西 及耐药性观察．中华检验医学杂志，２００１，２４（６）：３５０—３５２． 林，他唑巴坦的耐药率均低于２５％，可能是由于Ｂ一内酰胺类／ ［５］ Ｈｉｌｌｅｂｒａｎｄ ＤＪ．Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｒｉｔｏｎｉｔｉｓ．Ｃｕｒｔ Ｔｒｅａｔ Ｏｐ－ Ｂ一内酰胺酶抑制剂药物由于加用Ｂ一内酰胺酶抑制剂后提高 ｔｉｏｎｓ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２ｏｏ２，５（６）：４７９—４８９． 了抗生素对大肠埃希菌所产Ｂ一内酰胺酶的稳定性，增强了抗 ［６］ 王建忠，费迎明，金法祥．肝硬化并发自发性腹膜炎腹腔积液中 菌作用［１ｏ］。 大肠埃希菌耐药性和基因型分布的研究．中华医院感染学杂 志，２０１０，２０（４）：４６７－－４６８． 总之。肝硬化伴ＳＢＰ患者腹腔积液感染大肠埃希菌对抗 ［７］ 滕琳，苏芬，甄永强，等，产超广谱０一内酰胺酶细菌肺部感染及 生素耐药的主要原因是产生ＥＳＢＬｓ。经验用药可选择８一内酰 耐药性分析．中华医院感染学杂志，２００２，１２（１２）：９４８—９４９． 胺类，Ｂ一内酰胺酶抑制剂和头霉类抗生素，对重症感染一般首 ［８］ 胡龙华，贾坤茹，胡晓彦，等．大肠埃希菌临床分离株耐药性分 选碳青霉烯类抗生素，但最好根据药敏试验结果选择敏感药 析．中国抗感染化疗杂志，２００４，４（４）：２３９—２４１． 物进行治疗。 ［９］ 范树养，刘丰．胆道感染大肠埃希菌ＡｍｐＣ酶和超广谱ｐ一内酰 参考文献 胺酶的检测及耐药分析．实用医学杂志，２００８，２４（１２）：２１６４— ［１］金法祥，李水法．肝硬化并发自发性腹膜炎腹腔积液培养的病 ２１６５． 原菌及耐药性分析．中华医院感染学杂志，２００７，１７（９）：１１６７— ［１０］ 干建忠．肝硬化并发自发性腹膜炎腹腔积液培养的病原菌及大 １１６８． 肠埃希菌的耐药性分析．中国卫生检验杂志，２００９，１９（１）：１３９— ［２］Ｓｔｒａｕｓｓ Ｅ，Ｃａｌｙ ＷＲ．Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ ｂａｃｔｅｉｒａｌ ｐｅｒｉｔｏｎｉｔｉｓ：ａ ｔｈｅｒａ— １４０． ｐｅｕｔｉｃ ｕｐｄａｔｅ．Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ａｎｔｉ—Ｉｎｆｅｃｔ Ｔｈｅｒ，２００６，４（２）：２４ｌ９－ （收稿日期：２０１１—０４—１８） ２６０．
