２０１２年１０月第１９卷第２８期 ・药品鉴定・ 复方氯霉素洗剂中氯霉素含量测定方法的探讨与改进 李有富 李魏林・ ４４１０００ 湖北省襄阳市铁路中心医院药剂科，湖北襄阳【摘要】目的探讨与改进复方氯霉素洗剂中氯霉素的含量测定方法。方法采用紫外分光光度法在２７８ ｎｍ处直接 测定复方氯霉素洗剂的吸收值，扣除此处干扰成分水杨酸的吸收值，建立公式计算氯霉素的含量，并将结果与化学 滴定法测定结果相比较。结果氯霉素用化学滴定法测定终点不易准确判断，改进为紫外分光光度法则更准确、简 便。结论本法简便、快速、准确，适用于医疗机构制剂的快速质量控制。 【关键词】紫外分光光度法；氯霉素；含量测定；探讨 【中图分类号】Ｒ９２７．２ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１６７４—４７２１（２０１２）１０（ａ）一００６１—０２ Ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ａｓｓａｙ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ Ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ ｉｎ Ｆｕｆａｎｇ Ｌｖｍｅｉｓｕ ｘｉｊｉ ＬＩ ｌ，ｏ ＬＩ Ｗｅｉｌｉｎ Ｒａｉｌｗａｙ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｘｉａｎｇｙａｎｇ Ｃｉｔｙ ｉｎ Ｈｕｂｅｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｘｉａｎｇｙａｎｇ ４４１０００，Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｄｉｓｃｕｓｓ ａｎｄ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ａｓｓａｙ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ Ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ ｉｎ Ｆｕ￣ｎｇ Ｌｖｍｅｉｓｕ Ｘｉｊｉ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｇｅｎｅｒ￣ａｂｓｏｒｂｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ａｂｓｏｒｂｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｌｉｃｙｌｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ２７８ ｎｍ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ（ＵＶ）ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ， ａｎｄ ｔｈｅ ｆｉｇｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｆｏｒｍｅｒ ｓｕｂｔｒａｃｔ ｔｈｅ ｌａｔｔｅｒ ｗａｓ ｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄ ａｓ ｔｈｅ ａｂｓｏｒｂｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏ１．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ Ｌａｍｂｅｒｔ—Ｂｅｅｒ Ｌａｗ，ｔｈｅｎ．ａ ｆｏｒｍａｔ ｗａｓ ｅｓｂｌｉｓｈｅｄ ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｃｏｕｎｔ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏ１．ａｎｄ ａ ｃｏｎｔｒａｃｔ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｔａｋｅｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｉｓ ｍｅｔｏｄ ａｎｄ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｔｉｔｒａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ＵＶ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｍｏｒｅ ａｃｃｕｒａｔｅ ａｎｄ ｓｉｍｐｌｉｓｔｉｃ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｔｉｔｒａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｐｒｏｖｅｄ ＵＶ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ａｐｐｌｉｃａｂｌｅ ｔｏ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｔｈｅ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ ｄｉｓｐｅｎｓｅｄ ｉｎ ｈｏｓｐｉｔａｌｓ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ；Ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃ０Ｉ；Ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ 复方氯霉素洗剂是临床常用的外用制剂之一，具有止 痒、杀菌、溶解脂肪酸的作用，用于治疗痤疮、酒糟鼻、脂溢性 伴毛囊炎型皮炎等效果良好。复方氯霉素洗剂质量标准收载 于《中国医院制剂规范》西药制剂第二版，其处方组成为氯霉 吸收特征。按照《中国医院制剂规范》，水杨酸采用酸碱中和 滴定法测定含量简单、快速、准确，仍予采用。 标准曲线的制备：分别精密称定一定量干燥至恒重的水 杨酸对照品，加乙醇适量溶解并用纯化水稀释成约１０、２０、 素１０ ｇ、水杨酸２Ｏ ｇ、薄荷脑５ ｇ、甘油２５ ｍＬ、乙醇８００ ｍＬ， 蒸馏水加至１ ０００ ｍＬ［”。氯霉素的最大吸收波长为２７８ ａｍ， ３Ｏ、４０、５０ Ｉｘｇ／ｍＬ的系列对照品溶液，以纯化水为空白，于 ２７８ ｎｍ波长处分别测定吸收度Ａ，见表１。 表１ 水杨酸的线性考察结果 对照品溶液Ｃ（￣ｇ／ｍＬ） １０．２ ２０－３ ３０．１ 而水杨酸在２７８ ｎｍ处的吸收对氯霉素的测定产生干扰，故 该药品标准中弃用了紫外分光光度法测定氯霉素含量，而是 采用亚钠滴定法。但该滴定法操作繁琐，且用碘化钾淀粉 试纸划痕判断终点容易产生误差。本实验依据吸收度加和性原 则，测定复方氯霉素洗剂在２７８ ｎｍ处的总吸收，然后扣除此 吸收度Ａ ０．１５２ ０．２５５ ０．３６１ ０．４７１ ０．５９０ 处水杨酸的吸收，由此计算所得氯霉素的含量测定结果准确、 稳定，方法简便、快速，适用于医疗机构制剂的快速质量控制。 １仪器与试药 ４０．６ ５０．８ ＵＶ７５７ＣＲＴ型紫外分光光度计（上海精密科学仪器有限 公司）；水杨酸（中国食品药品检定研究院，批号：１００１０６— ２０１１０４）；氯霉素（国家标准物质网，ＡＳＢ一００００３４２８—００１）；复 由表１得回归方程Ａ＝０．０１０ ８Ｃ＋０．０３８ ７，Ｒ＝０．９９９。表 明水杨酸在１０．２～５０．８ ｔ￣ｇ／ｍＬ的范围内，其紫外吸收与浓度 呈良好的线性关系 方氯霉素洗剂（自制三批，批号１２０５０６、１２０５１５、１２０５２３）；乙 醇为分析纯。 ２方法、与结果 ２．２氯霉素的紫外分光光度法测定 ２．２．１样品溶液的配制和测定 ２．１水杨酸在２７８ ｎｍ波长处的吸收特征 水杨酸的最大吸收波长为２３０ ｎｍ．与氯霉素在２７８ ｎｍ 处的吸收有较大重叠［２－６］，故本文考察水杨酸在２７８ ｎｍ处的 ［作者简介】李有富（１９６６一），男，湖北襄阳人，主管药师，本科学历，湖北 省襄阳市铁路中心医院药剂科主任。 ２．２．１．１分别精密量取三批批号为１２０５０６、１２０５１５和１２０５２３ 的复方氯霉素洗剂各５ ｍＬ，置１００ ｍＬ量瓶中，加水稀释至刻 度，摇匀；精密量取２ ｍＬ置１００ ｍＬ量瓶中，加水稀释至刻 度，摇匀作为样品溶液。照分光光度法（中国药典２０１０年版 二部附录ⅣＡ）在２７８ ｎｍ波长处测定吸收度Ａ ，见表２。 通讯作者：李魏林（１９８３一），男，湖北襄阳人，药师，硕士研究生，研究方 向为药物化学和药品检验。 ２．２。１．２分别精密量取批号为１２０５０６、１２０５１５和１２０５２３的复 方氯霉素洗剂各５ ｍＬ，按照《中国医院制剂规范》所示方法 ＣＨｌＮＡ ＭｏＤＥＲＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ中国当代医药６１ ・药品鉴定・ 表２复方氯霉素洗剂在２７８ ｎｍ处的紫外吸收 批号 吸收度Ａ ｌ２０５０６ ０．５５０ ｌ２０５１５ ０．５５８ ｌ２０５２３ ０．５５７ 操作，加中性醇１０ ｍＬ，酚酞指示液２滴，用氢氧化钠滴定液 （０．１ ｔｏｏｌ／Ｌ）滴定至溶液显粉红色，即得。将滴定结果经稀释 倍数代换后代人其回归方程得其吸收度Ａ ，见表３。 表３复方氯霉素洗剂中水杨酸在２７８ ｎｍ处的紫外吸收 ２．２．２氯霉素含量的计算 氯霉素用紫外分光光度法测定已经比较完善，氯霉素酊 的含量正是采用此法测定【 。为避免水杨酸的吸收干扰，《中 国药典１２０１０年版中已把测定方法升级为ＨＰＬＣ法，但其原 理仍然基于２７８ ｎｍ波长处的紫外吸收。根据以上药品标准 可知，氯霉素在２７８ ｎｍ波长处的吸收系数（Ｅ ）为２９８。 根据吸收度的加和性原则，Ａ ＝Ａ氯＋Ａ ，故Ａ ＝Ａ ．Ａ 根据朗伯一比尔定律，Ａ氯＝Ｅ： ｘＣ氯ｘＬ 可得氯霉素的浓度计算公式为：ｃ ： Ｅｌ ｍ 用以上公式所得Ｃ ×稀释倍数１ ０００，即得复方氯霉素 洗剂中氯霉素的含量测定结果，见表４。 表４复方氯霉素洗剂中氯霉素的含量（紫外分光光度法） 批号 氯霉素（％） ｌ２０５０６ ０．９７ １２０５１５ ０．９７ １２０５２３ ０．９９ ２．３加样回收率试验 精密量取已知氯霉素含量为０．９７％、水杨酸含量为 ２．０５％的复方氯霉素洗剂５ ｍＬ，分别置３个１００ ｍＬ量瓶中， 设为低、中、高３个浓度组，并依次精密加入约２０、３０、４Ｏ ｍｇ 干燥至恒重的氯霉素对照品，每组分设３个平行，加适量乙 醇溶解后加水稀释至刻度，摇匀；精密量取２ ｍＬ置１００ ｍＬ 量瓶中．加水稀释至刻度，摇匀。照２．２项下方法测定．以最 后定容的样品溶液计算加样回收率，见表５。 由加样回收试验结果可知，采用本实验所述的紫外分光 光度法测定氯霉素的含量，其准确度高，符合测定要求。 ２．４氯霉素两种含量测定方法的比较 化学滴定法：精密量取批号分别为１２０５０６、１２０５１５和 １２０５２３的复方氯霉素洗剂２５ ｍＬ，按照《中国医院制剂规范》 所示方法操作，置１００ ｍＬ锥形瓶中，加锌粉１ ｇ，盐酸（１—２） １５ ｍＬ，摇匀，置水浴上加热１５ ｍｉｎ，放冷，过滤，滤器用 ２０ ｍＬ蒸馏水分４次洗涤，洗液与滤液合并，加盐酸（１—２） １０ ｍＬ，加溴化钾２ ｇ，用亚钠滴定液（０．１ ｍｏｌ／Ｌ）滴定，并 ６２中国当代医药ＣＨＩＮＡ ＭＯＤＥＲＮ ＭＥＤｌＣＩＮＥ ２０１２年１０月第１９卷第２８期 表５加样回收率试验 不断强力搅拌。至用玻璃棒蘸取少许划过碘化钾淀粉试纸即 呈蓝色条痕，即为终点。将测定结果与紫外分光光度法相比 较．见表６。 裹６两种含量测定方法的比较 两种测定方法比较可知。化学滴定法操作比较繁琐费 时，且用碘化钾淀粉试纸划痕判断终点容易产生较大误差， 造成测定结果不准确，而用紫外分光光度法测定，排除了人 为判断因素，所得数据更准确、更均一。 ３讨论 《中国医院制剂规范》出版于２Ｏ世纪９０年代，有些制剂 的含量测定方法仍沿用相对古老的化学滴定法滴定，与近年 来药物制剂检测技术飞速发展的形势极为不符，也给药品生 产单位的质量检验工作带来一定的局限和困扰。笔者查阅大 量文献资料，并结合生产单位实际，对复方氯霉素洗剂中氯霉 素的含量测定方法进行了探讨和改进。结果表明，采用紫外分 光光度法测定复方氯霉素洗剂中氯霉素的含量，不经预先分离， 不需对照品，且对检测仪器霹求不高。相比较《中国医院制剂 规范》中采用的化学滴定法而青。本操作简便、快速，测定中排 除滴定终点判断容易产生误差的劣势，测定结果亦更为稳定、 准确，尤其适用于生产单位及医院制剂室的快速质量控制。 【参考文献】 ［１］中华人民共和国卫生部药政局，《中围医院制利规范》西药制刺第二 版［Ｓ］．北京：中国医药科技出版社，１９９５：１０３—１０４． ［２】霍天凤。赵素珍．宋闰军。两版药典对氯霉索含量测定的比较【Ｊ】．中国 医药导报。２００６．３（２７）：１４８—１４９． 【３】夏鹏霄。杨瀚舂．陈晓霞，等．紫外分光光度法测定复方氯霉素滴耳液 中氯霉素含量ｆＪ］．总装备部医学学报．２００９。１１（１）；２５—２６． ｆ４１黄喜茹，范桂敏。雷鹏森，等．多波长直线回归法测定氯柳酊中的氯霉 素和水杨酸【Ｊ】．化学试剂，２００６．２８（１０）；６Ｏｌ一６０２。６０７． 【５】熊宝光。晏萍．洪建华．二阶导数紫外光谱法测定复方氯霉索洗剂中 氯霉素及水杨酸的含量［Ｊ］．实用临床医学．２００５，６（９）：１７，２０ 【６】罗桂萍．紫外分光光度法测定氯柳酊中氯霉素和水杨酸的含量【Ｊ］．天 津药学，２００４．１６（６）：１１—１２． 【７］湖北省卫生厅．湖北省医院制剂规范 武汉：武汉出版社，１９９９：１１６－１１７． 【８］郭润勤．氯霉素酊中氯霉素的含量测定【Ｊ】．海峡药学，２００７，１９（９）：２６—２７． （收稿日期：２０１２—０６—１４本文编辑：郭静娟）
