环氧乙烷灭菌工艺验证报告

验证目的；对我公司环氧乙烷灭菌器年度审核，现对进行灭菌的有效性及安全性进行验证。 1. 验证安排: 验证组员 组长:XXXX

操作人员：XXXX XXXXX

微生物检验员：送检(XXXXX公司) 1.2验证时间：XXXX-X-XX

1.3验证设备：环氧乙烷灭菌柜（XXXX—XXX） 1.4验证步骤：

环氧乙烷残留确认 微生物性能确认 2操作人员资格

灭菌人员经过了灭菌柜的操作，维护，安全方面的培训，考核通过并取得上岗证，符合要求。

2.1

物理运行确认：

性能物理确认包括真空速率实验、真空（负压）泄漏实验、空载温、湿度均匀性实验和满温、湿度均匀性实验，实验结果如下：

2.2本套设备真空度达到-15kpa的时间为5min；真空速率-3Kpa；灭菌器真空度到达-50kpa的时间为18min；真空速率-2.7Kpa符合说明书中灭菌器真空度到达-50kpa的时间规定的≤30min的真空速率要求。 2.3真空（负压）泄漏实验系在-50kpa条件下，保压60min时间，符合泄漏速率≤0.1kpa／min的要求； 2.4真空（正压）泄漏实验系在+50kpa条件下，保压60min时间，符合泄漏速率≤0.1kpa／min的要求； 2.5温度均匀性；

温度传感器数25个，测试空载温度为50℃检测结果为≤±1.5℃，符合要求空载温度均匀≤±3℃.

3.化学及微生物性能确认

使用的化学指示剂是天津大学生产的。每车三层，每层各贴4片（每个边贴一片） 枯草芽刨杆菌片是北京鑫四环消毒技术开发有限公司生产的，使用菌片数为20枚。（化学指示剂及枯草芽孢杆菌菌片放置操作规程,具体位置见附件） 3.1纯环氧乙烷气体，每瓶20kg,每次灭菌使用13kg;

3.2测试产品为 6板，离心管、吸头、微量离心管、乳胶手套

产品使用理由： 产品（规格） 包装 体积（立方） 重(KG) 量密度 XXXXX XXXXX XXXXX XXXXX XXXXX 架装，X个/包，X包/箱 袋装，X个/包，X包/箱 架装，X个/包，X包/箱 袋装，X个/包，X包/箱 袋装, X个/包/盒X盒/箱 XXXXX XXXXX XXXXX XXXXX 袋装,X支/包,X包/箱 盒装X支/盒,X盒/组,X组/箱 袋装,1000支/包,10包/箱 盒装,96支/盒,10盒/组,5组/箱 XXX产品密度最大,客户对XXX产品灭菌要求也很高,所以密度紧随其后的,XX1,XXX2,XXX3也一并考虑进去.

3.3本次验证将三个半时循环的完整微生物绩效评估，在验证过程中每个菌片将放在10ml的离心管内，产品拧上盖子并用0.05mm厚是塑料热封袋包装。

3.4.灭菌产品为；6板（共108箱 ） 日期:201X-X-1X 07：30-——15：30 产品名称 XXX 包装方式 2包装,30包/盒,20盒/箱 包装尺寸 体积m3 重量kg 产品材料 XX 表1 参数 保温温度 水箱温度 保温时间 湿度范围 预真空 真空幅度 保压时间 加药量 灭菌时间 灭菌温度范围 换气真空度 换气次数 通风时间 设置值 47℃ 53℃ 30分钟 30％-------85％ —18kpa 17 kpa 5分钟 13kg纯环氧乙烷 6小时 48℃ —17kpa 3次 30分钟 灭菌参数实际值 47.6℃--49.8℃ 51.6℃—52.4℃ 30分钟 73.5％--------83.6％ —18.7kpa 16.8 kpa 5分钟 13.50kg纯环氧乙烷 6小时 45℃—48.3℃ —17kpa 3次 35分钟 15个温控点温度范围在46.2℃-51.2℃,最大温差5度,符合小于10度的要求.

3.5第2个半周期

3.51灭菌产品为；6板（共108箱） 日期:201X-X-1X 1X：32-——2X：32 产品名称 XXXX XXXXX 参数 保温温度

包装方式 组／箱 盒/组,组/箱 包装尺寸 表2 设置值 47℃ 体积m3 重量kg 产品材料 灭菌参数实际值 45.6℃--49.4℃ 2

水箱温度 保温时间 湿度范围 预真空 真空幅度 保压时间 加药量 灭菌时间 灭菌温度范围 换气真空度 换气次数 通风时间 53℃ 30分钟 30％-------85％ —18kpa 17 kpa 5分钟 13kg纯环氧乙烷 6小时 48℃ —17kpa 5次 30分钟 52.1℃—53.2℃ 30分钟 68.5％--------80.2％ —18.3kpa 17.6 kpa 5分钟 13kg纯环氧乙烷 6小时 46℃—48.8℃ —17.40kpa 5次 32分钟 15个温控点温度范围在44.3℃-50.4℃,最大温差4.9度,符合小于10度的要求.

3.5.2灭菌产品为；（共186箱） 日期:201X-X-1X 1X：22———2X：22 产品名称 包装方式

表3 参数 保温温度 水箱温度 保温时间 湿度范围 预真空 真空幅度 保压时间 加药量 灭菌时间 灭菌温度范围 换气真空度 换气次数 通风时间 设置值 48℃ 53℃ 30分钟 30％-------85％ —18kpa 17 kpa 5分钟 13kg纯环氧乙烷 6小时 48℃ —17kpa 5次 30分钟 灭菌参数实际值 46.5℃--50.2℃ 51.0℃—53.℃ 30分钟 63.5％-------79 ％ —18.3kpa 17.7 kpa 5分钟 13.65kg纯环氧乙烷 6小时 46℃—48.8℃ —17.80kpa 5次 30分钟 包／箱 包装尺寸 X 体积m3 重量kg 产品材料 15个温控点温度范围在45.4℃-50.3℃,最大温差4.9度,符合小于10度的要求. 4.1结论：

通过本次确认，灭菌过程的温度，湿度，保温，预真空压力，灭菌时间，加药量等参数都在可允许范围，芽孢杆菌片检测全部合格，见附件《芽孢杆菌片检测报告》 4.2本次验证过程符合制定的方案要求；参数确认如下； 表4

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参数 温度 水箱温度 保温时间 湿度 预真空 真空幅度 保压时间 加药量 灭菌时间 换气真空度 换气次数 通风时间

设置值 50±3℃ 53℃ 30分钟 30％——85％ -17kpa 17kpa 5分钟 13kg纯环氧乙烷 12小时 -18kpa 5次 30分钟

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菌片摆放位置

1. 每次放菌片20个 2. 菌片摆放位置如下表: 序号 菌片编号 菌片摆放位置 2A 3B 6C 7A 10B 9C 11C 13C 15B 16A 18A 19C 21A 22B 29A 31A 32B 33C 35C 36A 1A 2A 3A 4A 5A 6A 7A 8A 9A 10A 1B 2B 3B 4B 5B 6B 7B 8B 9B 10B 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

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无菌检查报告－检验时间：2012.08.13

受XXXXX公司委托，我部对XXXX公司的三个不同批次样品共60个样品经环氧乙烷灭菌后取菌片进行无菌检测(菌片批号: ..) 1． 生化培养箱培养箱 型号： XXXX 厂家：XXXXXX有限公司 2． 检验方法：取菌片直接放入肉汤培养基中于37℃培养7天 3． 每天观察记录：逐日观察培养物均澄清 4． 检测单位：XXXXXX 品名 送检时间: 菌片 批号 规格 枯草芽孢杆菌菌片 检验依据：中国药典2010年版二部附录；培养条件：37℃培养7天 样品 A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 A9 A10 品名 送检时间: 检验依据：中国药典2010年版二部附录；培养条件：37℃培养7天 样品 A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 A9 A10 品名

无菌检查结果 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 菌片 判定 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 批号 样品 B1 B2 B3 B4 B5 B6 B7 B8 B9 B10 无菌检查结果 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 规格 判定 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 枯草芽孢杆菌菌片 无菌检查结果 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 菌片 6

判定 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 批号 样品 B1 B2 B3 B4 B5 B6 B7 B8 B9 B10 无菌检查结果 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 规格 判定 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 枯草芽孢杆菌菌片 送检时间: 检验依据：中国药典2010年版二部附录；培养条件：37℃培养7天 样品 A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 A9 A10 无菌检查结果 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 判定 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 样品 B1 B2 B3 B4 B5 B6 B7 B8 B9 B10 无菌检查结果 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 培养物澄清 判定 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 结论:本品按《中国药典》2010年版二部附录检测, 结果 符合 规定.

检测人:XXXX

201X XX.XX

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环氧乙烷残留含量测定－检验时间：2012.08.13

受XXXXX公司委托，我部对XXX公司生产的吸头（批号：、、）共30个样品进行环氧乙烷残留检测。

1. 检验设备：紫外分光度计 型号：XXXX 厂家:XXX公司 2. 检验方法：比色分析法测定方法

1).取五支纳氏比色管，分别加入0.1mol /L盐酸2ml，再精确加入0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml乙二醇标准溶液。另取一支纳氏比色管，精确加入0.1mol/L盐酸2ml作为空白对照。

2).于上述各管中分别加入0.5％高碘酸溶液0.4ml，放置1小时，再分别滴加硫代硫酸钠溶液至出现的黄色恰好消失（除去剩余的高碘酸）。再分别加入品红－亚硫酸试液0.2ml，用蒸馏水稀释至10ml，室温放置1小时，于560nm波长处以空白液作参比，测定吸光度。绘制吸光度－体积标准曲线。

3).精密移取样品试液2.0ml于纳氏比色管中，按2步骤操作，以测得的吸光度从标准曲线上查得试液相应的体积。

3. 检测单位：XXXXXXX

品名 吸头 批号 规格 样品 吸光度 体积ml 含量mg/ml 相对含量W:ug/g 检验依据：GB/T14233.1-2008 检验方法：比色分析法 A1 0.5056 7.77 0.09712 0.17 A2 0.1075 1.88 0.02343 0.04 A3 0.6521 9.94 0.12424 0.22 A4 0.1486 2.48 0.03104 0.06 A5 0.4215 6.53 0.08155 0.14 B1 0.1618 2.68 0.03348 0.06 B2 0.2819 4.46 0.05571 0.10 B3 0.06 1.17 0.014 0.03 B4 0.4565 7.05 0.08803 0.16 B5 0.0663 1.27 0.01581 0.03 品名 吸头 批号 规格 样品 吸光度 体积ml 含量mg/ml 相对含量W:ug/g 检验依据：GB/T14233.1-2008 检验方法：比色分析法 A1 0.3962 6.15 0.07687 0.14 EOEO10ul 绝对含量WEO:ug/g 3.45 0.83 4.42 1.10 2.90 1.19 1.98 0.52 3.13 0.56 200ul 绝对含量WEO:ug/g 0.27

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A2 0.8852 13.40 0.16738 0.30 A3 0.7985 12.11 0.15133 0.27 A4 0.0982 1.74 0.02171 0.04 A5 0.4112 6.37 0.07965 0.14 B1 0.1597 2.65 0.03310 0.06 B2 0.3442 5.38 0.06725 0.12 B3 0.0872 1.57 0.01968 0.03 B4 0.2987 4.71 0.05882 0.10 B5 0.0714 1.34 0.01675 0.03 品名 吸头 批号 规格 样品 吸光度 体积ml 含量mg/ml 相对含量W:ug/g 检验依据：GB/T14233.1-2008 检验方法：比色分析法 A1 0.4265 6.60 0.08248 0.15 A2 0.0775 1.43 0.01788 0.03 A3 0.7553 11.47 0.14334 0.25 A4 0.1178 2.03 0.02534 0.04 A5 0.4254 6.59 0.08228 0.15 B1 0.1602 2.66 0.03319 0.06 B2 0.2996 4.72 0.059 0.10 B3 0.0775 1.43 0.01788 0.03 B4 0.2024 3.28 0.04100 0.07 B5 0.06 1.61 0.02012 0.04 EO0.59 0.54 0.08 0.28 0.12 0.24 0.07 0.21 0.06 1000ul 绝对含量WEO:ug/g 0.29 0.06 0.51 0.09 0.29 0.12 0.21 0.06 0.15 0.07 结论:本品按 GB/T14233.1-2008 比色分析法检测, 结果 符合 规定.

检测人:XXXX

201X.0X.XX

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