・医学检验・ ２０１０年ｌ０月第７卷第２８期 丙型肝炎病毒抗体检测结果分析 李佳 （辽宁省丹东市中心血站，辽宁丹东１１８００２） 【摘要】目的：分析ＨＣＶ抗体检测结果并探讨解决问题的对策。方法：结合全国血站系统室间质评．对我站２００９年 ＥＬＩＳＡ方法检测ＨＣＶ抗体的结果进行分析。结果：我站２００９年共采集血液２４ ５６９ Ｕ（２００ ｍｌ为１ Ｕ），ＥＬ１ＳＡ方法检 测ＨＣＶ抗体报废３６０ Ｕ，其中阳性报废１６２ Ｕ，可疑报废１９８ Ｕ，可疑报废占ＨＣＶ总报废比为５５．００％。２００５年血站 系统第３次室间质评０５７４号标本回报结果准确率为３５．５１％。结论：血站ＨＣＶ检测还存在假阳性和假阴性的问题， 提高试剂质量和改进检测方法可以更有效地减少血液浪费，保证血液安全 【关键词】ＨＣＶ抗体；ＥＬＩｓＡ；检测；分析 【中图分类号】Ｒ４４６．６ 【文献标识码】Ｂ ［文章编号］１６７３—７２１０（２０１０）１Ｏ（ａ）一０７４—０２ Ｔｈｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ０ｆ ＨＣＶ—Ａｂ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ＬＩ Ｊｉａ （Ｔｈｅ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｂｌｏｏｄ Ｂａｎｋ ｏｆ Ｄａｎｄｏｎｇ Ｃｉｔｙ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｄａｎｄｏｎｇ １ １ ８００２１ ｆＡｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ＨＣＶ—Ａｂ ｔｅｓｔ ａｎｄ ｄｉｓｃｕｓｓ ｔｈｅ ｃｏｕｎｔｅｒｍｅａｓｕｒｅ ｏｆ ｐｒｏｂｌｅｍ—ｓｏｌｖｉｎｇ．Ｍｅｔｈｏｄｓ： Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ＨＣＶ—Ａｂ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＥＬｌＳＡ ｉｎ ２００９ ｌｉｎｋｉｎｇ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｅｘｔｅｒｎａ１ ｑｕａｌｉｔｙ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｎａｔｉｏｎｗｉｄｅ ｂｌｏｏｄ ｂａｎｋ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：２４ ５６９ Ｕ ｆ２００ ｍｌ＝１ Ｕ）ｂｌｏｏｄ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｉｎ ２００９ ａｎｄ ３６０ Ｕ ｂｌｏｏｄ ｗｅｒｅ ａｂａｎｄｏｎｅｄ ａｌｔｏｇｅｔｈｅｒ ｏｗｉｎｇ ｔｏ ＨＣＶ—Ａｂ ｂｙ ＥＬＩＳＡ．ａｍｏｎｇ ｒｅｐｏｓｅｄ １ ６２ Ｕ ａｓ ｐｏｓｉｔｉｖｅ．ｒｅｐｏｒｔｅｄ １７８ Ｕ ａｓ ｓｕｓｐｅｃｔ．Ｔｈｅ ｒａｔｅ ａｓ ｓｕｓｐｅｃｔ ｗａｓ ５５．００％．Ｔｈｅ ａｃｃｕｒａｃｙ ｒａｔｅ ｏｆ ０５７４ Ｓ ｒｅｓｕｌｔ ｗａｓ ３５．５１％ｉｎ ｔｈｅ ｔｈｉｒｄ ｔｉｍｅ ｅｘｔｅｒｎａｌ ｑｕａｌｉｔｙ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｂａｎｋ ｉｎ ２００５．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ＨＣＶ—Ａｂ ｔｅｓｔ ｅｘｉｓｔｓ ｆａｌｓｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ａｎｄ ｆａｌｓｅ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｉｎ ｂｌｏｏｄ ｂａｎｋ．Ｔｅｓｔｅｒｓ ｓｈｏｕｌｄ ｒｅｄｕｃｅ ｗａｓｔｅ ａｎｄ ｉｎｓｕｒｅ ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｂｙ ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ｔｈｅ ｒｅａｇｅｎｔ ｑｕａｌｉｔｙ ａｎｄ ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｍｅｔｈｏｄ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ＨＣＶ—Ａｂ；ＥＬＩＳＡ；Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ；Ａｎａｌｙｓｉｓ 丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染严重危害人类的健康，我围人 群的流行率约为３％，其慢性化率高达８５％ｔ 。输血是传播丙 型肝炎的重要途径，国内报道７６％丙肝患者与输血有关 。目 ＨＣＶ阳性报废：仅一种试剂检测结果为阳性，经该试剂双孔 再检后检测结果仍为阳性的标本结果为不合格，按ＨＣＶ可疑 报废；两种检测试剂检测结果均处于灰区（７０％Ｃｕｔ ｏｆｆ＜ＯＤ＜ 前丙型肝炎的检测方法主要为ＥＬＩＳＡ检测ＨＣＶ总抗体。在 实际工作中．ＨＣＶ—Ａｂ ＥＬＩＳＡ检测存在着使用不同厂家试剂 测定结果不一致的情况，同时现有试剂也存在假阳性和假阴 性的情况 Ｃｕｔ ｏｆｆ）的标本结果为不合格，按ＨＣＶ可疑报废；一种检测试 剂检测结果处于灰区，经该试剂双孔再检后检测结果仍处于 灰区的标本结果为不合格，按ＨＣＶ可疑报废。２００９年ＨＣＶ 报废情况分析见表１，２００５年全国血站系统第３次室间质评 ＨＣＶ检测结果见表２。 ３讨论 现结合由卫生部临检中心组织的血站系统室间质评对 我站２００９年血液ＨＣＶ抗体检测结果进行分析。 １材料与方法 １．１标本 目前血站检测ＨＣＶ抗体的手段主要是采用ＥＬＩＳＡ方法 检测献血员血中的抗一ＨＣＶ抗体，广泛使用第三代抗一ＨＣＶ 诊断试剂。虽然第三代试剂增加了ＨＣＶ—ＮＳ５区表达的蛋白 作为抗原，提高了试剂敏感性，但在阳性检出率和特异性上 无偿献血者血液标本２４ ５６９单位（２００毫升为ｌ单位）。 １．２试剂 ＨＣＶ—ＥＬＩＳＡ试剂盒（厦门新创科技有限公司、珠海丽珠 仍略低于进口试剂ｌ３ ＿。由于ＨＣＶ抗原的组合、来源及用量等 方而的差异，也会造成临床使ｆＨ不同试剂生产厂家的ＥＬＩＳＡ 生物工程有限公司生产）。 １．３仪器 试剂盒的测定结果出现差异，造成假阳性和假阴性的结果１４］。 假阳性的结果将给血液资源造成极大的浪费。我站 ２００９年因ＨＣＶ总报废血液３６０ Ｕ，其中阳性报废１６２ Ｕ，可疑 报废１９８ Ｕ，可疑报废率高达５５．００％，造成了血液资源的的 严重浪费，其中２００９年１１月ＨＣＶ可疑报废甚至达到１００％。 对此我站从自身操作、试剂批号等方面进行了原因分析，未 发现异常。随后抽取了部分可疑报废血样寄往所用试剂厂家 进行检测，ＥＬＩＳＡ方法检测结果与我站检测结果一致，核酸 ＧＥＮＥＳＩＳ ＲＳＰ２００全自动样品加样仪（瑞士），ＦＡＭＥ全自 动酶标仪（瑞士）。 １．４方法 间接ＥＬＩＳＡ方法，严格按仪器和试剂盒要求操作，仪器 配套软件判定结果。 ２结果 两种试剂检测结果均阳性的标本结果为不合格，按 ７４巾国医药写掘ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ ２０１０年１０月第７卷第２８期 ・医学检验・ 表１ ２０Ｏｇ年ＨＣＶ报废情况分析【Ｕ Ｊ Ｔａｂ．１ Ｔｈｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｓｃｒａｐ ＨＣＶ ｉｎ ２ｏｏ９（ｕ） ＨＣＶ感染后到抗体转阳的窗口期平均为７０ ｄ，有的患者可 延长至６～９个月或更长，少数因免疫缺陷或免疫系统发育未 成熟而表现为阴性［７１。除ＨＣＶ感染的“窗口期”不能检测到抗 体外，另一个重要的原因就是试剂本身包被抗原的质量。 ２００５年全国血站系统第三次室间质评０５７４号标本我站的 ＨＣＶ检测结果：ＯＤ值０．１６，Ｃｕｔ ｏｆｆ值０．２３，上报结果为阴性。 但０５７４号标本是一个ＨＣＶ阳性的标本。表２数据显示：３６５ 个实验室中有２５０个上报了错误结果，准确率仅为３１．５ｌ％。 总结原因是因为０５７４号标本只含有Ｃ３３、Ｃ２２两个抗原，且 含量较低。这一结果反映出我国目前所使用的抗一ＨＣＶ诊断 试剂对弱阳性的标本极易发生漏检，原因可能为试剂所用包 被抗原成分相互之间抗原决定簇的覆盖，这种覆盖严重影响 ＥＬＩＳＡ测定的敏感性圈。 由于ＨＣＶ诊断试剂质量存在的一些问题及机体对 ＨＣＶ免疫应答的复杂性，这就要求我们在实际工作中必须 保证样本质量．设定合适的灰区，在试剂的选择上更要优中 表２ ２００５年全国血站系统第３次室间质评ＨＣＶ检测结果 Ｔａｂ．２ Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ＨＣＶ ｔｅｓｔ ｉｎ ｔｈｅ ｔｈｉｒｄ ｔｉｍｅ ｅｘｔｅｒｎａｌ ｑｕａｌｉｔｙ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｂａｎｋ ｉｎ ２００５ 选优，根据卫生部对试剂质量分析的结果选择理想的产品． 最好选择国产试剂与进口试剂组合进行检测或选择一种进 口试剂对可疑标本进行复检嗍。经济条件允许应积极改进实 验方法，开展ＨＣＶ核心抗原、ＨＣＶ—ＲＮＡ检测，减少血液浪 费，保证血液质量。 【参考文献】 ［１］姚海云，房桂清，韩雪莹．丙肝患者血清ＨＣＶ ＲＮＡ定量与抗一ＨＣＶ检 测效果分析『Ｊ］．中国输血杂志，２００８，２１（７）：５３５—５３６． ［２］赵建华，马孝英．银川地区献血者抗ＨＣＶ检测结果分析【Ｊ］．中国输血 杂志．２００７．２０（３）：２３３—２３４． ［３】李秀云，王秀珍．ＨＣＶ检测现状及新进展ｌＪ１．中外健康文摘，２００９，６（Ｉ８）： ２４８． 【４］王国华，张贺秋，李少波，等．丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的研制及 检测结果为阴性。所以，表１说明我们在实际工作中ＨＣＶ检 测的假阳性率非常高。分析可能的原因主要有以下两个方 面：一是血液样本中含有一些干扰物质，如类风湿因子 初步应用『Ｊ１．中国输血杂志，２００４，１７（５）：２９９—３００． ［５］李金明．临床酶免疫测定技术［Ｍ】．北京：人民军医出版社，２００５：１９７— ２０９． （ＲＦ）、高浓度的非特异ＩｇＧ。ＲＦ可与固相及酶标的ＩｇＧ结 合，造成假阳性结果。高浓度的非特异ＩｇＧ可吸附于固相表 面与酶标的ＩｇＧ结合，造成假阳性结果。二是用于试剂固相 包被的基因工程抗原不纯［５１。此外有研究表明标本中重度溶 ［６】张国平，王林，郭超群．标本溶血对抗ＨＣＶ检测结果的影响ｌＪ１．当代医 学．２００８．１４：４６—４７． ［７］杨秀华，黄山，邓小林，等．ＨＣＶ核心抗原检测技术的Ｉ艋床应用『ＪＩ．实用 医技杂志，２００８，１８：２３３４—２３３６． 血会使阴性标本的ＯＤ值升高，也可导致假阳性结果［６３ 假阴性的结果将给临床用血安全带来极大的危害。 ［８ｌ胡京辉，张磊，孙莉．抗一ＨＣＶ不同试剂检测结果分析『ＪＪ．军医进修学院 学报．２００９．３０（４）：４９８—４９９． （收稿日期：２０１０—０６—２３） 本刊医学检验栏目介绍 以报道临床医学实验诊断方法学为重点，主要报道检验医学领域中的最新科研成果、实用技术的新进展、各种检验的方 法与试剂、仪器的性能和特点等内容。须附３００字符以内的中英文摘要（采用结构式摘要：目的、方法、结果、结论）文中的图 ，序、图题、图注、表序、表题、表注须有中英文对照。英文表达要规范准确，符合医药英文学术论文表达习惯个。参考文献的引用数目应不低于８条，且近两年的文献应占６０％以上 。标引关键词３－８ 来稿请寄：北京市朝阳区通惠家园惠润园（壹线国际）５—３—６０１《中国医药导报》杂志社 邮政编码：１Ｏｏ０２５ 电 话：Ｏ１０－５９６７９０６１ 传 真：０１０＿５９６７９０５６ ＿ ４＊ Ｅ．们酬：ｙｙｚｘ９９＠１６３￣ｏｍ ＊ ＊ ＊＿ ＊＊ ＊＿自＊ ＊ ｔ ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ巾国医药弓报７５
