论 著・ 中国当代医药２０１５年９月第２２卷第２７期 抑制骨髓问充质干细胞成脂分化能力对骨质疏松 早期疗效的实验研究 周彪 安奇君 刘 强ｚ １．山西医科大学，太原０３０００１；２．山西医学科学院山西大医院骨科，太原０３００３２ 【摘要】目的探讨抑制骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣｓ）成脂分化能力对骨质疏松（ＯＰ）的早期疗效。方法选取雌性 ｓＤ大鼠４０只，采用背侧人路摘除卵巢法建立大鼠ＯＰ模型。随机分为４组：Ａ组（假手术组）、Ｂ组（模型组）、Ｃ组 （ＢＭＳＣｓ治疗组）、Ｄ组（ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ治疗组），每组１０只。造模后７ ｄ经尾静脉分别注射生理盐水、１０％胎 牛血清的ＬＧ－一ＤＭＥＭ培养液、ＢＭＳＣｓ、ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ，ＢＭＳＣｓ来自课题组从ｓＤ大鼠骨髓中提取并经过流式细 胞仪和诱导分化染色鉴定的ＢＭＳＣｓ，ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ来自课题组前一部分体外实验中使用腺病毒转染后的 ＢＭＳＣｓ。干预后．依照分组行骨密度（ＢＭＤ）、骨转换标志物检测。比较４组大鼠的骨转换标志物在ＯＰ早期骨形成 与骨吸收过程中的变化。结果Ｄ组的ＢＭＤ显著高于Ｂ、ｃ组（Ｐ＜０．０５），而与Ａ组差异无统计学意义（尸＞０．．０５）；Ｄ组 的Ｐ Ｉ ＮＰ高于Ｂ、Ｃ组（Ｐ＜０．０５），而与Ａ组差异无统计学意义（Ｊｐ＞０．０５）；Ｄ组的ｐ—ＣＴＸ低于Ｂ、Ｃ组（尸＜０．０５），而 与Ａ组差异无统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）。结论ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ可提高去势大鼠的ＢＭＤ，促进骨形成。 ｆ关键词】ＲＮＡ干预；骨髓间充质干细胞；骨质疏松；骨密度；Ｉ型前胶原氨基端前肽；ｐ—Ｉ型胶原羧基端肽 【中图分类号】Ｒ６８１ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１６７４－－－４７２１（２０１５）０９（ｃ）一００１４—０３ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｒｅｓｔｒａｉｎｉｎｇ ｆａｔ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍａｒ— ｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｆｏｒ ｅａｒｌｙ ｃｕｒａｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ ＺＨＯＵ Ｂｔ∞ｉ ＡＮ Ｑｉ－ｊｕｎｌ ＬＩＵ Ｑｉａｎｄ‘ １．Ｓｈａｎｘｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．，Ｔａｉｙｕａｎ ０３０００１，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｏｒｔｈｏｐｅｄｉｃ，Ｓｈａｎｘｉ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ．， Ｓｈａｎｘｉ Ｄａｙｉ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｔａｉｙｕａｎ ０３００３２，Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｅａｒｌｙ ｃｕｒａｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｒｅｓｔｒａｉｎｉｎｇ ｆａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅ＆一 ｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ（ＢＭＳＣｓ）＇ｉｎ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ（ＯＰ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ ４０ ｆｅｍａｌｅ ＳＤ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ．Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｔｉｃ ｏｆ ｒａｔｓ ｍｏｄｅｌ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ ｄｏｒｓａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ ｏｖａｒｙ ｒｅｍｏｖａｌ ｍｅｔｈｏｄ．Ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｆｏｕｒ ｇｒｏｕｐｓ：ｇｒｏｕｐ Ａ（＇ｓｈａｍ— ｏｐｅｒａｔｅｄ ｇｒｏｕｐ），ｒｏｕｐ Ｂ（ｇｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ），ｇｒｏｕｐ Ｃ（ＢＭＳＣｓ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐ）ａｎｄ ｇｒｏｕｐ Ｄ【＇ＲＮＡｉ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ＢＭＳＣｓ ｔｒｅａｔ— ｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐ）．Ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ ｈａｓ １０ ｒａｔｓ．Ａｆｔｅｒ ７ ｄａｙｓ ｍｏｌｄｅｌｉｎｇ．ｒａｔｓ ｉｎ ｆｏｕｒ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｓａｌｉｎｅ，ＬＧ—ＤＭＥＭ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ １０％ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ，ＢＭＳＣｓ ａｎｄ ＲＮＡｉ ｔｒａｎｓｆｅ，：ｃｔｉｏｎ ＢＭＳＣｓ．ＢＭＳＣｓ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ＳＤ ｒａｔ ｂｏｎｅ ｍａｒ— ｒｏｗ ｏｆ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ ａｎｄ ｉｎｄｕｃｅｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｄｙｅｉｎｇ．ＲＮＡｉ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ＢＭＳＣｓ ｗｅｒｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ ＢＭＳＣｓ ｏｆ ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｆｏｒｍｅｒ ｐａｒｔｓ ｏｆ／ｎ ｖｈｒｏ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｉｎ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｇｒｏｕｐ．Ａｆｔｅｒ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ， ｂｏｎｅ ｍｉｎｅｒａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ（ＢＭＤＪ１ ａｎｄ ｍａｒｋｅｒｓ ｏｆ ｂｏｎｅ ｔｕｒｎｏｖｅｒ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｇｒｏｕｐｉｎｇ．Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｂｏｎｅ ｔｕｒｎｏｖｅｒ ｍａｒｋｅｒｓ ｏｆ ｒａｔｓ ｉｎ ｂｏｎｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｒｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｅａｒｌｙ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ ｗａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ａｍｏｎｇ ｆｏｕｒ ｇｒｏｕｐｓ．Ｒｅ－ ｓｕｉｔｓ ＢＭＤ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｄ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｂ ａｎｄ Ｃ ．０５）Ｓｎｔ ｈａｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｇｒｏｕｐ Ａ（Ｐ＞０－０５）．ＰＩＮＰ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｄ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｂ ａｎｄ Ｃ（Ｐ＜０．０５），ｂｕｔ ｈａｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｇｒｏｕｐ Ａ（Ｐ＞０．０５）．［３－ＣＴＸ ｉｎ Ｄ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｂ ａｎｄ Ｃ（Ｐ＜０．０５），ｂｕｔ ｈａｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒ－ ｅｎｅｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｇｒｏｕｐ Ａ（尸＞０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＲＮＡｉ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ＢＭＳＣｓ ｃａｎ ｉｍｐｒｏｖｅ ＢＭＤ ｏｆ ｃａｓｔｒａｔｉｏｎ ｒａｔｓ ａｎｄ ｐｒｏ— ｍｏｔｅ ｂｏｎｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ；Ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｅｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ；Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ；Ｂｏｎｅ ｍｉｎｅｒａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ；Ｐｒｏｃｏｌｌａｇｅｎ ｔｙｐｅ Ｉ Ｎ－ｔｅｒｍｉｎａｌ ｐｒｏｐｅｐｔｉｄｅ；１３－一Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌ ｃｒｏｓｓ一－ｌｉｎｋｉｎｇ ｔｅｌｏｐａｐｔｉ￣ｏｆ ｔｙｐｅ Ｉ ｃｏｌｌａｇｅｎ 骨质疏松症（ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ．ＯＰ）是以低骨量和骨组 到２亿以上，占总人数的ｌ５％左右，在我国６０岁以上 织微细结构破坏为特征，导致骨脆性和骨折危险陛增 的老年人中约３０％患有ＯＷＪ，其不仅增加社会负担和 加的一种全身骨骼性疾’病【”。在我国。ＯＰ患者已经达 经济负担，而且降低生活质量甚至还可能导致残疾。 通讯作者 我们课题组在前期体外实验研究中发现，Ｅｖｉ ｌ基 瀚 ＣＨＩＮＡ ＭＯＤＥＲＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ Ｖｏ１．２２ Ｎｏ．２７ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２０１ ５ 中国当代医药２０１５年９月第２２卷第２７期 ・论 著・ 因在骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣｓ）向脂肪分化的过程 ０．０５），而与Ａ组差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），Ｄ组的 中起决定性作用，通过ＲＮＡ干扰技术抑制其表达，阻 Ｐ Ｉ ＮＰ显著高于ｃ组（Ｐ＜Ｏ．０５）；Ｄ、Ｃ组的ｐ—ｃＴｘ显著 断ＢＭＳＣｓ的脂肪分化过程，同时又促进ＢＭＳＣｓ的成 低于Ｂ￣Ｊｔ（Ｐ＜Ｏ．０５），而与Ａ组差异无统计学意义（尸＞ 骨分化。本实验以ＳＤ大鼠制备ＯＰ模型，观察Ｅｖｉｌ Ｏ．Ｏ５），Ｄ组的 —ＣＴｘ显著低于Ｃ组（火Ｏ．０５）（表１ ｏ 基因在动物体内是否存在同样的作用。 １材料与方法 表１ ４组股骨ＢＭＤ、Ｐ Ｉ ＮＰ、１３一ＣＴＸ的比较（ｉ±ｓ。ｎ＝４０） １．１实验动物与试剂 选取健康雌性ｓＤ大鼠４０只，体重为１８０～２５０ ｇ， 由北京军事医学科学院实验动物中心提供（批号： ＳＣＸＫ２００７—００４）。ＢＭＳＣｓ来自课题组从ＳＤ大鼠骨髓 中提取并经过流式细胞仪和诱导分化染色鉴定的 与Ｂ组比较，．Ｐ＜Ｏ．０５；与Ｃ组比较， Ｐ＜０．０５ ＢＭＳＣｓ．ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ来自课题组前一部分体外 实验中使用腺病毒转染后的ＢＭＳＣｓ。Ｉ型前胶原氨基 ３讨论 端前肽（ｐｒｏｃｏｌｌａｇｅｎ ｔｙｐｅ Ｉ Ｎ—ｔｅｒｍｉｎａｌ ｐｒｏｐｅｐｔｉｄｅ， 常用于ＯＰ的模型动物有大鼠、小鼠、犬、兔、羊、 Ｐ Ｉ ＮＰ）和１３一Ｉ型胶原羧基端肽（Ｂ—Ｃ—ｔｅｒｍｉｎａｌ ｃｒｏｓｓ— 灵长类动物等【３Ｊ。大鼠骨代谢与人有许多相似之处，随 ｌｉｎｋｉｎｇ ｔｅｌｏｐｅｐｔｉｄｅ ｏｆ ｔｙｐｅ Ｉ ｃｏｌｌａｇｅｎ．１３一ＣＴｘ）ＥＬＩＳＡ试 年龄增长出现骨量丢失，具有与人相似的骨松质分布 剂盒由上海科敏生物科技有限公司提供。 及重建功能，卵巢切除后出现较高的骨转化率并对性 １．２方法 激素有与人相似的反应性等 ，雌性大鼠去势导致的 １．２．１模型制备采用经典的卵巢去势法。以脊柱两侧 骨量丢失和人类绝经后ＯＰ有许多相似之处［５１。大鼠 为人路完整摘除双侧卵巢，结扎输卵管。 成为建立ＯＰ模型应用最广的动物。 １．２．２动物分组及处理将雌性ＳＤ大鼠随机分为４组： 目前利用双光能ｘ线吸收法（ｄｕａｌｅｎｅｒｇｙ Ｘ—ｒａｙ Ａ组（假手术组）、Ｂ组（模型组）、Ｃ组（ＢＭＳＣｓ治疗 ａｂｓｏｒｐｔｉｏｍｅｔｒｙ，ＤＸＡ）测量ＢＭＤ是诊断ＯＰ的重要手 组）、Ｄ组（ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ治疗组），每组１０只。假 段［６］。因此在本实验开始前已经对４组ＳＤ大鼠的双 手术组仅切除卵巢周围些许脂肪，未摘除卵巢；Ｂ、Ｃ、 侧股骨使用组织钳钝性分离其软组织，并在测量过程 Ｄ组大鼠均建立ＯＰ模型。在去势７ ｄ后，Ａ、Ｂ组经尾 中选了４组大鼠右侧股骨测量ＢＭＤ并记录其面积 静脉分别注射１ ｍｌ ＤＭＥＭ低糖培养液；Ｃ、Ｄ组分别 （ｃｍ２）、骨矿含量（ｇ），最大限度地减少主观因素所带 注射１ ｍｌ ＢＭＳＣｓ（１ｘｌＯ ）和ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ（１× 来的误差，以便分析其统计学意义。 １０ ）。尾静脉注射后２８ ｄ采获血液与大鼠双侧股骨 本实验结果显示，Ｄ、ｃ组的ＢＭＤ显著高于Ｂ组 标本。 （Ｐ＜０．０５），而与Ａ组差异无统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５），说 １．２．３骨密度（ｂ０ｎｅ ｍ１ ｎｅ ｒａ］ｄｅｎｓ１ ｔｙ，ＢＨＤ）澳４定 明ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ和ＢＭＳＣＳ能够避免大鼠去卵 使用ＸＲ一４６双能光子骨密度仪测定大鼠右侧股骨标 巢后发生骨量丢失现象，且未达到正常骨量。Ｄ组的 本的ＢＭＤ。 ＢＭＤ显著高于ｃ组（Ｐ＜０．０５）．提示ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ １．２．４骨转换生化标志物检测骨转换生化标志物包 更能减少股骨骨量丢失 括骨形成标志物（Ｐ Ｉ ＮＰ）和骨吸收标志物（Ｂ—ＣＴｘ）。 目前，Ｐ Ｉ ＮＰ和Ｂ—ＣＴｘ是常见的骨形成及骨吸 分别于干预后２８ ｄ．４组大鼠麻醉后，开腹暴露腹主 收标志物㈣，骨转换生化标志物检测中，Ｐ Ｉ ＮＰ是反 动脉。经腹主动脉采获血液标本．ＥＬＩＳＡ试剂盒检 映成骨细胞功能状态的直接或间接产物，是鉴定细胞 测Ｉ型前胶原氨基端前肽和Ｉ型胶原羧基端肽。 骨向分化的重要标志【９１。本实验中，Ｄ、ｃ组的Ｐ Ｉ ＮＰ １．３统计学分析 显著高于Ｂ组（Ｐ＜０．０５），而与Ａ组差异无统计学意义 数据采用ＳＰＳＳ １９．０统计软件进行分析，计量资料 （Ｐ＞０．０５），说明ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ和ＢＭＳＣｓ能够避 以Ｅ＋ｓ表示。组间比较采用单因素方差分析。以Ｐ＜ 免大鼠去卵巢后成骨细胞中大量的Ｉ型前胶原分泌 ０．０５为差异有统计学意义。 到细胞外，且未达到正常水平。Ｄ组的Ｐ Ｉ ＮＰ显著高 ２结果 于ｃ组（Ｐ＜０．０５），说明ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ可使大鼠去 Ｄ、ｃ组的ＢＭＤ显著高于Ｂ组（Ｐ＜０．０５），而与 卵巢后成骨细胞中大量的Ｉ型前胶原分泌到细胞外 Ａ组差异无统计学意义（尸＞Ｏ．０５）；Ｄ组的ＢＭＤ显著高 水平优于ＢＭＳＣｓ。Ｂ—ＣＴｘ是反映骨吸收过程中破骨细 于Ｃ组（／９＜０．０５）；Ｄ、Ｃ组的Ｐ Ｉ ＮＰ显著高于Ｂ组（Ｐ＜ 胞分泌的骨组织产物。本实验中，Ｄ、Ｃ组的Ｂ—ＣＴｘ ＣＨＩＮＡ ＭＯＤＥＲＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ Ｖｏ１．２２ Ｎｏ．２７ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２０１ ５鞠黛 ・论 著・ 中国当代医药２０１５年９月第２２卷第２７期 显著低于Ｂ组（Ｐ＜Ｏ．０５），而与Ａ组差异无统计学意义 展探讨［Ｊ］．无线互联科技，２０１４，（４）：２２４． ３】张萌萌．中国老年学学会骨质疏松委员会骨代谢生化指 （Ｐ＞Ｏ．０５），说明ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ和ＢＭＳＣｓ能够避 ［免大鼠去卵巢后骨吸收过程中骨胶原降解。且未达到 正常水平。Ｄ组的Ｂ—ｃＴｘ显著低于ｃ组（尸＜０．０５），说 中骨胶原降解低于ＢＭｓｃｓ嘲。 ＢＭＳＣｓ是在各种因素诱导下可以分化为成骨细 胞、脂肪细胞、神经元等。成骨细胞通过分泌骨基质作 标临床应用专家共识【Ｊ］．中国骨质疏松杂志，２０１４，２０（１ １）： １２６３—１２７２． ４］Ｐｅ６ｓ Ｐ，Ａｌｖａｒｅｚ Ｌ，Ｍｏｎｅｇａｌ Ａ，ｅｔ ０１．Ｂｉｏｃｈｅｍｉ ｃａｌｍａｒｋｅｒｓ 明ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ可使大鼠去卵巢后骨吸收过程 【ｏｆ ｂｏｎｅ ｔｕｒｎｏｖｅｒ ａｆｔｅｒ ｓｕｒｇｉｃａｌ ｍｅｎｏｐａｕｓｅ ａｎｄ ｈｏｒｍｏｎｅ ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ｂｏｎｅ，１９９９，２５（３）：３４９－３５３． ［５】Ｎａｋａｓａｔｏ ＹＲ，Ｊａｎｃｋｉｌａ ＡＪ，Ｈａｌｌｅｅｎ ＪＭ，ｅｔ ０１．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇ— ｎｉｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ ｆｆｏｒ ｔｙｐｅ－５ ｔａｒｔｒａｔｅ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ 用成骨，在矿物质代谢、血管再生、骨的再吸收过程中 ａｃｉｄ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ Ｃｈｅｍ，１９９９，４５（１２）：２１５０—２１５７． 有重要作用ｌ】０Ｊ。当ＢＭＳＣｓ的分化能力改变时可能会 ［６］刘晓建，王猛，刘杰，等．右侧股骨近端骨密度测量价值 导致疾病的发生［“］。ＯＰ中骨形成减少的病理核心是 的探讨［Ｊ１．中日友好医院学报，２０１４，２８（６）：３４７—３４９． 成骨细胞数量和功能下降 ，因此可以通过诱导干细 ［７】Ｌｉ Ｍ，ＩＪｉ Ｙ，Ｄｅｎｇ Ｗ，ｅｔ ０１．Ｃｈｉｎｅｓｅ ｂｏｎｅ ｔｕｒｎｏｖｅｒ ｍａｒｋｅｒ 胞向成骨细胞分化来增加成骨细胞的数量从而用于 ｓｔｕｄｙ：ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｒａｎｇｅｓ ｆｏｒ Ｃ—ｔｅｒｍｉｎａｌ ｔｅｌｏｐｅｐｔｉｄｅ ｏｆ ｔｙｐｅ ＯＰ的治疗。干细胞分化受到多种因素的影响，激素、 Ｉ ｃｏｌｌａｇｅｎ ａｎｄ ｐｒｏｃｏｌｌａｇｅｎ Ｉ Ｎ—ｔｅｒｍｉｎａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｂｙ ａｇｅ 细胞因子等都会影响其分化方向．促进其向成骨细胞 或异体干细胞移植．激素或细胞因子体外注射诱导体 ａｎｄ ｇｅｎｄｅｒ［Ｊ］．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，２０１４，９（８）：ｅ１０３８４１． ８］欧萌萌，黄建荣丝经后妇女骨贡疏松症患者血清中ｐ＿Ｃｒｏｓｓ． 分化【 。目前通过干细胞治疗ＯＰ的方法主要有自体 ［１ａｐｓ、Ｐ Ｉ ＮＰ和Ｎ—ＭＩＤ检测的评价 标记免疫分析与 临床，２０１１，１８（４）：２３８—２４０． 【９】Ｃｈａｃｈｒａ Ｄ，Ｌｅｅ ＪＭ，Ｋａｓｒａ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｏｖａｒｉｅｃｔｏｍｙ ｏｎ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ ｐｒｏｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｃｏｒｔｉｃａｌ ａｎｄ 内干细胞分化，体外物理作用诱导干细胞分化ｆ 。张 晖争・５】用Ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ载体构建了可以在间充质干细胞 内稳定表达针对过氧化物酶增殖体激活受体基因序 列的小干扰ＲＮＡ，将基因修饰的间充质干细胞注射 于骨质疏松的动物模型。目前，实验已经证实，通过干 细胞可以达到治疗ＯＰ的目的．由于其改变了骨代 ｃａｎｃｅｌｌｏｕｓ ｂｏｎｅｓ ｉｎ ｒａｔ ｆｅｍｏｒａ ａｎｄ ｖｅｒｔｅｂｒａｅ【Ｊ］．Ｂｉｏｍｅｄ Ｓｃｉ ｌｎｓｔｒｕｍ，２０００，３６：１２３—１２８． 【１０］Ｗ￣ａｎａｂｅ Ｋ，Ｉｋｅｄａ Ｋ．Ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｎｉｐｐｏｎ Ｒｉｎｓｈｏ，２００９，６７（５）：８７９—８８６． 谢．因此可以从根本上治疗ＯＰｔ ，期望通过ＲＮＡｉ转 ［１ １］Ｙａｍａｚａ Ｔ，Ｍｉｕｒａ Ｙ，Ｂｉ Ｙ，ｅｔ ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ 染ＢＭＳＣｓ后对骨质疏松过程促进骨转换过程促进成 骨，抑制成脂，在最大程度上提高ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ 骨质疏松形成过程中促进成骨带来更加确切的效 果。而实验的结果也表明了大鼠ＯＰ早期ＲＮＡｉ转 ｂａｓｅｄ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ ａｓ ａ ｎｅｗ ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｉｎ ｒｏｄｅｎｔｓ［Ｊ］．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，２００８，３（７）：ｅ２６１５． １２】Ｇｒｕｂｅｒ Ｒ．Ｃｅｌｌ ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｏｓｔｅｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ［Ｊ］．Ｗｉｅｎ Ｍｅｄ 的存活率与其他继发因素带来的连锁反应，可能会为 ［Ｗｏｃｈｅｎｓｃｈｒ，２０１０，１６０（１７－１８）：４３８—４４５． 【ｌ３］Ｊｕｓｔｅｓｅｎ Ｊ，Ｓｔｅｎｄｅｒｕｐ Ｋ，Ｋａｓｓｅｍ ＭＳ．Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｕｓｅ ｉｎ ｃｅｌｌ ａｎｄ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ 染ＢＭＳＣｓ可以促进成骨。通过以往的研究和实验结 果。相信随着分子生物学的发展，ＲＮＡｉ转染ＢＭＳＣｓ 会被越来越广泛地应用于ＯＰ治疗中，为ＯＰ治疗提供 新思路。 ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ａｇｉｎｇ ａｎｄ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｕｇｅｓｋｒ Ｌａｅｇｅｒ，２００ １， １６３（４０）：５４９１—５４９５． ［１４］贾懿劫，田京．干细胞治疗骨质疏松症的可能与可行ｆＪ】． 中国组织工程研究与临床康复，２０１２，１２（１）：１４８—１５２． 【参考文献】 ［１】王晓光，孙运德．骨质疏松药物治疗研究进展［Ｊ】．中国医 【ｌ５】张晖，程惊秋，黄强，等．瞬时干扰ＰＰＡＲ￣／基因促进酒 精诱导下人骨髓基质干细胞成骨分化的实验研究［Ｊ］． 中华医学杂志，２００８，８８（３７）：２６０３—２６０８． 药，２０１２，７（５）：６５２—６５４． 【２】郭劲宇，耿晨杰．骨质疏松症的流行病学趋势与防治进 （收稿日期：２０１５—０５—１５本文编辑：许俊琴） 簟麓ＣＨＩＮＡ ＭＯＤＥＲＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ Ｖｏ１．２２ Ｎｏ．２７ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２０１ ５
