项目编号：y2010
中医学院药学系毕业设计（论文）
开题报告书
课题名称
苦水玫瑰对小鼠心肌缺血的影响
专业年级 ______________ 中药学2010级
课题组人员： ____________ O ______________________ 指导教师： ___________ 黄世佐 起止时间： __________ 2014年3月一4月
中医学院药学系
二O—一年编制
一、课题基本情况
项目名称 苦水玫瑰对小鼠心肌缺血的影响 课题专 业性质 课题来源 A.中药学 B.中药制剂学 C.中药化学 D.中药药理学 E.中药炮制 学 F.中药鉴定学G.药用植物学 H.药用植物遗传育种 J.药用植物栽 培学K.药用植物组织培养学 L.其他 自选课题 性别 课题组 美君 成员基 本情况 乐雯卉 管仕川 其它经费资助 所学专业 无 女 女 女 男 性别 专业 中药学 中药学本科2010级 中药学本科2010级 中药学本科2010级 中药学本科2010级 所参加科研项目及名称 无 灵芝 导师组 成员基 黄世佐 男 本情况 起始时间 2014年3月一4月 教师评语： 二、本研究课题的意义及研究容 1. 意义： 心肌缺血是由于心脏的血液灌注减少，导致心脏的供氧减少，心肌能量代异 常，不能支持心脏正常工作的一种病理状态心肌缺血是心血管疾病中较为常见的表 现，临床中表现为不同的症状及相关证候特点，《经》中就早有记载，如《素问•脏气法 时论》、有“心病者，胸中痛，胁支满，胁下痛，膺背肩间痛，两臂痛。”《灵枢・厥病篇》 又有“真心痛，手足青至节，心痛甚，旦发夕死，夕发旦死”类似心肌梗塞的记载。⑵因 本病在临床上多见，且容易导致死亡，因此受到社会各界普遍关注，其发生率较高，在临 床上呈逐年增高的趋势，且本病的发生越来越年轻化，因而减少心血管事件的发生成为 治疗本病的最根本初衷。从近年来的文献资料来看，中药玫瑰在治疗该病方面玫瑰花在 抗肿瘤、抗病毒、治疗心血管疾病及保健、延缓衰老等方面发挥着越来越重要的作用， 本课题研究分析玫瑰在这方面的药理作用，为临床合理使用以及进一步对其深入研究 奠定了基础。 2. 容： 玫瑰花是蔷薇科植物玫瑰Rosa rugosa Thumb的干燥花蕾，性温，味甘、微苦， 具有行气解郁、和血、止痛等功效，主治用于肝胃气痛、食少呕恶、月经不调、跌扑 伤痛⑴，现主产于、、等地⑵。可成《食物本草》中记载：“主利肺脾，益肝胆，辟邪 恶之气，食之芳香甘美，令人神爽。”《本草纲目拾遗》中记载：“和血行血，理气……”。 《本草正义》中记载：“玫瑰花，香气最浓，清而不浊，和而不猛，柔肝醒胃，流气 活血，宣通窒滞而绝无辛温刚燥之弊。”在众多古籍的记载中，玫瑰花的功效可见一斑。 现代药理研究表明，玫瑰花的药理作用广泛，尤其是在心血管疾病、免疫炎症的治疗 与抗肿瘤、抗氧化以及利胆、解毒等方面有作用---,使得这一传统中药在临床上得 到更广泛的应用。玫瑰花中含有多种生理活性成分，其中所含挥发油被认为是其主要 活性成分。挥发油类化合物主要为芳樟醇、香茅醇、3-甲基己烷、4, 5—二甲基辛烷、 2-甲基庚烷等⑺，挥发油类化合物具有芳香开窍、活血行气、扩心血管、改善脏及外 周血液循环的作用。玫瑰花还含有黄酮、有机酸、软质等类化学成分，具有降血糖、 抗肿瘤、抗菌、抗氧化等作用。此外，还含有天冬氨酸、亮氨酸、丝氨酸、精氨酸等 17种氨基酸。⑷玫瑰精油具有多种药理作用，在本草纲目中已有记述：\"玫瑰花入肝，散 脓疡，行血活血”。玫瑰精油具有抑菌、抗氧化、抗敏感、保湿、促进细胞再生等功效; 对呼吸系统、消化系统、循环系统以及生殖系统方面都有较好的功效；在情绪方面具 有、减压、安眠、抗冲突、缓解紧和抗抑郁等作用。永登县是我国有名的“玫瑰 之乡”。该县盛产的苦水玫瑰(R. SetateXR. Rugosa)是中国［34561玫瑰和钝齿蔷薇的杂交种， 有着200多年的栽培历史，是省主要香料作物之一；年产精油约400kg,占全国玫瑰精 油总产量的80%左右；年出口量100kg-200kg。 本实验以永登县苦水玫瑰为研究对象，采用水蒸气蒸馆提取法提取精油，注射异 丙肾上腺素制造小鼠急性心肌缺血模型，研究玫瑰精油对小鼠心肌缺血的保护作用， 并探讨其作用机制和作用特点，为玫瑰精油相关制剂能合理应用于心脑血管系统疾病 提供理论依据。 参考文献： 1. 中华人药典委员会编.中华人药典2010年版(一部)[S].中国医药 科技，2010： 185. 2. 明，艳丽，莉，等.玫瑰花的生产情况调查[J].中医杂志,2005,10(3):196-199. 1. 秀兰，凌泽坤，志林，等.玫瑰舒心口服液治疗气滞血瘀型冠心病心绞痛的研究 [J].中西医结合杂志，1992, 12(7)： 414-415. 2. 少友.中医对冠心病的认识与辨证论治[J].中国现代医学杂志,2000,8(2)： 6& 3. 王世军，强，乐向东，等.中药药物香烟提取物对小鼠肠系膜微循环的影响[J].生 物医学工程，1994, 13(2)： 32-37. 4. 王军，乐向东，继强，等.玫瑰花总提取物对小置肠系膜微循环的影响[J].生物医 学工程,1997, 16(4)： 20-23. 5. 字晶，永新，康金国，等.玫瑰花、肉欢蓉对大鼠缺血心肌的保护作用[J].中医药, 1998,16(1)： 49-51. 6. 牛淑敏，朱颂华，巍，等.中药材玫瑰花抗氧化及作用机制的研究[J].南开大学学报, 2004, 37(2)： 29-33. 7. 鲁红，明，淑芬，等.玫瑰花药材中氨基酸及微量元素含量分析[J].中国当代医 药,2009,16(16):133-134. &明，艳丽，莉，等.不同品种玫瑰花挥发油化学成分的GC-MS分析[J].中成 药，2008,30(5)：104-108. 三. 培养目的和预期成果
1. 培养目的 观察玫瑰精油对小鼠心肌缺血的影响 本实验采用水蒸气蒸馆提取法提取精油，注射异丙肾上腺素制造小鼠急性心肌 缺血模型，研究其对心肌缺血的保护作用。 通过本实验的研究使得学生能设计试验方案，掌握整个试验过程，方法和流 程，熟练的运用各种实验仪器，培养学生思考问题和解决问题的能力，最后通过整理 和分析原始试验数据，撰写一篇合格的论文。 2. 预期成果 掌握一套技术，正交试验设计的应用；学习一种模式，即科学研究的一般思维和 方法；书写一篇论文，即专题研究报告。 四、拟采取的研究方法和技术路线
1. 药液的制备 (1)玫瑰精油的提取
a. 称取100 g玫瑰花瓣，置于研钵中捣碎，放入250 mL的圆底烧瓶中，用50毫 升蒸馆水分三
次刷洗研钵及研棒，并将洗液一并倒入圆底烧瓶中。
b. 按图1所示安装蒸馆装置
D
图1水蒸气蒸馆实验装置图
(A-水蒸气发生器；B-安全管；C-水蒸气导管；D-三口圆底烧瓶;
E-溜出液导管；F-冷凝管） c. 通人蒸汽前，应该先预热放好原料的圆底烧瓶至微沸通入蒸汽、收集镭出液。蒸 馆结束的标志是冷凝器中不再有油珠滴出为止，大约需1.5-2小时 d. 向收集瓶里乳白色的乳浊液中加入质量浓度为0. lg/ml的氯化钠溶液，使乳化液 分层。分液收集下层的玫瑰精油。向精油中加入少量无水硫酸钠，吸去水分，放置过 夜。 （2）玫瑰水煎液的制备 将提取完精油后的玫瑰药渣于干净药罐，药物按重量比加8倍量水浸泡0. 5h, 文火煎煮2次，第1次40min,第2次30min,合并两次水煎液,3500r/min离心15min, 倒出上清液，7（TC恒温水浴，浓缩药液，高压灭菌后49冰箱储存备用。 2. 受试物的制备 小鼠40只，雌雄各半，体重（22-25）g,按体重随机分为4组，10只/组，雌 雄各半。具体分组情况如下：正常组、模型组、玫瑰挥发油组、玫瑰水煎液组。每 10克体重的小鼠灌胃量为0. 2ml,正常对照组自由进食及饮水，模型组给予等容量 蒸馆水灌胃；玫瑰挥发油组按36. OOg/kg给药；每日1次，连续给药5天。 3. 检测项目 第5天末次给药后lh,正常组颈背部皮下注射生理盐水，模型组及药物组相同部 位注射盐酸异丙肾上腺素，给药量均为20mg/kg,连续注射3d,每天1次。末次注射2h 后，断颈取血，分离血清，用试剂盒测定LDH、CK活性。采血后迅速取出完整心脏， 在4。（2下匀浆，3500r/min离心提取上清液，用试剂盒测定SOD活性及MDA含量。 4. 数据处理 所有数据均表示为・x土s,采用SSPS17. 0软件，用两个样本的t检验对数 据进行统计分析，显著性标准为P<0. 05 P<0.01 o 5. 结果分析五、课题实施进度方案
第一阶段（3月9日-3月16 0）：专题生开会，安排工作任务，讲解研究思路和工作 注意事项，文献检索，起草实验方案。 第二阶段（3月17-25日）：修订实验方案，准备实验物资，预实验。 第三阶段（3月28日-4月5日）：正式实验研究开始，适时进行阶段小结。 第四阶段（4月6日-4月12 0）：实验总结，书写实验报告及论文。 六、经费来源及预算
经费支出预算 科目 实验动物（小鼠） 受试物（玫瑰花） 异丙肾上腺素（Iso） 其他 合计 单位：元
金额（元） 190 100 50 100 540 七、研究场所及所需设备
研究场所 中药化学实验室药理学实验室 主 要 设 水蒸气蒸馆提取器 分析天平离心机 HH-601型电热恒温水浴锅温度计 备 注射器 小鼠灌罔器 烧杯容量瓶等玻璃仪黠 八、系学术委员会审批意见
（公章） 年 月
