维普资讯 http://www.cqvip.com ’’卷笫朋。７一。版中国组织工程研究与临床康复笫ａ ｒｃｈＦ ｒｕａｒｙ＂．２１］．…０Ｕ／一Ｖ．Ｏ１．．＂，Ｎ｜ｉ＿ ．．Ｏ．ｂ一 Ｔｉｓｓ ｕｅＥｎｇｉｎ ｅｅｒｉｎｇ Ｒ ｅｓｅｅｂＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＲｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｖｅ—基础医学 关节软骨破坏与尿激酶型纤溶酶原激活物的影响 何斌－，史晨辉－，王永明 ，蒋新忠 ，孙建华’，石辉 ’Ｆｉｒｓｔ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｏｒｔｈｏｐｅｄｉｃｓ． Ｆｉｓｔ ｒＨｏｓｐｉｔａｌ Ａｆｎｌｉａｔｅｄ ｔｏ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｕｒｏｋｉｎａｓｅ－ｔｙｐｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｏｎ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｄａｍａｇｅ Ａｂｓｔｒａｃｔ ＡｎＩ：Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃ￣ｏｆ ｕｒｏｋｉｎａｓｅ—ｔｙｐｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ（ｕＰＡ）ｏｎ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｔｉｌａｇｅ． ＭＩＥＴＨｏＤＳ：Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｆｉｒｓｔ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ａ仟ｉｌｉａｔｅｄ ｔｏ Ｍｅｄｉａｌｃ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ ＭｅｄｉｃａＩ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｓｈｉｈｅｚｉ Ｕｎ￣ｅｒｓ ． Ｓｈｉｈｅｚｉ ８３２００８．Ｘｉｎ－ Ｊｌａｎｇ ＵＹｇｕｒ ＡＵ。 ｔｏｎｏｍｏｕｓ Ｒｅｇｉｏｎ． Ｃｈｉｎａ： ｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｓｕｒｇｅｒｙ．Ｔｈｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ０ｆ Ｎｉｎｔｈ Ｆａ丌１１ Ｄｉｖｉｓｉｏｎ Ｓｈｉｈｅｚｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｆｒ０ｍ Ｊｕｎｅ ２００４ ｔｏ Ｊｕｎｅ ２００６．Ｆ０ｒｔｖ－ｔｗｏ ｈｅａｌｔｈｙ Ｚｅｌａｎｉａｎ ｒａｂｂｉｔｓ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｎｄ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ（ｎ＝２４）ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏＩ ｇｒｏｕｐ（ｎ＝１ ８）．Ｒａｂｂｉｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ０．２ ｍＬ ０ｆ ｕＰＡ（２ ｍｇ／Ｌ）ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｒｉｇｈｔ ｋｎｅｅ ｊｏｉｎｔ，ｗｈｉｌｅ ｒａｂｂｉｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏＩ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｎｏｒｍａｌ ｓａｌｉｎｅ ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｄｏｓｅ． Ｒａｂｂｉｔ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ａｔ ４。８ ａｎｄ １ ２ ｗｅｅｋｓ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｆｏｒ ｈｉｓｔｏｌｏｇｉａｃｌ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ，ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ．Ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｗａｓ ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ—ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ． ＲＥＳＵＬＴＳ：Ａ ｔｏｔａ１ ０ｆ ４２ Ｚｅｌａｎｉａｎ ｒａｂｂｉｔｓ ｗｅｒｅ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒｅｓｕｌｔｓ． ＧｅｎｅｒａＩ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｂｂｉｔ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ａｃｒｔｉｌａｇｅ ｏｆ ｂｏｔｈ ｇｒｏｕｐｓ： Ａｓ ｔｈｅ ｔｉｍｅ ｐｒｏｌｏｎｇｉｎｇ，ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ａｇｇｒｅｇａｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ。ｗｈｉｌｅ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｃｒａｃｋ ｏｒ ｍｏｌｌｅｓｃｕｓｅ ｉｎ ｒａｂｂｉｔ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ａｃｒｔｉｌａｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．②Ｈｉｓｔｏｌｏｇｉａｃｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｃａｌｅ ｏｆ ｒａｂｂｉｔ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｉｎ ｂｏｔｈ ｇｒｏｕｐｓ ｕｎｄｅｒ ｌｉｇｈｔ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ：Ｔｈｅ ｓｕ ｒｆａｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｉｏｉｎｔ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ｓｈｏｗｅｄ ｄｅｆｅｃｔｓ，ｄａｍａｇｅｓ ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒａＩ ｂｒｅａｋａｇｅ。 ａｎｄ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｃｅｌＩ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ． Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ Ｉｏｗｅｒ ｈｅｔｅｒｏｐｈｉｌ ｏｆ ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ ｂｌｕｅ． ｃｏｌｌａｇｅｎ ｆｉｂｅｒ ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ ａｎｄ ｔｉｄａＩ Ｉｉｎｅ ｏｆ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｂｒｅａｋ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ．ｗｈｉｌｅ ４－ｌａｙｅｒ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ａｃｒｔｉｌａｇｅ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏＩ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｃｌｅａｒ ｔｏ ｓｅｅ，ａｎｄ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ａ￣ａｎｇｅｄ ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｗｉｔｈ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｔｉｄａＩｌｉｎｅ．（ Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｒａｂｂｉｔ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｏｆ ｂｏｔｈ ｇｒｏｕｐｓ： Ｔｈｅ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｃｅｌｌｓ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｓｈｏｗｅｄ ｐｙｋｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｗｅｒｅ ｉｎ ｉｒｒｅｇｕｌａｒ ｓｈａｐｅ， ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅｓ ｄｉｓａｐｐｅａｒｅｄ ｆｒ０ｍ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｗｉｔｈ ｉｎｃｏｍｐｌｅｔｅ ｎｕｃｌｅａｒ ｍｅｍｂｒａｎｅ．Ｔｈｅ ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ ｏｂ￣ｏｕｓｌｙ ｅ￣ｅｎｄｅｄ ａｎｄ ｃｅｌｌ ｏｒｇａｎｓ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ．Ｔｈｅ ｆａｔ ｄｒｏｐ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｓｅｅｎ ａｎｄ ｃｅｌＩ ｎｅｃｒｏｓｅｓ ａｓ ｗｅｌＩ ａｓ ｃｈｒｏｍｏｌｙｓｉｓ ｗｅｒｅ ｍｏｒｅ．ＯｖａＩ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｃｅｌｌｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｓｅｅｎ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏＩ ｇｒｏｕｐ ｗｉｔｈ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｃｅｌＩ ａｎｄ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｍｅｍｂｒａｎｅ． Ｅｖｅｎ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ Ｍｉｃｒｏｖｉｌｌｉ ｐｒｏｔｒｕｄｅｄ．ａｎｄ ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ａｂｕｎｄａｎｔ ｃｅｌＩ ｏｒｇａｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｙｔｏｐｌａｓｍ．Ｃｏｌｌａｇｅｎ ｆｉｂｅｒｓ ｗｅｒｅ ｏｒｄｅｒｌｙ ａｒｒａｎｇｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｍａｔｒｉｘ．（ Ｍａｎｋｉｎ’ｓ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｉｎ ｂｏｔｈ ｇｒｏｕｐｓ：Ｔｈｅ ｓｃｏｒｅｓ ａｔ ｔｈｅ ４ｍ．８ ａｎｄ １ ２ ｗｅｅｋｓ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．ｏ５）．（５）ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏｔｈ ｇｒｏｕｐｓ：Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｐｒｏｔｅｏｇｌｙｃａｎ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｄｉｄ ｎｏｔ ｓｉｇｎｉｉｆａｃｎｔｌｙ ｃｈａｎｇｅｄ，ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｏｇｌｙｃａｎ ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｔａｇｅ ｗｅｒｅ ｌｏｗｅｒ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｆＰ＜０．ｏ５）．１ｔ ｗａｓ ｌｏｗｅｒ ａｔ ｔｈｅ ４ｍ ｗｅｅｋ ｔｈａｎ ａｔ ｔｈｅ ８ｔｈ ｗｅｅｋ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０１），ａｎｄ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ，ｔｈｏｕｇｈ ｉｔ ｗａｓ Ｉｏｗｅｒ ａｔ ｔｈｅ １ ２ ｅｗｅｋ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ａｔ ｔｈｅ ８ ｗｅｅｋ，ｗｈｉｃｈ ｉｎｄｉａｃｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｔｏｔａＩ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ．ｂｕｔ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｇｒａｄｕａｌｌｙ ｄｉｍｉｎｉｓｈｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ ｏｆ ｔｉｍｅ． ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ：ｕＰＡ ｃａｎ ｄｅｇｒａｄｅ ｔｈｅ ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎ ｉｎ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｔｉｌａｇｅ． ａｎｄ ｔｈｅｎ Ｉｅａｄ ｔｏ ｔｈｅ ｄｅｓｔｍｃｔｉｏｎ ｉｎ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｔｉｌａｇｅ．ｕＰＡ ｍａｙ ｂｅ ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｔｉｌａｇｅ． Ｈｅ Ｂ，Ｓｈｉ ＣＨ，Ｗａｎｇ ＹＭ，Ｊｉａｎｇ ＸＺ，Ｓｕｎ ＪＨ，Ｓｈｉ Ｈ．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｕｒｏｋｉｎａｓｅ－ｔｙｐｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｏｆｔ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｄａｍａｇｅ Ｚｈｏｎｇｇｕｏ Ｚｕｚｈｉ Ｇｏｎｇｃｈｅｎｇ Ｙａｎｊｉｕ ｙｕ Ｌｉｎｃｈｕａｎｇ Ｋａｎｇｆｕ ２００７；１ １（６）：１００５－１００８（Ｃｈｉｎａ） ［ｗｗｗ．ｚｇＩｃｋｆ ７－６／６ｋ－１００５（ｐｓ）．ｐｄｆ］ 摘要 目的：观察尿激酶型纤溶酶原激活物对关节软骨的影响。 方法：实验于２０Ｏ４—０６『２００６—０６在石河子大学医学院第一附属医院中心实验室完成。实验选择健康新西兰大白兔４２只并随 机分为实验组２４只，对照组１８只；实验组在右膝关节内注射２ ｍｇ／Ｌ尿激酶型纤溶酶原激活物０｜２ ｍＬ，对照组注射等容量 的生理盐水；注射完成后在４，８，１２周分批取兔软骨进行组织学观察、电镜检查及葡糖氨基聚糖测定。关节软骨退行性变采用 组织一组化评分标准评定。 结果：４２只新西兰大白兔全部进入结果分析。 两组兔关节软骨大体观察结果：随着时间的延长，实验组关节软骨退行性变程 度加重；对照组兔关节软骨外观无裂纹及软化。②两组兔关节软骨光镜组织学检查及评分：实验组关节软骨表面不规则、缺损 及结构破坏，软骨细胞数目减少、纤维增生及异染性降低，潮线的完整性破坏；对照组关节软骨４层结构清晰可辨，软骨细胞排 列整齐，潮线完整。⑧两组兔关节软骨超微结构观察结果：透射电镜下实验组软骨细胞明显固缩且外形不规则，胞膜上突起消 失，核膜不完整，内质网扩张明显，细胞器数目减少，可见脂滴存在，细胞坏死、溶解多见；对照组可见软骨细胞呈椭圆形，细胞 及胞膜完整，表面可见均匀分布的微绒毛突起，胞浆内可见丰富细胞器，基质中胶原纤维排列整齐。（ 两组关节软骨退行性变 Ｍａｎｋｉｎ’ｓ评分结果：实验组４，８，１２周评分均高于对照组（Ｐ均＜０．０５）。（ 两组样品中葡糖氨基聚糖测定结果：对照组蛋白多 糖含量无明显变化，实验组在不同时期的葡糖氨基聚糖含量均低于对照组（Ｐ＜０．０５）；实验组８周时低于４周（Ｐ＜０．０１），１２ 周虽低于８周，但差异无显著性。表明在不同时期，葡糖氨基聚糖的总含量均减少，这些改变随时间的延长而渐不明显。 结论：尿激酶型纤溶酶原激活物能降解关节软骨蛋白多糖，进而导致关节软骨的破坏，尿激酶型纤溶酶原激活物可能是导致关 节软骨破坏的相关因素之一。 关键词：尿纤溶酶原激活物；软骨，关节；葡糖氨基聚糖类 何斌，史晨辉，王永明，蒋新忠，孙建华，石辉．关节软骨破坏与尿激酶型纤溶酶原激活物的影响【Ｊ】．中国组织工程研究与临床康复．２００７．１１（６） １００５－１００８ ［ｗｗｗ．ｚｇｌｃｋｆ．ｃｏｍｌｚｇｌｃｋｆｌｅｊｏｕｒｎａｌｌｕｐｆｉｌｅｓ／０７－６／６ｋ－１００５（ｐｓ）．ｐｄｔ］ 沈阳１２００邮政信箱１１０００４ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ ｃｏｒｎ ｗｗｗ．ｚｇｌｃｌｄ．ｃｏｒｎ １６６ Ｇｒｏｕｐ ｏｆ Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｐｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｎ－ ｓｔｒｕｃｔｏｉｎ Ｇｒｏｕｐ．Ｅｍｉｎ ８３４６１２．Ｘｉｎｘｉａｎｇ Ｕｙｇｕｒ Ａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ Ｒｅｇｉｏｎ．ＣｈＪｎａ Ｈｅ Ｂｉｎ★．Ｍａｓｔｅｒ．Ａｔ－ ｔｅｎｄｉｎｇ ｐｈｙｓｉｃｉａｎ． Ｆｉｓｒｔ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｏｒｔｈｏｐｅｄｉｃｓ． Ｆｉｒｓｔ ＨｏｓｐｉｔａＩ Ａ怖ｌｉａｔｅｄ ｔｏ ＭｅｄｉｃａＩ Ｃｏｌｌｇｅｅ ｏｆ Ｓｈｉｈｅｚｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ． Ｓｈｉｈｅｚｉ ８３２００８ Ｘｉｎ－ ｊｉａｎｇ Ｕｙｇｕｒ Ａｕ－ ｔｏｎｏｍｏｕｓ Ｒｅｇｉｏｎ． Ｃｈｉｎａ ｈｅｂｉｎｌ１Ｏ０＠ｙａｈｏｏ ｃｏＩＴＩ Ｃｎ Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ：Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｏｎ Ｐｒｏｊｅｃｔ Ｇｒａｎｔｄｅ ｂｙ Ｓｈｉｈｅｚｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．Ｎｏ ＺＲＫＸ２００４一Ｙ０３ Ｒｅｃｅｉｖｅｄ：２Ｏｏ６－０８－０３ Ａｃｃｅｐｔｅｄ：２００６￣９－３０ ’石河子大学医学院 第一附属医院骨一 科，维吾尔自治 区石河子市 ８３２０Ｏ８； 生产 建设兵团农九师 １６６团医院外科．新 疆维吾尔自治区额 敏县 ８３４６１２ 何斌★，男．１９７１ 年生，安徽省郎溪县 人，汉族．１９９６年石 河子大学医学院毕 业，硕士．主治医师． 主要从事关节外科 方面研究。 ｈｅｂｉｎｌ １００＠ｙａｈｏｏ ｏｃｍ ｃｎ 石河子大学自然科 学基金研究项目 （ｚＲＫｘ２０Ｏ４－Ｙ０３）’ 中图分类号：Ｒ３４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３－８２２５ ｆ２００７）０６－０１００５＿Ｏ４ 收稿日期：２００６－０８－０３ 修田日期：２００６－０９－３０ （０６—５０－８－５９３２／Ｗ・Ｘ） １ｏｏ５ 维普资讯 http://www.cqvip.com ＩＳＳＮ １６７３．８２２５ ＣＮ ２１－１５３９／Ｒ 何斌，等．关节软骨破坏与尿激酶型纤溶酶原激活物的影响¨¨ ２ ∞ｍ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ 梁题孝景 国内 外研究发现，尿 激酶型纤溶酶原 激活物在关节炎 患者的滑膜、软 骨等组织中有强 阳性表达，同时 血浆及滑液中尿 激酶型纤溶酶原 激活物含量均明 无裂纹及软化、有无骨赘形成以及滑膜反应。 ０引言 光镜检查：将动物处死后迅速切取实验侧股 骨内髁关节软骨，修成０．５ ｃｍｘＯ．５ ｃｍｘＯ．５ ｃｍ ｍｉｎ内置于４０ ｇ／Ｌ甲醛中 近年来研究发现尿激酶型纤溶酶原激活 大小组织块，于１物在骨关节炎和类风湿性关节患者的滑膜、软 固定，系列脱水，脱钙，常规石蜡包埋，切片行 骨等组织中有强阳性表达【 Ｉ，同时血浆中及滑 苏木精一伊红染色及甲苯胺蓝染色。在光镜下 液中尿激酶型纤溶酶原激活物含量均明显增 观察关节软骨结构，细胞数的变化，异染性及 显增高；在骨性 关节炎动物实验 中，软骨及滑膜中 的纤溶薄原和纤 溶酶原激活物活 性亦明显增高。 肌肉注射纤溶酶 原激活物的抑制 高 ０；研究还发现在骨性关节炎动物实验中， 潮线的完整性，采用双盲法对各标本进行组织 软骨及滑膜中的纤溶酶原和纤溶酶原激活物 学评分，关节软骨退行性变采用组织一组化评 ：①结构：０分：正常；１分：表面不规 活性明显增高，尤其是在滑膜中的浓度，肌肉 分标准Ｐｌ荆后，关节软骨 退行性变明显减 缓 这些充分说 明软骨及滑膜中 的纤溶酶原和纤 溶酶原激活物与 软骨基质的降解 密切相关。 注射纤溶酶原激活物的抑制剂后，关节软骨退 则；２分：血管翳和表面不规则；３分：到过渡带 行性变明显减缓［８１，这些充分说明软骨及滑膜 的裂隙；４分：到放射带的裂隙；５分：到钙化带 中的纤溶酶原和纤溶酶原激活物对软骨降解 的裂隙；６分：结构完全破坏。②细胞：０分：正 的作用。尿激酶型纤溶酶原激活物在炎性关节 常；１分：弥漫性细胞过多；２分：局部细胞过 疾病中与软骨基质的降解密切相关，但其导致 多；３分：细胞过少。⑧基质染色（异染性）：０ 关节软骨降解的直接证据及具体的作用机制 分：正常；１分：轻度减少；２分：中度减少；３ 有待进一步研究。本实验运用动物模型实验， 分：重度减少；４分：未着色。④潮线完整性：０ 旨在进一步探讨尿激酶型纤溶酶原激活物在 分：完整；１分：被血管破坏。总分１４分。 关节炎性疾患发病中的作用及二者的相关性。 电镜观察：将动物处死后迅速切取实验侧 股骨内髁关节软骨，修成１ ｍｍ×１ ｍｍｘ２ ｍｍ １材料和方法 小长条，投入４０ｇ／Ｌ戊二醛酸溶液中固定２４ ｈ， 用０．１ ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲液冲洗３次，再加１ ｇ／Ｌ 设计：完全随机分组设计。 锇酸固定９０ ｍｉｎ，去离子水冲洗３次，终止锇 单位：石河子大学医学院第一附属医院骨 酸反应，不同浓度丙酮逐级脱水，脱钙液脱钙 一科。 后以６１Ｇ环氧树脂浸透、包埋、硬化后修块半 材料：实验于２００４—０６／２００６—０６在石河 薄切片，定位后超薄切片，厚度为０．０５ ｍｍ，经 子大学医学院第一附属医院中心实验室完成。６ 电子染色后备电镜观察。 个月龄新西兰大白兔４２只，体质量２．５￣３ ｋｇ， 样品的测定：用稀碱水解和蛋白酶水解超 雌雄各半（由石河子大学动物实验中心提供， 速离心法提取关节软骨基质中的葡糖氨基聚 许可证号：ＳＣＸＫ（新）２００３－０００２）；尿激酶型纤 糖［１Ｏｌ：在股骨内髁取新鲜软骨，电子天秤称重； 溶酶原激活物（购自北京友谊中联生物科技有 阿利新蓝法测样品中的葡糖氨基聚糖总量【∞Ｉ： 限公司）；阿利新蓝试剂、硫酸软骨素购自晶美 最后定量换算成每毫克软骨湿重所含的样品 生物工程有限公司；胰蛋白酶、木瓜蛋白酶购 量，并进行统计学分析。 自华美生物工程有限公司；、甲醛、戊二 主要观察指标：①两组兔关节软骨大体观 醛、二甲苯、乙醇、伊红、苏木精、甲苯胺蓝、丙 察结果。②两组兔关节软骨光镜组织学检查及 酮、、三氯乙酸、冰乙酸等均为国产。 评分。⑧两组兔关节软骨超微结构观察结果。 设计、实施、评估者：为所有作者，均受过 ④两组关节软骨退行性变Ｍａｎｋｉｎ’Ｓ评分结 严格的培训。 果。⑤两组样品中葡糖氨基聚糖测定结果。 方法：选择健康新西兰大白兔４２只，雌雄 统计学分析：由第一作者采用ＳＰＳＳ １０．０ 各半，随机数字表法分为实验组２４只，对照组 统计软件处理，组间比较采用ｆ检验，组内比 １８只；实验组右膝关节内注射注射２ ｍｇ／Ｌ尿 较采用方差分析。 激酶型纤溶酶原激活物０．２ ｍＬ，对照组在右 膝关节内注射０．２ ｍＬ生理盐水，分笼饲养，分 ２结果 别于４，８，１２周处死动物，取股骨髁部软骨行 大体观察、光镜观察及葡糖氨基聚糖测定。 ２．１ 实验动物数量分析实验选用新西兰大 大体观察：观察各期关节软骨的色泽、有 白兔４２只，分为２组，全部进入结果分析。 Ｐ．０，Ｂｏｘ １２００．Ｓｈｅ￣ｙａｎｇ １１０００４ ｋ＇ｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ，Ｇｏｔｎ＇ ｗｗｗ．ｚｇｌｃｋｆ，Ｇｏ＇ｍ 维普资讯 http://www.cqvip.com １２１・１５３９／Ｒ ｓｓＮ １６７３・８２２５ ｃＮ ｗｗ￣．ｚｇｌｃｌｆ． ｃｏｍ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ，ｃｏｒｎ 何何斌，等．关节软骨破坏与尿激酶型纤溶酶原激活物的影响斌，等．关节软骨帔坏与尿教醣型针浴酶原 疗 里 ２．２ 两组兔关节软骨大体观察结果所有对 评分。经统计学处理，数据符合正态分布且方 照组兔关节软骨外观均呈蓝白色，色泽明亮， 差齐，组间比较用ｆ检验，组内比较用方差分 滑，呈白色，光泽稍减退；８周组软骨呈白色或 无裂纹及软化。实验４周组兔关节软骨表面光 析，见表１。创薪要点：拳裳 验将尿激酶型纤 溶酶原激活物注 射在选取的健康 新西兰大白兔膝 关节．同时对照 观察．比较正常兔 软骨与实验兔软 骨的变化情况， 初步探讨丝氨酸 蛋白酶系统在炎 性关节疾病中的 作用用途。希望 能根据这一理 淡黄色，色泽变暗淡，表面稍粗糙，局部菲薄， 滑膜存在不同程度增生、粘连，关节液量增多。 １２周组软骨表面粗糙，呈黄白色，滑膜组织增 生明显，局部可见软化灶。 ２．３ 两组兔关节软骨光镜组织学检查及评分 光镜下，正常关节软骨按Ｂｅｎｉｎｇｈｏｆｆ法分为４ ６ 两组样品中葡糖氨基聚糖测定结果 见 层：表层、移形层、辐射层和钙化层。对照组４， ２．论，在关节炎性 病变发生发展的 某一环节予以阻 断．为临床更好 地认识炎性关节 ８，１２周组：关节软骨４层结构清晰可辨，软骨 表２。 细胞分布均匀排列整齐，潮线完整（图１）。甲 苯胺蓝染色基质呈紫蓝色，染色均匀（图２）。 实验４周组关节软骨表面可呈波浪样起伏，欠 ｆ，周 组别ｎ—— Ｆ Ｐ 光滑，可见软骨细胞水肿、核固缩、退行性变、 ４ ８ １２ 排列紊乱，胶原纤维排列杂乱，潮线尚完整（图 实验组２４ ４６．６２±５．１０ ３５、８２±２．５７＇３１．９６±３．６Ｐ 对照组１８ ９５．３９±５－２１ ９２．１７±３．８３ ９２．４８－￣５．０９ ０、６ｏ８＞０．０５ ３），软骨细胞减少，基质染色不均，异染性轻度 减少（图４）。实验８周组关节软骨表层软骨变 薄，粗糙、部分区域呈绒毛状，表层可见浅裂隙 和纤维化改变，软骨细胞排列紊乱，可见退行 性变软骨细胞（图５），软骨细胞减少，异染性 轻、中度减少（图６）。实验１２周组关节软骨表 层软骨变薄、粗糙，胶原纤维增生明显，软骨细 研究表明尿激酶型纤溶酶原激活物在炎 胞明显减少（图７），软骨细胞水肿、固缩、坏死 性关节的滑液中含量较正常关节显著增高，并 可见，排列紊乱，４层结构不易分辨，潮线多不 且与病变程度呈正相关，因而其介导的细胞外 完整，基质染色重度减低或不染（图８）。 基质蛋白裂解作用与炎性关节疾病中关节软 ２．４两组兔关节软骨超微结构观察结果 对 骨和骨的破坏密切相关［１１，１２】，但尚缺乏直接的 照组４，８，１２周可见软骨细胞呈椭圆形，细胞 证据。国外Ｊｉｎ等［５．１３，１４】在健康大鼠关节内注射 及胞膜完整，表面可见均匀分布的微绒毛突 尿激酶型纤溶酶原激活物后，从血样中测得白 起，胞浆内可见丰富细胞器，染色质分布均匀， 细胞介素１ １３、肿瘤坏死因子Ｏｒ．及转化生长因 基质中胶原纤维排列整齐（图９）。实验组４周 子１３水平明显高于对照组，提示尿激酶型纤溶 时可见软骨细胞呈椭圆形，细胞及胞膜尚完 酶原激活物能刺激炎性细胞因子分泌并相互 整，表面分布的微绒毛突起基本消失，胞浆内 协同作用，参与滑膜组织炎性病变及软骨基质 细胞器数目减少，染色质欠均匀，基质中胶原 降解，是导致关节炎的重要病理因子。本试验 纤维排列紊乱，可见部分脂滴存在（图１０）。８ 在兔关节腔内注射尿激酶型纤溶酶原激活物， 周时细胞及胞膜尚完整，外形不规则，胞膜上 通过观察关节软骨退行性变的情况来探讨二 大部分突起消失，细胞周晕消失，细胞核固缩， 者之间的关系。 核膜尚完整，胞浆内细胞器数目明显减少，内 研究表明在尿激酶型纤溶酶原激活物的 季羹霉羹蔓 质网扩张明显，可见多量脂滴存在（图１１）。１２ 周时细胞及胞膜溶解消失，外形不规则，胞膜 作用下，纤溶酶原转化为纤溶酶，大量增加促 筝使软骨降解的金属蛋白酶的含量增高并能直 上突起消失，细胞核溶解，胞浆内细胞器破裂 接分解蛋白多糖聚体，进而导致关节软骨的 消失，基质中胶原纤维排列紊乱（图１２）。 降解［１５－１７】。在骨性关节炎中软骨及滑膜中的纤 董萎 未 望 ２．５ 两组关节软骨退行性变Ｍａｎｋｉｎ’Ｓ评分 溶酶原，纤溶酶原激活物活性明显升高，而且 萎 霆董差蓑荨 结果根据光镜下观察结果，按Ｍａｎｋｉｎ’Ｓ评 滑膜中的浓度是软骨的６０倍，肌肉注射 分标准，光镜下对各组关节软骨退行性变进行 Ｔｒａｎｅｘａｎｉｃａｃｉｄ（纤溶酶原激活物抑制剂）后关 沈阳１２００邮政信箱１１０００４ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ ｗｗｗ．ｚｇｌｄｄ．ｃｏｍ 疾病的损伤与修 复机制提供理论 依据。 同行洋 歧章从 繁善孝蓑曩丞釜 ’ 筹羞 织学结果提示尿 冀 蔓霉萋季 基质的降解提供 形 １００７ 维普资讯 http://www.cqvip.com ＩＳＳＮ １６７３・８２２５ ＣＮ ２１・１５３９／Ｒ 何斌，等关节软骨破坏与尿激酶型纤溶酶原激活物的影响 教授的热情指导，在此表示谢意。 ｗｗ￣．ｚｇｌｃＩ＃，ｃｏｒｎ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ 节软骨退行性变明显减缓，说明滑膜中纤溶酶原／纤 溶酶原激活物对软骨降解的重要作用【１引。本实验结果 表明实验组与对照组之间比较，随着时间的的延长，肉 眼观关节软骨破坏程度逐渐加重，光镜下观察关节软 骨退行性变程度也与时间成正相关，经统计学处理不 论４周组、８周组和１２周组，尸均＜０．０５，差异有显著 性，说明尿激酶型纤溶酶原激活物可使软骨发生退行 （图１～１２见插图６—１页） ４参考文献 １ 李茂强，史晨辉，李宽新，等．骨关节炎滑膜中ｕＰＡ、ｕＰＡＲ、ｔＰＡ的表达及意义 【Ｊ】．中国矫形外科杂志．２００４．１２（２１，２２）：１６８６—１６８９ ２ ＤｅＩ Ｒｏｓｓｏ Ａ。Ｃｉｎｅｌｌｉ Ｍ，Ｇｕｉｄｕｃｃｉ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｆｌａｚａｃｏｒｔ ｍｏｄｕｌａｔｅｓ ｔｈｅ ｉｆｂｎｎｏｌｙｔｉｃ ｐａｔｔｅｍ ａｎｄ ｒｅｄｕｃｅｓ ｕＰＡ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｃｈｅｍｉｏｉｎｖａｓｉｏｎ ａｎｄ 性变；同时实验组组间比较差异也有显著性（尸＜０．０５）， 说明随着时间的延长关节软骨退行性变的程度逐渐加 ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｓｙｎｏｖｉｏｃｙｔｅｓ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ（Ｏｘｆｏｒｄ） ２００５；４４（１０）：１２５５．１２６２ ３ ｚｈａｎ Ｊ．Ｇｕ ＺＹ，Ｗｕ Ｌ０，ｅｔ ａＩ．Ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｉｆｂｒｉｎｏｌｙｔｉｃ ｆａｃｔｏｒｓ 重；电镜下对照组软骨细胞基本正常，而实验组软骨细 胞则明显退行性变也证实了上述观点。 ４ 关节软骨基质中葡糖氨基聚糖主要包括硫酸软骨 素、硫酸角质素、透明质酸，硫酸软骨素、硫酸角质素含 ５ 量比和透明质酸的量以及其他功能基团对保证整个分 ６ 子发挥其生理功能非常重要，内部结构的改变将直接 影响到其功能。在综合因素作用的结果下，基质中的葡 糖氨基聚糖总量丢失，其内部结构也发生变化［１９，ｚ０］。研 ７ 究表明蛋白多糖含量的降低是关节软骨退行性变的最 早变化之一，在炎病理过程中，有多种机制参与葡糖氨 ８ 基聚糖的破坏过程。酶作用的结果是直接导致葡糖氨 基聚糖的降解，同时也激活一些细胞活性因子，这些小 ９ 分子蛋白通过复杂的网络调节，反过来直接或间接地 又促进葡糖氨基聚糖的降解 。本实验结果显示，对照 １０ １ １ 组不同时期葡糖氨基聚糖含量无明显变化，组织形态 学上也无明显变化；实验组在不同时期的葡糖氨基聚 １２ 糖含量均明显低于对照组，有显著差异性（Ｐ＜０．０５）， 说明尿激酶型纤溶酶原激活物能使葡糖氨基聚糖含量 １３ 下降，与上述观点一致。葡糖氨基聚糖合成减少可导致 软骨细胞变性、数目减少，而软骨细胞的减少又导致 １４ 葡糖氨基聚糖合成减少，最终导致关节软骨的退行性 １５ 变［２ｏ 】。本实验发现随着时间的延长，实验组关节软骨 变性越来越明显，到１２周时软骨变性更为显著，说明 １６ 尿激酶型纤溶酶原激活物能通过降解葡糖氨基聚糖和 １ ７ 软骨细胞变性造成葡糖氨基聚糖的合成减少，从而引 起关节软骨的退行性变。实验组葡糖氨基聚糖含量明 显降低，８周时最为明显，１２周组虽低于８周组，二者 １８ 之间却无显著差异性。可能是早期软骨基质中葡糖氨 １９ 基聚糖含量丰富，葡糖氨基聚糖降解后含量下降较快； 后期由于软骨细胞及葡糖氨基聚糖明显减少，基质胶 原纤维大量增生，葡糖氨基聚糖含量下降变化不明显。 ２０ 关节软骨的退行性变因素有多种，其中尿激酶型 ２１ 纤溶酶原激活物介导的细胞外基质蛋白裂解作用与炎 性关节疾病中关节软骨和骨的破坏密切相关，通过抑 制尿激酶型纤溶酶原激活物的合成及其活性来阻遏关 ２２ 节软骨的退行性变可能是一个有意义的途径。 致谢：本实验过程中得到了石河子大学医学院病理教研室胡文浩 １００８ ｕｒｏｋｉｎａｓｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ ａｎｄ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ．１ ｉｎ ｒａｂｂＲ ｔｅｍｐｏｒｏ－ｍａｎｄｉｂｕｌａｒ ｊｏｉｎｔ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｗｉｔｈ ｄｉｓｃ ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ． Ｃｈｉｎ Ｍｅｄ Ｊ ｆＥｎｇ１）２００５；１１８（１２）：１００Ｏ－１００６ 杨春花．黄烽．类风湿关节炎中尿激酶型纤溶酶原激活剂的作用机制及其临 床意义【Ｊ】．中华风湿病学杂志，１９９９，３（４）：７２・７４ Ｊｉｎ Ｔ，Ｔａｒｋｏｗｓｋｉ Ａ， Ｃａｒｍｅｌｉｅｔ Ｐ， ｅｔ ａ１． Ｕｒｏｋｉｎａｓｅ． ａ ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｆｌａｍｅｄ ｓｙｎｏｖｉａｌ ｌｆｕｉｄ．ｉｎｄｕｃｅｓ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．Ａｒｔｈｎｔｉｓ Ｒｅｓ Ｔｈｅｒ ２００３；５（１）：Ｒ９－Ｒ１７ Ｃｅｖｉｎｉｃ ＭＭ。 Ｇｅｎｅｄｎｉ Ｓ，Ｐａｄｓｃｈ Ｇ． ｅｔ ａ１． Ｓｙｎｏｖｉｏｃｙｔｅｓ ｆｒｏｍ ｏｓｔｅｏａｒｔｈｎｔｉｓ ａｎｄ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｐｒｏｄｕｃｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒｓ ａｎｄ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｉｎｈｉｂｉｔｏｄ ａｎｄ ｄｉｓｐｌａｙ ｕＰＡ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｏｎ ｔｈｅｉｒ ｓｕ＃ａｃｅ．Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ １９９８：６３：４４２－４５３ Ｒｏｎｄａｙ ＨＫ，Ｓｍｉｔｈ ＨＨ，Ｖａｎ Ｍｕｉｊｅｎ ＧＨ，ｅｔ ａ１．Ｄｉｆ『ｅｆｅｎｃｅ ｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ ｓｙｎｏｖｉａＩ ｔｉｓｓｕｅ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｄｈｄｔｉｓ ａｎｄ ｏｓｔｅｏａｄｈｒｉｔｉｓ． ＢＲ Ｊ ＲｈｅｕｍａｔｏＩ １９９６：３５： ４１Ｂ４２３ Ｐａｐ Ｇ，Ｅｂｅｒｈａｒｄｔ Ｒ，Ｒｏｃｋｅｎ Ｃ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｔｒｏｍｅｌｙｓｉｎ ａｎｄ ｕｒｏｋｉｎａｓｅ ｔｙｐｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｒｅｓｅｃｔｉｏｎ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ ａｎｄ ｂｉｏｐｓｉｅｓ ａｔ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｓｔａｇｅｓ ｏｆ ｏｓｔｅｏａｄｈｄｔｉｓ ｏｆ ｋｎｅｅ．ＰａｔｈｏＩ Ｒａｓ Ｐｒａｃｔ ２００ｏ：１ ９６：２１９－２２６ Ｍａｎｋｉｎ ＨＪ．Ｄｏｒｆｍａｎ Ｈ．Ｂ￣：＞ｃｈｅｍ１ａｃｌ ａｎｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ａｂｎｏｒｍａｌｉａｔｉｅｓ ｉｎ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｃａ ｒｔｉｌａｇｅ ｆｒｏｍ Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｃ ｈｕｍａｎ ｈｉｐｓ．Ｊ Ｂｏｎｅ Ｊｏｉｎｔ Ｓｕｒｇ １９７１：５３：５２３－５３７ 张唯杰．复合多糖生化研究技术【Ｍ１．上海：上海科学技术出版社．１９８７ Ｇｕｉｄｕｃｃｉ Ｓ，ＤｅＩ Ｒｏｓｓｏ Ａ， Ｃｉｎｅｌｌｉ Ｍ， ｅｔ ａ１． Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ｓｙｎｏｖｉａＩ ｉｆｂｒｏｂｌａｓｔｓ ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓ ｔｈｅ ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｔｉｃ ｐａｔｔｅｒｎ ｏｆ ｉｎｖａｓｉｖｅ ｔｕｍｏｒ－ｌｉｋｅ ｃｅｌｌｓ．ＣＩ．ｎ Ｅｘｐ ＲｈｅｕｍａｔｏＩ ２００５；２３（３）：３６４—３７２ Ｌａｖｉｇｎｅ Ｐ， Ｂｅｎｄｅｒｄｏｕｒ Ｍ，Ｌａｊｅｕｎｅｓｓｅ Ｄ。 ｅｔ ａ１． ＳｕｂｃｈｏｎｄｒａＩ ａｎｄ ｔｒａｂｅｃｕｌａｒ ｂｏｎｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｃａｎｉｎｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｋｎｅｅ ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ．Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｃａｒｔｉｌａｇｅ ２００５；１３（４）：３１０—３１７ Ｌｅｅ ＨＪ。Ｌｉｍ ＥＳ，Ａｈｎ ＫＳ，ｅｔ ａＩ．Ｃａｍｂｏｄｉａｎ Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ Ｉｉｎｔｅｕｓ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｅｘｐｅｄｍｅｎｔａＩ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ｍｅｌａｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｍｉｃｅ ｖｉａ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｕｒｏｋｉｎａｓｅ ｔｙｐｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ．ＢｉｏＩ Ｐｈａｒｍ ＢｕｌＩ ２００５；２８（１ １：２７－３１ ＤｅＩ ＲＯＳＳＯ Ｍ。 Ｆｉｂｂｉ Ｇ， Ｍａｔｕｃｃｉ Ｃｅｒｉｎｉｃ Ｍ．Ｔｈｅ ｕｒｏｋｉｎａｓｅ－ｔｙｐｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｓｙ ｓｔｅｍ ａｎｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｊｏｉｎｔ ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ ＲｈｅｕｍａｔｏＩ １９９９：１７：４８５４９８ Ｎａｋａｎｏ Ｓ，Ｉｋａｔａ Ｔ，Ｋｉｎｏｓｈｉｔａ ｌ。ｅｔ ａ１．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｌ：ｉｃｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｓｙｎｏｖｉａｌ ｆｌｕｉｄ ｆｒｏｍ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ ｏｓｔｅｏａｒｔｈｄｔｉｓ．ＣＩｉｎ Ｅｘｐ ＲｈｅｕｍａｔｏＩ １９９９：１７：１６１．１７０ Ｌａｊｅｕｎｅｓｓｅ Ｄ．Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｂｏｎｅ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｏｓｔｅｏａｒｔｈｄｔｉｓ． Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｎｔｉｓ Ｃａｄｉｌａｇｅ ２００４；１２ ＳｕｐｐＩ Ａ：Ｓ３４—３８ Ｆｕｊｉａｔ Ｙ，Ｈａｒａ Ｙ，Ｎｅｚｕ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ． ｍａｔｄｘ ｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－３ ａｃｔｉｖｉｔｙ， ａｎｄ ｓｕｌｆａｔｅｄ ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎ ｏｃｎｔｅｎｔ ｉｎ ｓｙｎｏｖｉａｌ ｆｌｕｉｄ ｏｆ ｄｏｇｓ ｗｉｔｈ ｎａｔｕｒａｌｌｙ ａｃｑｕｉｒｅｄ ｃｒａｎｉａＩ ｃｒｕｃｉａｔｅ ｌｉｇａｍｅｎｔ ｒｕｐｔｕｒｅ．Ｖｅｔ Ｓｕｒｇ ２００６；３５（４）：３６９－３７６ Ｐｅｌｌｅｔｉｅｒ ＪＰ． Ｉｍｂａｎｌａｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｅａｄｙ Ｉｅａｓｉｏｎｓ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａＩ ｏｓｔｅｏａｒｔｈｄｔｉｓ．Ａｒｔｈｎｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ １９９０：３３：３６４—３６７ Ｄｅｃｈａｎｔ ＪＥ， Ｂａｘｔｅｒ ＧＭ， Ｆｎｓｂｉｅ ＤＤ． ｅｔ ａ１ ．Ｅｆｉｅｃｔｓ ｏｆ ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｔｏｎｄｅ ａｎｄ ｃｈｏｎｄｒｏｉｔｉｎ ｓｕｌｐｈａｔｅ， ａｌｏｎｅ ａｎｄ ｉｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ。 ｏｎ ｎｏｒｍａＩ ａｎｄ ｉｎｔｅｄｅｕｋｉｎ一１ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ ｅｑｕｉｎｅ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｅｘｐｌａｎｔ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．Ｅｑｕｉｎｅ Ｖｅｔ Ｊ ２００５；３７ｆ３）：２２７－２３１ Ｂａｔｈｅ Ｍ， Ｒｕｔｌｄｅｇｅ ＧＣ， Ｇｒｏｄｚｉｎｓｋｙ ＡＪ， ｅｔ ａ１． Ａ ｃｏａｒｓｅ．ｇｒａｉｎｅｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｏｄｅＩ ｆｏｒ ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎｓ： ａｐｐｌｉａｃｔｉｏｎ ｔｏ ｃｈｏｎｄｒｏｉｔｉｎ． ｃｈｏｎｄｒｏｉｔｉｎ ｓｕｌｆａｔｅ，ａｎｄ ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ．Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｊ ２００５；８８（６）：３８７０－３８８７ Ｔ￣ｉｍａ Ｔ，Ｙｏｓｈｉｄａ Ｅ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ａ．ｅｔ ａｌ Ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍａｔｉｒｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ。ＭＭＰ－２ ａｎｄ ＭＭＰ一９ ｂｙ ｓｙｎｏｖｉａＩ ｅｃｌｌｓ：ａ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｃａｕｓｅ ｏｆ ｊｏｉｎｔ ｄａｍａｇｅ ａｆｔｅｒ ｉｎｔｒａ—ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｈｅｍｏ￣ｈａｇｅ Ｊ ０ｄｈｏｐ Ｒｅｓ ２００５：２３（４）：８９１—８１８ Ｌｉ Ｊ，Ｎｙ Ａ，Ｌｅｏｎａｒｄｓｓｏｎ Ｇ。ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ／ｐｌａｓｍｉｎ ｓｙｓｔｅｍ ｉｓ ｅｓｓｅｎｔｉａＩ ｆｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｊｏｉｎｔ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｐｈａｓｅ ｏｆ ｏｃｌｌａｇｅｎ ｔｙｐｅ ＩＩ－ｉｎｄｕｃｅｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．Ａｍ Ｊ ＰａｔｈｏＩ ２００５；１６６（３）：７８３—７９２ Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ １２００，Ｓｈｅｎｙａｎｇ １１０００４ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ，ｃｏｍ ｗｗｗ，ｚｇｌｃｋｆ，ｃｏｍ 维普资讯 http://www.cqvip.com
