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α–淀粉酶制剂活力测定方法

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在进行α-淀粉酶活力测定的过程中,首先需要准备标准管作为颜色对比基准。具体操作为,在比色试管中加入1ml标准糊精溶液和3ml标准稀碘液,充分混匀后,即可作为颜色对比的标准管。

接下来,在25mm×250mm的试管中,需加入2%可溶性淀粉溶液20ml,并且加入5mlpH6.0磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液。随后,将试管置于60℃水浴中平衡约5分钟。之后,加入预先用缓冲液稀释好的酶液0.5ml,并立即开始计时,同时充分混匀。

在反应过程中,每隔1分钟取出1ml反应液,加入预先准备的3ml比色稀碘液试管中。重复上述步骤,直到试管中的颜色与标准管颜色一致,即为反应终点。需要注意的是,整个反应应在3分钟内达到终点,若反应时间超出范围,则需重新调节样品或酶的稀释度。

最后,根据公式计算α-淀粉酶活力:酶活力单位(g/ml)=(60/T×20×2%×N)÷0.5。其中,60代表酶活定义中反应时间为60分钟;T为反应时间(分钟);20为可溶性淀粉的毫升数;2%为可溶性淀粉浓度;N为酶液稀释倍数;0.5为测定时所用酶液量(毫升)。

通过上述步骤,可以准确测定α-淀粉酶的活力,从而为后续研究提供可靠的数据支持。

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