动物医学进展，２０１３，３４（１０）：５４—５８ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 斜茎黄芪生物碱成分ＧＣ—ＭＳ分析 温伟利 ，赵宝玉 ，路 浩 ，达能太。，周启武 （１．西北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌７１２１００；２．内蒙古阿拉善左旗兽医工作站，内蒙古阿拉善７５０３００） 摘 要：采用生物碱系统提取、薄层色谱和ＧＣ＿ＭＳ分析技术，研究斜茎黄芪生物碱成分。结果表明， ４．５ ｋｇ斜茎黄芪得到酸性和碱性氯仿部分生物碱分别为５．４ ｇ和３．６ ｇ，提取率为１．３ 和０．８ ；薄层色谱 分析，酸性和碱性氯仿部分生物碱分别在氯仿：甲醇一１５：１（Ｖ：Ｖ）和甲醇：氨水一１０：１（Ｖ：Ｖ）展开体 系展开效果最佳，均呈现５个显色斑点；ＧＣ—ＭＳ分析，酸性和碱性氯仿部分各鉴定出７种生物碱，酸性氯仿 部分以别隐品碱（３４．８４ ）、原阿片碱（３１．３６ ）和坎那定（２１．４６ ）含量较高，碱性氯仿部分以别隐品碱 （７１．７４ ）、Ｏｘｙｈｙｄｒｏｓｔｉｎｉｎｅ（７．４５ ）和坎那定（５．３５ ）含量较高。斜茎黄芪含有生物碱，且以别隐品碱、 原阿片碱、坎那定碱和Ｏｘｙｈｙｄｒｏｓｔｉｎｉｎｅ为主。 关键词：斜茎黄芪；生物碱；气相色谱一质谱 中图分类号：￥８５３．７２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００７—５０３８（２０１３）１０－００５４－０５ 斜茎黄芪（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄｓｕｒｇｅｎｓ Ｐａｌ１）为豆科 （Ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｅ）黄芪属（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ）多年生草本植 物，别名直立黄芪、沙打旺＿】］。生于山坡、草地、灌 芪化学成分研究、毒理学研究及其综合利用提供基 础资料。 １材料与方法 １．１ 材料 丛、沟渠边、田边、林缘及低洼盐碱地，我国西北、东 北、华北及河南、四川、云南等省区均有广泛分布。 斜茎黄芪属中旱生植物，有野生型和改良型两种，改 良型因根系发达，抗旱、抗盐、抗寒、抗风沙、耐贫瘠 １．１．１ 植物样品 斜茎黄芪地上部分全草，２０１１ 年８月采集于内蒙古阿拉善左旗（Ｎ ３８。４９．８１３，Ｅ １０５。４２．等特性，是目前干旱地区普遍推广的防风固沙和水 土保持植物。多年来，由于干旱少雨、草原超载、过 度采挖和开垦等自然和人为因素的影响，导致草原 退化，使一些地区的野生型斜茎黄芪大量生长和蔓 延，并形成优势种群，竞争性抑制其他植物的生长。 如内蒙古锡林郭勒盟、乌兰察布盟和伊克昭盟等天 然草原野生型斜茎黄芪覆盖率已高达７０ ～８Ｏ ， 动物采食后引起中毒，严重地影响当地牧民的生产 ０１１），正值盛花期，晾干，粉碎后送西北农林 科技大学置阴凉处保存备用。植物标本由西北农林 科技大学生命科学学院常朝阳教授鉴定。 １．１．２ 主要仪器与试剂 ＧＣ６８９Ｏ—ＭＳ ５９７３ （ＮＩＳＴ２．０标准谱库），美国安捷伦公司产品；ＲＥ一 ５２ＡＡ旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂产品；循环 水式多用真空泵，郑州长城工贸有限公司产品；碘化 铋钾、碘化碘钾、硅钨酸、苦味酸，临用时配制；薄层 层析硅胶ＧＦ２５４，青岛海洋化工有限公司产品；其他 和生活。此外，中国中药典记载，斜茎黄芪种子可入 药，具有益。肾固精、补肝明目功效，主治肝肾不足、腰 膝酸软、头昏目眩、遗尿、尿频等病症。 有机试剂均为国产分析纯。 １．２ 方法 生物碱是一类主要存在于植物体的含氮有机化 合物，是植物次生代谢产物，多数具有显著的生理活 性和毒性，大量研究表明，生物碱是许多有毒植物引 起动物中毒的毒性物质＿２ ］。截止目前，国内尚未见 斜茎黄芪生物碱成分及其毒性评价方面的研究报 道，本试验通过对斜茎黄芪生物碱成分分析，旨在了 解斜茎黄芪所含生物碱成分的种类，以期为斜茎黄 １．２．１斜茎黄芪生物碱预试验 采用斐月湖主编 的《天然药物化学试验》介绍的方法进行。准确称取 斜茎黄芪粉末５ ｇ，加水１００ ｍＬ，室温下浸泡过夜并 过滤。滤液加入适量１ ｍｏｌ／Ｌ盐酸，调节ｐＨ呈酸 性，取适量酸性滤液于４支洁净试管中，分别滴加生 物碱沉淀试剂碘化铋钾、碘化碘钾、硅钨酸、苦味酸 进行生物碱沉淀反应，观察并记录生物碱沉淀反应 收稿日期：２０１３—０３－２５ 基金项目：国家“十二五”公益性行业（农业）科研专项（２０１２０３０６２） 作者简介：温伟利（１９８４一），男，河南封丘人，硕士研究生，主要从事动物中毒性与营养代谢性疾病研究。＊通讯作者 温伟利等：斜茎黄芪生物碱成分ＧＣ－ＭＳ分析 ５５ 现象 ｊ。 １．２．２斜茎黄芪生物碱提取称取斜茎黄芪粉末 比１：１，载气为氦气１ ｍＬ／ｍｉｎ，进样口温度３００℃， 传输温度２８０℃。ＭＳ：ＥＩ离子源，温度２３０℃，电子 轰击能量７Ｏ ｅＶ。质量分析器四级杆，温度１５０℃， 扫描方式ｓｃａｎ，扫描质量范围３３ ａｍｕ～５００ ａｉｎｕ。 １．２．４．２样品处理与进样分别取少量斜茎黄芪 酸性氯仿部分和碱性氯仿部分，用分析纯甲醇充分 溶解，经０．２２ ｍ滤器过滤，除去不溶性物质，所得 滤液用微量进样器准确吸取１ Ｌ进样。 ４．５ ｋｇ，分批置于５００ ｍＬ圆底烧瓶中，工业酒精热 回流提取５次，每次４ ｈ，收集提取液并减压浓缩，得 到总浸膏。然后总浸膏用１ ｍｏｌ／Ｌ盐酸研溶，静置 过夜，收集酸水液。酸水液先用氯仿萃取数次，合并 萃取液，减压浓缩得到酸性氯仿部分，随后将酸水液 用氢氧化钠调节ｐＨ至９～１１后，再用氯仿萃取至 无色，合并萃取液，减压浓缩得到碱性氯仿部分。 部分和碱性氯仿部分少许，乙醇或甲醇溶解，用毛细 管点样于自制ＧＦ２５４薄层硅胶板，置薄层展开缸 １．２．４．３ 化合物鉴定与相对含量确定 将样品化 １．２．３ 薄层色谱分析 分别取斜茎黄芪酸性氯仿 合物的ＧＣ—ＭＳ图谱数据经ＮＩＳＴ２．０标准谱库计算 机检索，依据被检测化合物与标准谱库化合物之间 匹配度的大小进行鉴定，采用峰面积归一化法计算 化合物相对含量。 中，上行法展开，待展开剂扩散到距薄层板上缘０．５ ｃｍ处取出，挥干展开剂。先在２５４ ＤＩＤ．紫外光下观 察有无荧光，然后用改良碘化铋钾显色，记录各斑点 ２ 结果 ２．１ 斜茎黄芪生物碱预试验结果 颜色并计算Ｒｆ值。 １．２．４ ＧＣ－ＭＳ分析 结果见表１。由表１可见斜茎黄芪酸水液加入 生物碱沉淀试剂，有明显的沉淀产生，沉淀物颜色分 别为橘红色、砖红色、灰白色和黄色。沉淀反应阳 性，说明斜茎黄芪地上部分含生物碱成分。 １．２．４．１ ＧＣ—ＭＳ条件 ＧＣ：ＨＰ一５３０ｍ×０．２５ｒａｍ ×０．５ ｍ，柱箱程序升温，１００℃保温２ ｍｉｎ，５ 。Ｃ／ｒａｉｎ升温至２９０℃，保持２０ ｒａｉｎ。进样１ Ｌ，分流 表１ 斜茎黄芪地上部分生物碱沉淀反应结果 Ｔａｂｌｅ １ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ａｌｋａｌｏｉｄ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ａｅｒｉａｌ ｐａｒｔ ｏｆ Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄｓｕｒｇｅｎｓ 往：“十”表不沉捉反应为阳性。 Ｎｏｔｅ：“＋”ｍｅａｎｓ ｐｏｓｉｔｉｖｅ． ２．２斜茎黄芪生物碱提取结果 ５种不同展开体系对斜茎黄芪酸性氯仿部分生物碱 进行展开，２５４ ｉＲｍ紫外光下观察发现，荧光颜色较 深，呈条带状，斑点分离程度较差。但经改良碘化铋 ４．５ ｋｇ斜茎黄芪地上部分干草粉经工业酒精 热回流提取制得总浸膏４１０ ｇ，出膏率为９．１％。总 浸膏经酸化、碱化处理后用氯仿萃取，得到酸性氯仿 部分生物碱５．４ ｇ，碱性氯仿部分生物碱３．６ ｇ，提取 率分别为１．３ 和０．８ 。 ２．３ 斜茎黄芪生物碱薄层分析结果 钾显色后，５种展开体系均能得到部分显色斑点，斑 点分离度较好（表２）。由表２可见，酸性氯仿部分 生物碱在氯仿：甲醇＝１５：１（Ｖ：Ｖ）展开体系下 展开效果最佳，显现５个显色斑点。 ２．３．１ 酸性氯仿部分生物碱薄层分析结果 选用 表２斜茎黄芪酸性氯仿部分生物碱薄层色谱分析结果 Ｔａｂｌｅ ２ ＴＬＣ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ａｌｋａｌｏｉｄ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ａｃｉｄｉｔｙ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ｏｆ Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄｓｕｒｇｅｎｓ 展开体系 Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｓｙｓｔｅｍ Ｒｆ及斑点颜色 Ｒｆ ｖａｌｕｅ ａｎｄ ｂｌｏｔｃｈ ｃｏｌｏｕｒａｔｉｏｎ 氯仿：氨水一３０：１（Ｖ：Ｖ）Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ：Ａｍｍｏｎｉａ＝３０：１（Ｖ：ｖ） 乙酸乙酯：甲醇（Ｖ：Ｖ）一１：１ Ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ：Ｍｅｔｈａｎｏｌ一１：１（Ｖ：Ｖ） 氯仿：甲醇＝４：１（Ｖ：Ｖ）Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ；Ｍｅｔｈａｎｏｌ＝４：１（Ｖ：ｖ） 氯仿：甲醇＝１５：１（Ｖ：Ｖ）Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ：Ｍｅｔｈａｎｏｌ＝１５：１（ｖ：Ｖ） 氯仿：甲醇＝１０：１（Ｖ：Ｖ）Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ：Ｍｅｔｈａｎｏｌ一１０：１（Ｖ：ｖ） 注：Ａ．淡红色；Ｂ．橙色；Ｃ．黄色。 Ｎｏｔｅ：Ａ．Ｌｉｇｈｔ ｒｅｄ；Ｂ．Ｏｒａｎｇｅ；Ｃ．Ｙｅｌｌｏｗ ５６ 动物医学进展２０１３年第３４卷第１Ｏ期（总第２４４期） ２．３．２碱性氯仿部分生物碱薄层分析结果 选用 ４种不同展开体系对斜茎黄芪碱性氯仿部分生物碱 进行展开，２５４ ｎｍ紫外光下观察发现，荧光显色斑 得到显色斑点，斑点分离度和斑点数量多于酸性氯 仿部分生物碱（表３）。由表３可见，甲醇：氨水一 １０：１（Ｖ：Ｖ）展开体系最好，出现５个橙色显色斑 点。 点较酸性氯仿部分生物碱好，斑点分离程度有所提 高。但经改良碘化铋钾显色后，４种展开体系均能 表３斜茎黄芪碱性氯仿部分生物碱薄层色谱分析结果 Ｔａｂｌｅ ３ ＴＬＣ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ａｌｋａｌｏｉｄ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ａｌｋａｌｉｎｅ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ｏｆ Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄｓｕｒｇｅｎｓ 展开体系 Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｓｙｓｔｅｍ Ｒ｛及斑点颜色 Ｒｆ ｖａｌｕｅ ａｎｄ ｂｌｏｔｃｈ ｃｏｌｏｕｒａｔｉｏｎ 乙酸乙酯：氨水＝４０：１（Ｖ：Ｖ）Ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ：Ａｍｍｏｎｉａ＝４０：１（Ｖ：Ｖ） 氯仿：甲醇一８：１（Ｖ：Ｖ）Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ：Ｍｅｔｈａｎｏｌ一８：１（Ｖ：Ｖ） 甲醇：氨水一１０：１（Ｖ：Ｖ）Ｍｅｔｈａｎｏｌ：Ａｍｍｏｎｉａ一１０：１（Ｖ：Ｖ） 氯仿：甲醇：氨水：２０：４０：３（Ｖ；Ｖ：Ｖ） Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ：Ｍｅｔｈａｎｏｌ：Ａｍｍｏｎｉａ：２０：４０：３（Ｖ：Ｖ：Ｖ） 注：Ａ．淡红色；Ｂ．橙色；Ｃ．黄色。 Ｎｏｔｅ：Ａ．Ｌｉｇｈｔ ｒｅｄ；Ｂ．Ｏｒａｎｇｅ；Ｃ．Ｙｅｌｌｏｗ． ２。４斜茎黄芪ＧＣ—ＭＳ分析结果 ２．４．１ 酸性氯仿部分生物碱分析结果 斜茎黄芪 酸性氯仿部分生物碱经ＧＣ－ＭＳ分析，得到基线平 稳的ＧＣ－ＭＳ总离子流图，如图１所示。 １．３６Ｅ９ ＴＩＣＭＳ ２ｓｕａｎｘｉｎｇ 震 袒皇 时 。 ■４，２３… 磊采２６． ４７ ３９．２ ’ ２班３ ．３ ３８５６．工５ ５７ Ｏ ５ １０ ｌ５ ２０ ２５ ３Ｏ ３５ ４Ｏ ４５ ５Ｏ ５５ ６０ 时间／ｍｉｎ Ｔｉｍｅ 图１ 斜茎黄芪酸性氯仿部分ＧＣ－ＭＳ总离子流图 Ｆｉｇ．１ ＧＣ—ＭＳ ｔｏｔａｌ ｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｆｒｏｍ ａｃｉｄｉｔｙ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ｏｆ Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄｓｕｒｇｅｎｓ 从图ｌ可以看出，斜茎黄芪酸性氯仿部分生物 碱总离子流色谱图中共出峰１１６个，对其中较大的 ３６个峰进行检索，并与ＮＩＳＴ２．０标准谱库化合物 进行匹配，发现７个生物碱（表４）。由表４可见，别 隐品碱、原阿片碱和坎那定含量较高，分别占总含量 的３４．８４％、３１．３６ 和２１．４６％，三者之和占总含量 的８７ 以上。 表４斜茎黄芪酸性氯仿部分生物碱分析结果 Ｔａｂｌｅ ４ Ａｋａｌｏｉｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｆｒｏｍ ａｃｉｄｉｔｙ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ｏｆ Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄｓｕｒｇｅｎｓ ２．４．２碱性氯仿部分生物碱分析结果 斜茎黄芪 稳的ＧＣ—ＭＳ总离子流图，如图２所示。 碱性氯仿部分生物碱经ＧＣ—ＭＳ分析，得到基线平 从图２可以看出，斜茎黄芪碱性氯仿部分生物 温伟利等：斜茎黄芪生物碱成分ＧＣ－ＭＳ分析 ５７ 碱总离子流色谱图中共出峰９４个，对其中２０个较 大的峰进行检索，并与ＮＩＳＴ２．０标准谱库化合物进 行匹配，发现有７个生物碱存在（表５）。由表５可 Ｏ．００．４１．００ 见，别隐品碱、Ｏｘｙｈｙｄｒｏｓｔｉｎｉｎｅ和坎那定含量较高， 占总含量的７１．７４ 、７．４５ 和５．３５ 。 ０ｐ星 墨Ｌｑ ＱＡｌ苗＿ｌ Ｈ ∞如∞ 印如 如加 ｏ １．４３Ｅ９ ＴＩＣＭＳ ２ｊｉａｎｘｉｎｇ 骶 褪 ３ ６６ ５．０ ５ ２ Ｏ１ １ １．１２６８ ．．．ｎ … ［２５．６ｌ ．５４ ２９．９—２ ３０—７３３１．５１３３～．８１３４．。１３６．１３ ３９．４ ４０ ０ Ｏ ２ ４ ６ ８ １０ １２ １４ １６ １８ ２Ｏ ２２ ２４ 时间／ｍｉｎ Ｔｉｍｅ 图２斜茎黄芪碱性氯仿部分气相色谱一质谱联用总离子流图 Ｆｉｇ．２ ＧＣ－ＭＳ ｔｏｔａｌ ｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｆｒｏｍ ａｌｋａｌｉｎｅ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ｏｆ Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄｓｕｒｇｅｎｓ 表５斜茎黄芪碱性氯仿部分生物碱分析结果 Ｔａｂｌｅ ５ Ａｋａｌｏｉｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｆｒｏｍ ａｌｋａｌｉｎｅ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ｏｆ Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄｓｕｒｇｅｎｓ ３ 讨论 目前，国内学者对斜茎黄芪的研究主要集中在 品种改良、根瘤菌多样性、染色体特性、营养特性和 碱成分的系统分析，证实斜茎黄芪含有别隐品碱、原 阿片碱、坎那定、Ｏｘｙｈｙｄｒｏｓｔｉｎｉｎｅ等生物碱成分，那 么动物采食斜茎黄芪所引起的毒性作用除了脂肪族 毒性等方面口。 。在毒性研究方面，大多数学者对 斜茎黄芪脂肪族硝基化合物的毒性作用进行了较为 系统研究，王建华 指出，斜茎黄芪的硝基化合物 含量低、毒性小。汪做等＿】。 利用气相色谱连续５年 硝基化合物外，这些生物碱的存在是否也是构成斜 茎黄芪的毒性物质之一，还需进一步通过毒理学试 验来评价。 本试验通过对斜茎黄芪酸性氯仿部分与碱性氯 仿部分ＧＣ—ＭＳ检测发现，该植物含有原阿片碱、别 隐品碱、坎那定、小檗碱、四氢黄连碱等生物碱，总量 检测发现，斜茎黄芪在不同时期及同一生长时期植 株不同部位３一硝基丙酸含量很低，叶中３一硝基丙酸 含量相对较高，但也未超过１００ ｍｇ／ｋｇ。郑尚珍 等口 对斜茎黄芪及不同配比的饲料中的３一硝基丙 酸和３一硝基丙醇进行测定，发现其含量都很低。这 些研究表明，虽然斜茎黄芪中脂肪族硝基化合物含 分别占酸性氯仿部分与碱性氯仿部分总量的８０ 以上，是斜茎黄芪的主要生物碱成分。大量文献资 料表明，植物体所含的生物碱具有多种生理活性。 Ｘｉａｏ Ｘ Ｈ等［１ 发现原阿片碱可以提高ＰＣ 。细胞的 量较低，但脂肪族硝基化合物的存在仍然是制约斜 茎黄芪饲用的毒性物质之一。课题组在我国长期进 行疯草类有毒植物研究时，发现哈密黄芪、茎直黄芪 和变异黄芪所含的生物碱苦马豆素是引起动物中毒 的主要毒性成分＿】 ”］。本试验通过对斜茎黄芪生物 生存能力，并能够使过氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧 化物酶、过氧化氢酶的活性增加，降低Ｈ ０。损伤细 胞的羟自由基的水平；Ｃｈｅｎ Ｃ Ｈ等口。 研究发现原 阿片碱有抗人类依赖性前列腺癌细胞的活性；大鼠 试验证实，别隐品碱有保护肝细胞、改善肝功能和抗 ５８ 动物医学进展２０１３年第３４卷第１０期（总第２４４期） 营养评价［Ｊ］．动物医学进展，２０１２，３３（７）：６７—７Ｏ． 王建华．沙打旺饲喂畜禽的安全性探讨［Ｊ］．畜牧兽医杂志， １９８９（４）：３７—４０． 肝细胞纤维化等作用 ；小檗碱具有抗菌消炎作 用ｌ＿２ 。由此可见，斜茎黄芪可能具有潜在的药用价 值，还需人们通过试验来证实，以期为斜茎黄芪植物 资源的综合利用提供新途径。 参考文献： ［１］ 内蒙古植物志编写组．内蒙古植物志：第三卷［Ｍ］．内蒙古呼 和浩特：内蒙古人民出版社，１９７７． 汪儆，雷祖玉，冯学勤．沙打旺中微量３一硝基丙酸的气相色 谱测定［Ｊ］．中国草地，１９９２（３）：６９—７２． 郑尚珍，孙丽萍，陈颢．沙打旺中微量毒素的含量分析ＥＪ］． 西北师范大学学报：自然科学版，１９９２，２８（２）：３４—３８． 孙莉莎，路浩，赵宝玉，等．哈密黄芪化学成分预试及生物碱 ［２］ 肖崇厚．中药化学［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，１９９９． ［３］梁丹，李志伟，李 明，等．天然生物碱的研究与应用［Ｊ］．安 成分色谱分析［Ｊ］．中国兽医学报，２００９，２９（９）：１２１７－１２２１． 王建军，赵宝玉，张为民，等．茎直黄芪提取物的体外抑菌作用 ［Ｊ］．西北农业学报，２００７，１６（２）：１０８—１１２． 赵宝玉，王建军，谭承建，等．变异黄芪毒性成分苦马豆素的分 离与鉴定［Ｊ］．中国草地学报，２００６，２８（５）：６６—７１． Ｘｉａｏ Ｘ Ｈ，Ｌｉｕ】Ｔ，Ｈｕ Ｊ Ｗ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｐｒｏｔｏ— 徽农业科学，２００７，２７（３５）：１１３４０—１１３４２． ［４３ 陶 炳，张奥。蓝蓉．生物碱类镇痛活性成分及其镇痛机制 研究进展［Ｊ］．时珍国医国药，２ｏ１１，２７（３５）：９５７—９６０． ［５］宋兵，韩崇选，张宏利．３种苦参生物碱对小鼠的毒性作用研 究［Ｊ］．西北植物学报，２００９，２９（４）：８１８ ８２３． ［６］斐月湖．天然药物化学实验ＥＭ］．北京：人民卫生出版社，２００４． ｐｉｎｅ ｏｎ ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｐｅｒｏｘｉｄｅ—ｉｎｄｕｃｅｄ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｉｎｊｕｒｙ ｏｆ ＰＣ１２ ｃｅｌｌｓ ｖｉａ Ｃａ ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ［Ｊ］． Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００８，５９１（１—３）：２卜２７． Ｃｈｅｎ Ｃ Ｈ，Ｌｉａｏ Ｃ Ｈ，Ｃｈａｎｇ Ｙ Ｌ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｏｔｏｐｉｎｅ，Ａ ｎｏｖｅｌ ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ—ｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇ ａｇｅｎｔ，ｃａｕｓｅｓ ｍｉｔｏｔｉｃ ａｒｒｅｓｔ ａｎｄ ａｐｏｐ ｔｏｔｉｃ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｈｏｒｍｏｎｅ—ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ Ｅ７３何毅，果寿善，李青，等．野生斜茎黄芪驯化选育［Ｊ］．中国 草食动物，２００７，２７（１）：３９—４０． Ｅ８］高俊莲，孙建光，陈文新．斜茎黄芪根瘤菌结瘤基因ｎｏｄＡ ＰＣＲ 扩增及ＰＣＲ—ＲＦＬＰ分析［Ｊ］．微生物学杂志，２００６，２６（４）：１—５． Ｅ９］孔红，闫口 Ｉ二Ｊ 口 口 口 口 阳 阳 力 丽，马建军，等．斜茎黄芪的染色体研究［Ｊ］．廊坊 口 ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ［Ｊ］．Ｃａｎ Ｌｅｔ，２０１２，３１５：Ｉ－１１． 肖 俐，曾建国，刘 林，等．别隐品碱抗肝纤维化作用［Ｊ］．中 草药，２０１１，４２（６）：１１５８—１１６３． 师范学院学报：自然科学版，２００９，９（１）：６０—６１． ［１０］ Ｆｅｎｇ Ｐ，Ｓｕｎ Ｑ ｚ，Ｚｈｅｎｇ Ｈ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｎｕｔｒｉｅｎｔ ａｎｄ ｐｏｉｓｏｎｏｕｓ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｍｉｘｅｄ ｓｉｌａｇｅ ｏｆ ｍａｉｚｅ ａｎｄ Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄ 杨勇，雷志英，吴方评，等．小檗碱的抗菌作用研究进展［Ｊ］． ｓｕｒｇｅｎｓ Ｐａｌ１．ｗｉｔｈ ｖａｒｉｅｄ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｊ Ａｎｉ Ｖｅｔ Ａｄｖ， ２Ｏ１２，１１（１０）：１５３２—１５３７． 现代生物医学进展，２０１０，１０（９）：１７８３—１７８５． ［¨］ 温伟利，路浩，徐创明，等．野生型斜茎黄芪化学成分分析与 ＧＣ—ＭＳ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ａｌｋａｌｏｉｄ ｉｎ Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄｓｕｒｇｅｎｓ ＷＥＮ Ｗｅｉ～ｌｉ ，ＺＨＡＯ Ｂａｏ—ｙｕ ，ＬＵ Ｈａｏ ，ＤＡ Ｎｅｎｇ—ｔａｉ ，ＺＨ０Ｕ Ｑｉ—ｗｕ （１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ＮｏｒｔｈｗｅｓｔＡ＆Ｆ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ，Ｓｈａａｎｘｉ，７１２１００，Ｃｈｉｎａ； ２．Ａｌａｓａｎ Ｌｅｆｔ Ｂａｎｎｅｒ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｓｔａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇａｌｉａ，Ｂａｙａｎｈａｏｔｅ，Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇａｌｉａ，７５０３００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｔ ｓｔｕｄｙ，ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｏｆ ａｌｋａｌｏｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄｓｕｒｇｅｎｓ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓ— ｔｉｇａｔｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｓｙｓｔｅｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ａｎｄ ＧＣ—ＭＳ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ， ５．４ ｇ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ｏｆ ａｃｉｄｉｃ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ａｎｄ ３．６ ｇ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ｏｆ ａｌｋａｌｉｎｅ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ４．５ ｋｇ ｄｒｙ ｐｏｗｅｒ ｏｆ Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄｓｕｒｇｅｎｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｉｏ ｗｅｒｅ １．３ ａｎｄ ０．８￣／６，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ ａｃｉｄｉｃ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ｗａｓ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ。ｍｅｔｈａｎｏ１—１ ５：１（Ｖ：Ｖ）ｗｉｔｈ ５ ｓｐｏｔｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ ａｌｋａｌｉｎｅ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ｗａｓ ｍｅｔｈａｎｏｌ：ａｍｍｏｎｉａ＝＝＝１０：１（Ｖ：Ｖ）ｗｉｔｈ ５ ｓｐｏｔｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ＧＣ—ＭＳ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｔｈａｔ ｂｏｔｈ ｏｆ ｔｈｅ ｔｗｏ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍｓ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ ７ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ａｌｋａｌｏｉｄｓ，ｔｈｅ ｆｏｒｍｅｒ ｍａｉｎｌｙ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ ａｌｌｏｃｒｙｐｔｏｐｉｎｅ（３４．８４ ），ｐｒｏｔｏｐｉｎｅ（３１．３６ ）ａｎｄ ｃａｎａｄｉｎｅ（２１．４６ ），ａｎｄ ｔｈｅ ｌａｔｔｅｒ ｍａｉｎｌｙ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ ａｌｌｏｃｒｙｐｔｏｐｉｎｅ（７１．７４ ），ｏｘｙｈｙｄｒｏｓｔｉｎｉｎｅ（７．４５ ．０６）ａｎｄ ｃａｎａｄｉｎｅ（５．３５ ）．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ， Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄｓｕｒｇｅｎｓ ｃｏｎｔａｉｎｓ ａｌｋａｌｏｉｄｓ，ｗｈｉｃｈ ａｒｅ ｍａｉｎｌｙ ｃｏｎｓｉｓｔｅｄ ｏｆ ａｌ１ｏｃｒｙｐｔｏｐｉｎｅ，ｏｘｙｈｙｄｒｏｓｔｉｎｉｎｅ， ｃａｎａｄｉｎｅ ａｎｄ ｐｒｏｔｏｐｉｎｅ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ａｄｓｕｒｇｅｎｓ；ａｌｋａｌｏｉｄ；ＧＣ—ＭＳ