比色法测定土壤中氨态氮、有效磷、速效钾 1.实验仪器及药品
1.1实验仪器:
可见分光光度计、磁力搅拌仪、pH计、滴管。 2.2所需药品:
浓硫酸、盐酸、氢氧化钠、无水硫酸钠、碳酸氢钠、无磷活性炭、酒石酸钾钠、阿拉伯胶、碘化钾、氯化汞、氢氧化钾、酒石酸钠、钼酸铵、氯化亚锡、甘油、五水硫酸铜、酒石酸、EDTA-Na
2、四笨硼钠、磷酸二氢钾、硫酸氨、硝酸钾、硫酸钾。 2.实验试剂配制:
2.1 (1+9)硫酸溶液:1体积硫酸+9体积水 2.2 (1+1)盐酸溶液: 盐酸与水1:1混合
2.3氢氧化钠溶液:100g/L 2.4联合浸提剂:
称取无水硫酸钠53.12g,碳酸氢钠37.8g,溶于800mL水中,用(1+9)硫酸或氢氧化钠溶液将pH值调至8.5,蒸馏水定容至1000mL。
2.5无磷活性炭
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2.6氨态氮掩蔽剂:400g/L酒石酸钾钠溶液。 2.7氨态氮助色剂:50g/L阿拉伯胶溶液。 2.8氨态氮显色剂:
称取碘化钾50g溶于50mL水中,边搅拌边加入饱和氯化汞溶液,直至出现少量的紫红色沉淀充分搅拌后不溶解为止。缓缓加入氢氧化钾150g,搅拌使其溶解,定容至1000mL,转移到大烧杯中静置过夜,取上清液。
2.9氨态氮强色剂:300g/L氢氧化钠溶液。 2.10有效磷掩蔽剂:10g/L酒石酸钠溶液。 2.11有效磷显色剂:35g/L钼酸铵溶液:
量取146mL浓硫酸,溶于500mL水中,冷却;另取35g钼酸铵溶于200mL水中;将硫酸缓缓倒入钼酸铵溶液中,边加边搅拌,最后加水定容至1000mL。
2.12有效磷还原剂:20g/L氯化亚锡甘油溶液:
称取氯化亚锡20g溶于100mL盐酸中,充分溶解后转入1000mL容量瓶中,用甘油定容至1000mL。 2.13速效钾掩蔽剂:
称取五水硫酸铜5g,酒石酸12g,溶于500mL水中,加入浓硫酸200mL,冷却后定容至1000mL。 2.14速效钾助掩剂:75g/LEDTA-Na
2溶液。2.15速效钾浊度剂:62.5g/L四笨硼钠溶液:
称取氢氧化钠8g溶于80mL水中,冷却后定容至100mL,即得2mol/LNaOH溶液,备用;另取四笨硼钠62.5g,溶于900mL水中,加入0.5mL 2mol/L NaOH溶液,摇匀,定容至1000mL,过
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滤至溶液澄清。
2.16土壤混合标准储备溶液: 称取磷酸二氢钾0.4602g,硫酸氨
1.1319g,硝酸钾1.7323g,硫酸钾0.0611g,溶于800mL水中,加入浓硫酸10mL,定容至1000mL。
2.17土壤混合标准液:
吸取1mL土壤混合标准液储备液,用土壤联合浸提剂稀释至100mL,摇匀。
3.实验步骤
3.1试液制备
称取2.5g风干试样,置于100mL锥形瓶内,加入无磷活性炭0.5g,土壤联合浸提剂50mL,盖紧瓶塞,然后放在磁力搅拌仪托盘上,保持温度25±2℃,转速1200r/min,搅拌8min,过滤。滤液用于测定。
3.2铵态氮的显色和测定
3.2.1显色
吸取土壤联合浸提剂2mL于一只玻璃瓶中作空白,吸取土壤混合标准液2mL于另一只玻璃瓶中,吸取土壤浸提滤液2mL于第三只玻璃瓶中,3只玻璃瓶分别依次加入:
土壤氨态掩蔽剂6滴,土壤氨态助色剂3滴,土壤氨态显色剂4滴,土壤氨态强色剂4滴。摇匀,静置10min。
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3.2.2测定
将待测液分别转移到10mm比色皿中,在420nm波长下,以空白液调0后,测定标准液与待测液的吸光值。按以下公式计算铵态氮:
铵态氮(mg/kg)=A2/A1×48 注:
A1为标准液的吸光值,A2为待测液的吸光值 3.3有效磷的显色和测定
3.3.1显色
吸取土壤联合浸提剂2mL于一只玻璃瓶中作空白,吸取土壤混合标准液2mL于另一只玻璃瓶中,吸取土壤浸提滤液2mL于第三只玻璃瓶中,加入土壤有效磷掩蔽剂4滴,摇匀至无气泡,3只玻璃瓶分别依次加入:
土壤有效磷显色剂5滴,土壤有效磷还原剂1滴。 摇匀,静置10min。 3.3.2测定
将待测液倒入比色皿,在685nm波长下,以空白调0后测定标准液与待测液的吸光值。按以下公式计算有效磷:
有效磷(mg/kg)=A2/A1×48
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注:
A1为标准液的吸光值,A2为待测液的吸光值 3.4速效钾的显色和测定
3.4.1显色
吸取土壤联合浸提剂2mL于一只玻璃瓶中作空白,吸取土壤混合标准液2mL于另一只玻璃瓶中,吸取土壤浸提滤液2mL于第三只玻璃瓶中,3只玻璃瓶分别依次加入:
土壤速效钾掩蔽剂2滴,土壤速效钾助掩剂6滴,土壤速效钾浊度剂4滴。摇匀,立即测定。 3.4.2测定
将待测液倒入比色皿,在685nm波长下,以空白调0后测定标准液与待测液的吸光值。按以下公式计算速效钾:
速效钾(mg/kg)=A2/A1×200 注:
A1为标准液的吸光值,A2为待测液的吸光值
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