复５２２ 里学提Ｆｕｄａｎｉ 厶ｕ ２。１１ Ｎ。ｖ，３８（６）ｕ ’Ｊ０ ｕ ＵｎｉｖＪＭｅｄＳｃ ‘医学版组蛋白去乙酰化酶抑制剂对裂殖酵母核基因 ＳＲＫ１和线粒体基因转录的影响 王 莉 （ 复旦大学药学院ＲＮＡ生物学实验室 上海陈东戎 上海２０００３２） ２０１２０３； 复旦大学生物医学研究院ＲＮＡ生物学实验室【摘要】目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂（ｈｉｓｔｏｎｅ ｄｅａｃｅｔｙ ｌａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ）丙戊酸（ｖａｌｐｒｏｉｃ ａｃｉｄ，ＶＰＡ）对裂殖 酵母体内应激激酶核基因ＳＲＫ１和线粒体基因转录的影响。方法 在裂殖酵母９７２细胞中加入梯度稀释的 ＶＰＡ测定细胞生长曲线并计算半数抑菌浓度（ＩＣｓ。）。检测分别加入１和５￣ｍｏｌ／Ｌ ＶＰＡ处理６ ｈ后，核基因 ＳＲＫ１的转录水平；检测同等处理条件下裂殖酵母体内线粒体基因的转录水平。结果ＶＰＡ对９７２细胞的ＩＣ５。 为７．５７ ｕｍｏｌ／Ｌ。ｌ ｕｍｏｌ／Ｌ ＶＰＡ处理的细胞中核基因ＳＲＫ１转录水平上调５．５倍，外加５ ８ｍｏｌ／Ｌ ＶＰＡ处理的 细胞中ＳＲＫ１基因转录水平上调４．２倍；经１ ｕｍｏｌ／Ｌ ＶＰＡ处理后，线粒体基因ＣＯＢ，ＳＰＭＩＴ２，ＳＰＭＩＴ３上调倍 数分别为３、４．５９和６．３１倍，其他基因变化不大，经５ ｕｍｏｌ／Ｌ ＶＰＡ处理后，线粒体基因转录水平全部上调，上调 范围２．６３－－７．０２倍。结论在裂殖酵母体内，ＶＰＡ能通过抑制细胞内去乙酰化酶而调节细胞核基因和线粒体 基因的转录水平，加入ＩＣｓｏ水平的ＶＰＡ引起与应激相关核基因ＳＲＫ１的转录水平显著上升，且线粒体内大部分 基因转录水平也随之升高，说明细胞受到刺激后核基因和线粒体基因均能通过调节转录水平来阻挡外界刺激对 细胞的影响。 【关键词】蛋白去乙酰化酶抑制剂；丙戊酸；裂殖酵母；基因转录；应激反应；线粒体 【中图分类号】Ｑ ７５ 【文献标志码】Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２ ８４６７．２０１１．０６．０１２ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｎｕｃｌｅａｒ ｇｅｎｅ ＳＲＫ１ ａｎｄ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｇｅｎｅｓ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｈｉｓｔｏｎｅ ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｉｎ ｆｉｓｓｉｏｎ ｙｅａｓｔ ＷＡＮＧ Ｌｉ 一ＣＨＥＮ Ｄｏｎｇ ｒｏｎｇ ， △ （ ＲＮＡ Ｌａｂ，Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｆｕｄａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ； ＲＮＡ Ｌａｂ，Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｆｕｄａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００３２，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｇｅｔ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｎｕｃｌｅａｒ ｇｅｎｅ ＳＲＫ１ ａｎｄ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｇｅｎｅｓ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｈｉｓｔｏｎｅ ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，ｖａｌｐｒｏｉｃ ａｃｉｄ（ＶＰＡ），ｉｎ ｆｉｓｓｉｏｎ ｙｅａｓｔ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｗｅ ａｄｄｅｄ ｓｅｒｉａｌ ｄｉｌｕｔｉｏｎｓ ｏｆ ＶＰＡ ｉｎｔｏ ９７２ ｃｅｌｌｓ，ｔｈｅｎ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｇｒｏｗｔｈ ｃｕｒｖｅｓ ａｎｄ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ＩＣ５０．Ａｆｔｅｒ ｗｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｎｕｃｌｅａｒ ｇｅｎｅ ＳＲＫ１ ｗｉｔｈ １ ａｎｄ ５ ｕｍｏｌ／Ｌ ＶＰＡ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄ ｔｈｅｎ ｗｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｇｅｎｅｓ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ＶＰＡ． Ｒｅｓｕｌｔｓ ＩＣ５ｏ ｏｆ ９７２ ｃｅｉｌｓ ｗａｓ ７．５７ ｕｍｏｌ／ Ｌ ｗｉｔｈ ＶＰＡ；ＳＲＫ１ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ５．５ ａｎｄ ４．２ ｔｉｍｅｓ ｗｉｔｈ １ ａｎｄ ５ ｕｍｏｌ／Ｌ ＶＰＡ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｇｅｎｅｓ ＣＯＢ，ＳＰＭＩＴ２ ａｎｄ ＳＰＭＩＴ３ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ３，４．５９ ａｎｄ ６．３１ ｔｉｍｅｓ，ａｎｄ ｏｔｈｅｒｓ ｈａｄ ｎｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗｉｔｈ １肛ｍｏｌ／Ｌ．Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ａｌｌ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｇｅｎｅｓ ｄｉｓｔｉｎｃｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｆｒｏｍ ２．６３ ｔｏ ７．０２ ｔｉｍｅｓ ｗｉｔｈ ５ ｕｍｏｌ／Ｌ ＶＰＡ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ ＶＰＡ ｃａｎ ｒｅｇｕｌａｔｅ ｔｈｅ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｄ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｇｅｎｅｓ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｂｙ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ｈｉｓｔｏｎｅ ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｅ．Ｔｈｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｎｕｃｌｅａｒ ｇｅｎｅ ＳＲＫ１ ａｎｄ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｇｅｎｅｓ ａｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｗｈｅｎ ＶＰＡ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｃｌｏｓｅｓ ｔｏ ＩＣ５０．Ｔｈｅｓｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗ ｂｏｔｈ ｔｈｅ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｄ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｇｅｎｅｓ ｃｏｕｌｄ ｒｅｇｕｌａｔｅ ｔｈｅ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｃｅｌｌｓ ｆａｃｅ ｔｈｅ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ｓｔｒｅｓｓ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ｈｉｓｔｏｎｅ ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ； ｖａｌｐｒｏｉｃ ａｃｉｄ； ｆｉｓｓｉｏｎ ｙｅａｓｔ； ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ； ｓｔｒｅｓｓ ｒｅｓｐｏｎｓｅ； ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ ＡＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ Ｅ—ｍａｉｌ：ｄｒｃｈｅｎ＠ｆｕｄａｎ．ｅｄｕ．ＣＤ 王莉，等．组蛋白去乙酰化酶抑制剂对裂殖酵母核基因ＳＲＫ１和线粒体基因转录的影响 ５２３ 裂殖酵母（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐｏｍｂｅ）的分 裂生殖方式与哺乳动物细胞有较高相似性，是进行 转录调控分子机制和疾病机制研究的良好的模 型 －３］。组蛋白去乙酰化酶能使组蛋白去乙酰化， 使带负电荷的ＤＮＡ结合紧密，染色质卷曲缠绕，最 终导致核基因的转录受到抑制ｌ＿４］。作为一种组蛋白 去乙酰化酶抑制剂，丙戊酸钠盐（ｖａｌｐｒｏｉｃ ａｃｉｄ ｓｏｄｉｕｍ ｓａｌｔ）能够提高细胞内组蛋白乙酰化水平，从 而激活转录＿５］。 ＳＲＫ１是一个由细胞核基因编码的激酶，最初 在裂殖酵母中被发现，与细胞应激相关，ＳＲＫ１和 ＳＴＹ１／ＭＡＰ激酶形成的复合物，通过ＳＴＹ１的磷酸化 而被激活。在裂殖酵母中，细胞周期依赖性蛋白激 酶ＣＤＣ２５是一个普遍存在的保守磷酸酶，可以通过 磷酸化ＣＤＣ２促使细胞进入有丝分裂。当细胞受到 外界环境的刺激时，ＳＲＫ１基因的转录会上调，导致 体内ＳＲＫ１蛋白表达量增多，通过抑制ＣＤＣ２５的磷 酸化而抑制其活性，引起ＣＤＣ２５激酶在胞质中积 累，继而影响ＣＤＣ２和有丝分裂的起始 ］。 线粒体是细胞生命活动能量来源的主要场所， 与人类许多疾病的发生有重大关联。线粒体基因组 （ｍｔＤＮＡ）包含能编码部分ｒＲＮＡｓ、ｔＲＮＡｓ和与呼吸 相关的蛋白质的基因，可以独立于细胞核进行基因 转录，但比细胞核的基因转录要简单的多。在 ｍｔＤＮＡ中：１５Ｓ和２１ Ｓ编码１５ｓ和２１ｓ的核糖体 ＲＮＡ；Ｃ０Ｂ、ＣＯＸ２和Ｃ０Ｘ３分别负责编码细胞色素 Ｃ氧化酶的ｂ、２和３亚基；ＡＴＰ６和Ａ ９编码ＡＴＰ 酶的６和９亚基；ＳＰＭ 了、２和ＳＰＭＩＴ３负责编码线 粒体ＤＮＡ内切酶相关亚基，这些基因均参与细胞氧 化磷酸化的相关途径，因此在细胞凋亡、衰老、体内 钙平衡等细胞进程中发挥重要作用。通过体外标记 转录酶已经在ｍｔＤＮＡ上确定出３个转录起始位点 Ｐ 、Ｐ ｉ和Ｐｉ ，较大的启动子Ｐ 在靠近１５Ｓ基因的 ５ 端，较小的启动子Ｐ 在∞Ｘ３基因的上游，Ｐ 启 动子位于ＣＯＢ基因的内含子区域。 在外界刺激下，细胞会产生应激反应，增强核内 应激相关基因以及线粒体基因的转录水平以抵抗外 界刺激，从而保护细胞＿＿７］。我们通过对裂殖酵母加 入不同浓度的ＶＰＡ处理后，研究与应激相关的核基 因ＳＲＫ１及线粒体基因的转录水平，可为细胞应 激、细胞周期和疾病研究等相关领域提供理论基础。 材料和方法 材料裂殖酵母野生型９７２细胞来自英国剑桥 大学韦尔科姆基金会桑格学院研究所（Ｗｅｌｌｃｏｍｅ Ｔｒｕｓｔ Ｓａｎｇｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ），由伦敦大学学院遗传、进化 和环境系Ｊｕｒｇ Ｂａｈｌｅｒ课题组赠送。ＶＰＡ化合物和 水饱和酚均购自美国Ｓｉｇｍａ公司；反转录试剂盒 ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ￣１ Ｓｔｒａｎｄ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ和实时荧 光定量ＰＣＲ试剂盒ＳＹＢＲ＠Ｐｅｍｉｘ Ｅｘ ＴａｑＴＭ均购自 日本ＴａＫａＲａ公司。引物由上海生物工程有限公司 合成并纯化。 ＩＣ 。测定将裂殖酵母９７２细胞置于５ ｍＬ ＹＥ 培养基（５ｇ／Ｌ酵母提取物，３０ｇ／Ｌ葡萄糖）中，３０℃ 振荡培养至Ｄ６。。≈０．６，稀释至Ｄ 。０≈０．１５，按每孔 ３００ Ｌ接种于９６孔培养板中（３ Ｘ ７＝２１孔），置于 ３０℃摇床内振荡培养。在各孔中分别加入ＶＰＡ，使 其终浓度依次为ｉ００、２５、６．２５、１．５６、０．３９和０．０９８ 肚ｍｏｌ／Ｌ。每个浓度设３个复孔，以未用ＶＰＡ处理的 野生型９７２细胞作为对照，间隔３ ｈ测定Ｄ。。ｏ值，取 ３个复孔的平均值并计算ＩＣ 。值 ］。 热酚法抽提裂殖酵母总ＲＮＡ将裂殖酵母９７２ 细胞于１０ ｍＬ ＹＥ培养基中３０℃振荡培养至Ｄ。。。≈ ０．６，稀释至Ｄ ∞≈０．１５，加入ＶＰＡ至终浓度分别为 １和５ ｍｏｌ／Ｌ处理６ ｈ，以未用ＶＰＡ处理的９７２细 胞生长６ ｈ作为对照，于４ ０００ ｒ／ｒａｉｎ离心５ ｒａｉｎ，收 菌。将细胞悬浮于１ ｍＬ ＡＥ缓冲液（醋酸钠 ５０ ｍｍｏｌ／Ｌ，ＥＤＴＡ １０ ｍｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ＝５．２），加入等体 积酸性苯酚（ｐＨ＝４．５），于６５℃水浴１ ｈ，每１０ ｒａｉｎ 取出震荡混匀，于４℃、１２ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｍｉｎ； 取上层水相，加入等体积的苯酚／氯仿／异戊醇（２５： ２４：１），震荡混匀，于４℃、１２ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１５ ａｒｉｎ；取上层水相，加入等体积氯仿／异戊醇（４９：１）， 震荡混匀，于４℃、１２ ０００ ｒ／ｒａｉｎ离心１５ ｒａｉｎ；取上 层水相，加入１／１０体积的醋酸钠（３ ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ＝ ５．２）和２．５倍体积的纯乙醇，于一８０℃沉淀核酸 ２ ｈ；沉淀样品于４℃、１２ ０００ ｒ／ｒａｉｎ离心１０ ｒａｉｎ，去 除液体；力Ⅱ人ＤＮＡ酶Ｉ，于３７℃消化３０ ｍｉｎ，去除 ＤＮＡ酶，加入等体积的苯酚／氯仿／异戊醇（２５：２４： １），震荡混匀，于４℃、１２ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１５ ｒａｉｎ；取 上层水相，加入等体积氯仿／异戊醇（２４：１），震荡混 匀，于４℃、１２ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１５ ｍｉｎ；取上层水相， 加入１／１０体积的醋酸钠（３ ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ＝５．２）和２．５ 倍体积的纯乙醇，于一８０℃沉淀核酸２ ｈ；沉淀样品 于４℃、１２ ０００ ｒ／ｒａｉｎ离心１０ ｒａｉｎ，去除液体；加入１ ｍＬ预冷乙醇，于４℃、１２ ０００ ｒ／ｒａｉｎ离心１０ ｒａｉｎ，去 除液体；将ＲＮＡ放置１５ ｒａｉｎ晾干，最后用适量 ＤＥＰＣ水溶解ＲＮＡ，使用紫外分光光度法准确定量 ＲＮＡ浓度 。 实时荧光定量ＰＣＲ检测 反转录试剂盒 ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ固１ Ｓｔｒａｎｄ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ置于４２℃ ５２６ 复旦学报（医学版） ２０１１年ｌ１月，３８（６） ＭＡＰＫ ｉｎ ｆｉｓｓｉｏｎ ｙｅａｓｔ ＿ｌＪ］．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２００２，２７７ 参 考 文 献 ［１］ Ｗｏｏｄ Ｖ，Ｂａｈｌｅｒ Ｊ．Ｗｅｂｓｉｔｅ ｒｅｖｉｅｗ：Ｈｏｗ ｔｏ ｇｅｔ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｆｒｏｍ ｆｉｓｓｉｏｎ ｙｅａｓｔ ｇｅｎｏｍｅ ｄａｔａ［Ｊ］．Ｃｏｍｐ Ｆｕｎｃｔ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，２００２，３（３）：２８２—２８８． （３６）：３３ ４１１～３３ ４２１． ｄｔ ＭＷ，Ｈｏｕｓｅｍａｎ Ａ，Ｉｖａｎｏｖ ＡＲ，ｅｔ ａ１． ［８］ ＳｃｈｍｉＣｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｏｍｉｃ ａｎｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｉｃ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｓｓｉｏｎ ｙｅａｓｔ Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐｏｍｂｅ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｓｙｓｔ Ｂｉｏｌ，２００７，３：７９． ［２］ Ｌｙｎｅ Ｒ，Ｂｕｒｎｓ Ｇ，Ｍａｔａ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｗｈｏｌｅ—ｇｅｎｏｍｅ ｍｉｃｒｏａｒｒａｙｓ ｏｆ ｆｉｓｓｉｏｎ ｙｅａｓｔ：ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ａｃｃｕｒａｃｙ， ［９］ Ｐｅｎｋｅｔｔ ＣＪ，Ｂｉｒｔｌｅ ＺＥ，Ｂａｈｌｅｒ Ｊ．Ｓｉｍｐｌｉｆｉｅｄ ｐｒｉｍｅｒ ｄｅｓｉｇｎ ｆｏｒ ＰＣＲ・ｂａｓｅｄ ｇｅｎｅ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ａｎｄ ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ．ａｎｄ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｏｆ ａｒｒａｙ ｄａｔａ［Ｊ］．ＢＭｃ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，２００３，４（１）：２７． ｐｒｉｍｅｒ ｄａｔａｂａｓｅ：ｔｗｏ ｗｅｂ ｔｏｏｌｓ ｆｏｒ ｆｉｓｓｉｏｎ ｙｅａｓｔ［Ｊ］． Ｙｅａｓｔ，２００６，２３（１３）：９２１—９２８． ａｕｓｋａｓ ＡＶ， Ｗｅｅｒａｓｉｎｇｈｅ ＳＶ，Ｐｆｌｕｍ ＭＫ． ［１Ｏ］ ＢｉｅｌｉＳｔｒｕｃｔｕｒａ１ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ ＨＤＡＣ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ：ＳＡＨＡ ｃｉ Ｇ，Ｍａｔａ Ｊ，Ｋｉｖｉｎｅｎ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｐｅｒｉｏｄｉｃ ｇｅｎｅ ［３］ Ｒｕｓｔｉｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｒｏｇｒａｍ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｓｓｉｏｎ ｙｅａｓｔ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ［Ｊ］． Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ，２００４；３６（８）：８０９—８１７． ｒｅｎ Ｍ，Ｓｉｌｖｅｒｓｔｅｉｎ ＲＡ，Ｓｉｎｈａ Ｉ，ｅｔⅡ１．Ｇｅｎｏｍｅｗｉｄｅ ［４］ Ｗｉａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｎｕｃｌｅｏｓｏｍｅ ｄｅｎｓｉｔｙ ｈｉｓｔｏｎｅ ａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎａｌｏｇｓ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅｄ ａｄｊａｃｅｎｔ ｔｏ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｘａｍｉｃ ａｃｉｄ ［Ｊ］．Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ Ｌｅｔｔ，２００７，１７（８）：２ ２１６— ２ ２１９． ＨＤＡＣ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ ｆｉｓｓｉｏｎ ｙｅａｓｔ［Ｊ］．Ｅｍｂｏ Ｊ，２００５，２４ （１６）：２ ９０６—２９ １８． ［１１］ Ｃａｓｔｅｌｌｓ－Ｒｏｃａ Ｌ，Ｇａｒｃｉａ—Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｊ，Ｍｏｒｅｎｏ Ｊ，ｅｔ ａｆ． Ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｉｎ ｙｅａｓｔ ｉｎｖｏｌｖｅｓ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｂｏｔｈ ｏｚａｋ ＭＡ，Ｓｅｎｇｕｐｔａ Ｎ，Ｚｈａｎｇ Ｘ，ｅｔ ａ１．Ａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ ［５］ Ｇｌｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｒａｔｅｓ ａｎｄ ｍＲＮＡ ｓｔａｂｉｌｉｔｉｅｓ［Ｊ］．ＰＬｏＳ ０ｎｅ，２０１１，６（２）：ｅ１７２７２． ａｎｄ ｄｅａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｎ—ｈｉｓｔｏｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ＬＪ］．Ｇｅｎｅ， ２００５，３６３：１５—２３． －１１２］ Ｇｕｈａ Ｓ，Ｌｏｐｅｚ—Ｍａｕｒｙ Ｌ， Ｓｈａｗ Ｍ， ｅｔ ａ１． ａｎｇ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ａ ｎｏｖｅｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ［６］ Ｓｕｎ Ｗ，Ｗａｎｇ Ｚ，Ｊｉｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ Ｍｔｆｌ ｉｎ ｆｉｓｓｉｏｎ ｙｅａｓｔ；Ｍｔｆｌ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅ ｎｕｃｌｅａｒ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｓｒｋｌ ＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｉＯｎａ１ ａｎｄ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｏ ｄｅｆｅｃｔｉｖｅ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ ｉｎ ｆｉｓｓｉｏｎ ｙｅａｓｔ［Ｊ］．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，２０１１，４０８（２）：２２２—２３７． ｌＪ］．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ，２０１１，３９（７）：２ ６９０—２ ７００． ｔｈ ＤＡ，Ｔｏｏｎｅ ＷＭ，Ｃｈｅｎ Ｄ，ｅｔ＠ｃ．Ｔｈｅ Ｓｒｋｌ ［７］ Ｓｍｉｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ ｉｓ ａ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｓｔｙ１ ｓｔｒｅｓｓ—ａｃｔｉｖａｔｅｄ （收稿日期：２０１１—０３—０７；编辑：段佳） …………一…………………～… （上接第５２１页） ［１７］Ｌｉｎ ＪＣ，Ｌｉｎ ＳＣ，Ｍａｒ ＥＣ，ｅｔ ａ１．Ａ ｓｔｒａｔｅｇｙ ｆｏｒ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｏｆ ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ ｏｆ Ｅｐｓｔｅｉｎ—Ｂａｒｒ ｖｉｒｕｓ ｂｙ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ－ｒｅａｃｔｉｏｎ：ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｓｔｕｄｙｉｎｇ Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ ［１９］赵莎，刘卫平，王晓凌，等．结外鼻型ＮＫ／Ｔ细胞淋巴 瘤中ＥＢ病毒潜伏膜蛋白１基因３０ ｂｐ碱基缺失的检 测意义及其与预后的关系［Ｊ］．中华病理学杂志， ２００５，３４（１１）：７２０—７２３． ｌｙｍｐｈｏｍａ［Ｊ］．Ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｌｙｍｐｈｏｍａ，１９９４，１５（５— ６）：３８９—３９７ Ｃ２ｏ］Ｓａｎｔｏｎ Ａ．Ｂｅｌｌａｓ Ｃ．Ｄｅｌｅｔｉｏｎｓ ｗｉｔｈｉｎ ｔｈｅ Ｅｐｓｔｅｉｎ．Ｂａｒｒ ｖｉｒｕｓ ｌａｔｅｎｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ一１ ｏｎｃｏｇｅｎｅ ｉｎ ａｄｕｌｔ ［１８］Ｊｉ ＥＫ，Ｙｏｕｎｇ ＡＫ，Ｙｏｏｎ ＫＪ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＮＫ／Ｔ．－ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ ａｎｄ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ Ｔ－ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｉｎ Ｋｏｒｅａ：ｃ１ｉｎｉｃＯｐａｔｈＯ１ｏｇｉｃａ１ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ ｏｒｄｉｎａｒｙ，ＨＩＶ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ａｎｄ ｐａｅｄｉａｔｒｉｃ Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ￣．Ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｌｙｍｐｈｏｍａ，２００１，４０（３—４）： ２３５—２４２． ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＥＢＶ ｓｔｒａｉｎ ｔｙｐｅ ａｎｄ ３０一ｂｐ ｄｅｌｅｔｉｏｎ ｖａｒｉａｎｔ ＬＭＰ１［Ｊ］．Ｐａｔｈｏｌ Ｉｎｔ，２００３，５３（１１）： ７３５—７４３． （收稿日期：２０１１ ０１—１１；编辑：张秀峰）