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F-7000简易操作(中)

来源:九壹网
 日立F-7000荧光分光光度计简易操作步骤 <一> 开机顺序:

(1) 接通电脑及打印机电源,进入Windows操作系统。

(2) 接通光度计左侧电源开关(POWER)约5秒钟后主机右上方绿色氙灯指示灯点亮,

表示氙灯已经启辉工作。

(3) 双击电脑屏幕上FL Solutions 荧光分析快捷框,进入仪器操作界面。

<二> 关机顺序:

(4) 使用仪器操作软件退出操作系统并关闭氙灯。

(5) 保持主机通电10分钟以上最后关闭主机电源开关。(目的是让灯室充分散热)

<三> 波长扫描的简易操作:(Wavelength Scan)

点击快捷栏“Method” 后,立即显示了分析方法(Analysis Method)的五个模块界面,分别为“常规”(General),“仪器条件”(Instrument),“监视界面”(Monitor),“处理”(Processing),“报告”(Report)。下面详细介绍每个界面: (1)General (常规)

*Measurement(测量方式)--------选择Wavelength (波长扫描) *Operator (操作者名)---------键入操作者性名 *Insturment (仪器型号) ----------自动给出

*Sampling (进样器类型) -------选用自动进样器后该项自动指定 *Comments (注释表)-----------可输入简单注释说明 *󰂆 Use sample table(使用样品表)---- (2) Instrument (仪器条件)

*Scan mode (扫描方式) ---------- Excitation (激发波长扫描)

Emission(发射波长扫描) Synchronous(同步扫描)

*Data mode (数据方式)---------Fluorescence (荧光采集) Luminescence (发光采集) Phosphorescence(磷光采集) *EM WL (发射波长)------------输入范围 0nm, 200nm~900nm *EX Start WL (激发起始波长)---- 输入范围 200nm~890nm *EX End WL (激发终止波长)-----输入范围 210nm~900nm * EX WL (激发波长)-------------输入范围 0nm, 200nm~900nm *EM Start WL (发射起始波长)-----输入范围 200nm~890nm *EM End WL (发射终止波长)-----输入范围 210nm~900nm

*Scan speed (扫描速度)-----------30,60,240,1200,2400,12000,30000,60000nm/min

八挡可选(磷光扫描仅有三挡:30,60,240nm/min) *Delay (延迟时间)----------输入范围 0~9999秒(重复测量时仅对第一次测量有效) *EX Slit (激发单元狭缝)-----------1, 2.5 ,5, 10, 20,五挡可选。 *EM Slit (发射单元狭缝)-----------1, 2.5, 5, 10, 20五挡可选。 *PMT Voltage(光电管负高压)---------250V,400V, 700V, 950V四挡固定电压可选。 *󰂆 PMT Voltage (光电管负高压)---------当此项选定后,可在0~1000V之间任意设定。 *Response (响应速度)------------0.002,0.004,0.01,0.05,0.1,0.5,2.0,4.0,8.0秒和Auto

共有十挡可选。响应速度快峰形分辨率高,但噪音大。速度慢反之。通常选Auto。 *Corrected spectra (光谱校正)--------使用副标准光源附件进行长波长光谱校正。

*󰂆 shutter control(光闸控制)----------选定后,在不测样品时,激发光不能照射到样品上。 *Replicates (重复次数)------------可在1~99之间选择。(重复扫描用)

*Cycle time (循环间隔)------------两次扫描的间隔时间的设定,可在0~180分钟范围选择。 (3) Monitor (模拟监视)

*Y-Axis Max (纵轴标尺上限值)---- 一般样品预扫描后仪器自动赋值。 *Y-Axis Min (纵轴标尺上限值)----- 根据需要赋值。

*5 Open data processing window after data acquisition(测量后打开数据处理窗口)

一般选定5,测定结果可自动存储,便于后期处理。

*󰂆 Print report after data acquisition (数据采集后自动打印)--- 一般不选定。

*Overlay(重叠光谱图)-----可将光谱图重叠在监视画面上但重复扫描时不可设定。 (4) Processing (处理方法)

简介:此界面主要是对已测定的图谱根据用户的要求进行选择处理。

*󰂅 CAT (平均化)-------- 如选定则对重复测定的图谱进行平均处理。 *Processing choices (处理方法的选择)----- 有如下四种处理方法: 1) Savitsky-Golay Smooth( ) 2)Mean Smooth (平均平滑) 3) Median Smooth (中间平滑) 4) Derivative (微分求导) *Processing steps (处理步骤)---------- *Peak Finding (峰检出) ----------- 有如下三项内容:

1)Integration method (积分方法)----- a) Rectangnlar (矩形) ,b) Trapezoid (梯形)

c) Romberg(罗伯格方式)

2)Threshold (阈值)----------决定信号峰的舍取。赋值范围0.001-1000。

小于赋值的峰可以显示但不打印结果。

3)Sensitivity (灵敏度)------ 可改变放大器的放大倍数。一般设置为“1”。 (5) Report (报告格式)

*Output (输出)----------------------有如下三种格式可选:

① Print Report --------------------- 打印报告(常用格式) ② Use Microsoft Excel ------------将数据变换为微软Excel 格式。 ③ Use print generator sheet------ 利用变换器(附选件)打印图表。

*Orientati (打印方向)-------------横向 (Portrait),纵向 (Landscape) *Pintable items (打印选项)------ 有五种项目可选:

① Include data (打印数据) ② Include method (打印方法) ③ Include graph (打印图谱)

④ Include data listing (打印数据表)---如果选定此项后,会显示右侧的打印数据

列表[Include data listing]功能,有固定数据间隔[constant] 和选择数据间隔[Select data]两种类型的选择。 ⑤ Include peak table (打印峰值表)

*Printer Font (打印机字形)--------- 可改变报告的打印字形。

<四> 时间扫描的简单操作: (Time Scan)

简介:此扫描方式是EX,EM的波长均固定,仅观察样品随时间的变化。监视画面的 横坐标轴为时间单位。进入方法与波长扫描相同。

(1) General (常规)

*Measurement (测量方式)--------选择 Time Scan (时间扫描)

(其它内容与波长扫描相同,故从略。)

(2)Instrument (仪器条件)

*Data mode (数据方式)-----Fluorescence(荧光采集),Luminescence (发光采集)

Phosphorescence(磷光采集) Phosphorescence Life Time(磷光寿命采集) Phosphorescence Life Time (Shoet)(磷光短寿命采集)

注:如果选择磷光短寿命采集方式,时间单位为ms,采集时间自动设定为20ms。

*EX WL (激发波长)------ 0nm,200nm~900nm 设定 *EM WL (发射波长)------ 0nm,200nm~900nm 设定 *Time unit (时间单位)------ ------s和ms 两种单位可设定

*Scan (扫描周期)------ 当时间单位为sec时, 周期范围为:10~9000sec;

当时间单位为msec时,周期范围为:100~9999msec。

*EX Slit (激发单元狭缝)-----------1, 2.5 ,5, 10, 20,五挡可选。 *EM Slit (发射单元狭缝)-----------1, 2.5, 5, 10, 20五挡可选。

*PMT Voltage(光电管负高压)---------250V,400V, 700V, 950V四挡固定电压可选。 *󰂆 PMT Voltage (光电管负高压)---------当此项选定后,可在0~1000V之间任意设定。 *Response (响应速度)------------0.002,0.004,0.01,0.05,0.1,0.5,2.0,4.0,8.0秒共九档。 *󰂆 shutter control(光闸控制)----------选定后,在不测样品时,激发光不能照射到样品上。 *Replicates (重复次数)-----------可在1~99之间选择。(重复扫描用)

*Cycle time (循环间隔)-----------两次扫描的间隔时间的设定,可在0~180分间选择。 *󰂆 Stopped Flow (外部控制测量)---选定后,按下测量钮后,等待外部控制信号启动测量。 (3) Monitor (模拟监视)

*Y-Axis (纵轴上下限值)----- 一般样品预扫描后仪器自动赋值。 *X-Axis (横轴上下限值)------时间轴, 根据需要设定

(其它内容与波长扫描相同,故从略。)

(4) Processing (处理方法)----- 内容与波长扫描相同,从略 (5) Report (报告格式)---- 内容与波长扫描相同,从略

<五> 光度计法的简单操作: (PHOTOMETRY)

简 介:光度计法亦称浓度直读法,也称工作曲线法。利用配制的具有梯度的标准样品,先做出一条标准曲线,然后再反测未知样品。 (1) General (常规)

*Measurement (测量方式)-------选择 Photometry(光度计)

(其它内容与波长扫描相同,故从略。)

(2) Quantitation (定量条件)

*Quantitation type (测量类型)------ ① Wavelength (指定波长) ② Peak area(峰面积) ③ Peak height (峰高) ,④ Derivative(导数),⑤ Ratio (比率)。 *Calibration type (曲线校正类型)------- ① None(没有),② 1 st order (线性方程)

③ 2nd order (二次方程), ④ 3 rd order (三次方程),⑤ Segmented(折线) *Num ber of wavelengths (波长数)-----当曲线校正选择“None” 时波长数可以在1~6间选择,但再不能使用工作曲线法了。其他校正类型只能在1~3间选择,但此时的波长数并不表示在若干波长值下可以同时测定样品的吸光度,仅仅是对光谱图的一种处理方法。

*Concentration unit (浓度单位)---------- 根据需要格式设定 *Manual calibration(手动校正)------ 根据公式校正 *Force curve through zero (强制曲线归零)

*Digit after decimal point (小数有效位)---可以在1~3间赋值 (3)Instrument (仪器条件) *Data mode (数据方式)----------- Fluorescence (荧光采集), Luminescence (发光采集)

Phosphorescence(磷光采集) *Wavelength mode (波长方式)----- EX WL Fixed(激发波长固定)

EM WL Fixed(发射波长固定),Both WL Fixed(两側均固定)

*Fixed WL (波长选定)--------- 可以选定1–6个波长值,波长值赋值范围0nm,200~900nm。*EX Slit (激发单元狭缝)----- 设定范围2.5, 5.0, 10.0,nm

*EM Slit (发射单元狭缝)----- 设定范围2.5, 5.0, 10.0, 20.0nm *PMT Voltage (光电管高压)------- 设定范围 400V, 700V ,950V

*Auto statistic cal.number (自动统计计算)----可以进行平均值,标准偏差,

变异系数的计算。为此目的则要设置样品重复个数,此数在2-4000间选择。 *Replicates (重复次数)------ 重复测量次数,输入范围1-20。 *Integration Time (积分时间)----- 0.1~10.0秒间设定。

*Delay (延迟时间)-------启动后经过所设定的时间自动开始测量。 (4) Standards (标准样品表) *Number of Samples (标准样品数目的设定)------ 1~20间设定。

*Update (修定确认)-------当标样数确定后,点击此框后显示标样表以供赋值。 *Insert (插 入)---------- 点击此框可临时插入一个标样条目。 *Delete (删 除)--------- 点击此框可临时删除一个标样条目。 (5) Monitor (监视界面) 同前述相同,故从略。 (6) Report (报告形式)同前述相同,故从略。

注:标样测量点击Measure框,未知样品测量点击F4键,结束测量点击F9键。

<六> 三维扫描的简易操作 ( 3-D SCAN )

说 明:该功能的作用是,当某个样品不知最佳激发波长和最佳发射波长时,利用该功能 可自动快速地给出最佳条件。并可供其他特殊分析用。 (1)General (常规)

*Measurement (测量方式)-------------- 选择 3—D Scan 方式。 (2)Instrument (仪器条件)

*Data mode (数据方式)----------可选择Fluorescence荧光或Phosphorescence磷光。 *Chopping speed (切光器转速)---使用磷光测定时用,有10Hz,20Hz,40Hz三档可选。 *EX Start WL (激发起始波长)--------- 0nm, 200nm~850nm间选择。 *EX end WL (激发终止波长)-----------0nm, 200nm~900nm间选择。 *EX Sampling interval (激发扫描间距)----- 1~50nm间选择。

*EM Start WL (发射起始波长)-------- 0nm, 200nm~850nm间选择。 *EM end WL (发射终止波长)--------- 0nm, 200nm~900nm间选择。 *EM Sampling interval (发射扫描间距)---- 1~10nm间选择。

*Scan speed (扫描速度)-------- 30,60,240,1200,2400,12000,30000,60000nm/min八挡可选。 (磷光扫描仅有三挡:30,60,240nm/min)

(3)Monitor (模拟监视) ,(4) Processing (数据处理) (5) Processing (数据处理) 从略。

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