第ｌＯ期（总第２５９期） 农产品加工・学刊 Ｎｏ．１Ｏ ２０１１年１０月 Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｅｒｉｏｄｉｃａｌ ｏｆ Ｆａｒｍ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ０ｃｔ． 文章编号：１６７１—９６４６（２０１ １）１０—０１０１—０４ 气相色谱一质谱联用法测定植物油和鸡肉中抗氧化剂 ＢＨＡ ＢＨＴ和ＴＢＨＱ 魏树龙，寇立娟，梁春实，臧金海，蔡柳燕，马继军，王洪艳，周秀芝 （锦筑（烟台）食品研究开发有限公司，山东烟台２６４００６） 摘要：建立了气相色谱质谱联用（ＧＣ—ＭＳ）技术测定植物油和鸡肉中ＢＨＡ，ＢＨＴ和ＴＢＨＱ的分析方法。ＧＣ—ＭＳ测定 结果显示，ＢＨＡ，ＢＨＴ和ＴＢＨＱ的线性相关系数均大于０．９９９，定量下限为别为３，２，５ Ｉ￣ｇ／ｋｇ；此方法的精密度和加 标回收率良好。结果表明，该方法可以用植物油和鸡肉中３种抗氧剂同时分析。 关键词：ＢＨＡ；ＢＨＴ；ＴＢＨＱ；抗氧化剂；气质联用 中图分类号：０６５７．７ １ 文献标志码：Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊｉｓｓｎ．１６７１—９６４６（Ｘ）．２０１１．１０．０２７ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ＢＨＡ．ＢＨＴ ａｎｄ ＴＢＨＱ ｉｎ Ｆｏｏｄｓ ｂｙ Ｇａｓ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ Ｗｅｉ Ｓｈｕｌｏｎｇ，Ｋｏｕ Ｌｉｊｕ￣，Ｌｉａｎｇ Ｃｈｕｎｓｈｉ，Ｚａｎｇ Ｊｉｎｈａｉ，Ｃａｉ Ｌｉｕｙａｎ，Ｍａ Ｊｉｊｕｎ，Ｗａｎｇ Ｈｏｎｇｙａｎ，Ｚｈｏｕ Ｘｉｕｚｈｉ （Ｊｉｎｚｈｕ（Ｙａｎｔａｉ）Ｆｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｙａｎｔａｉ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ ２６４００６，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ＢＨＡ，ＢＨＴ ａｎｄ ＴＢＨＱ ｉｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ｂｙ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＧＣ—ＭＳ）．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｖｅ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ ｆｏｒ ＢＨＡ，ＢＨＴ ａｎｄ ＴＢＨＱ ａｒｅ ｂｏｔｈ ｏｖｅｒ ０．９９９， ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔｓ ａｒｅ ３，２ ａｎｄ ５ Ｉ￣ｇ／ｋｇ，ＲＳＤ ａｎｄ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ａｒｅ ｇｏｏｄ．Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ＢＨＡ，ＢＨＴ ａｎｄ ＴＢＨＱ ｉｎ ｆｏｏｄｓ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ＢＨＡ；ＢＨＴ；ＴＢＨＱ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ；ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ ＢＨＡ（叔丁基羟基茴香醚）、ＢＨＴ（２，６一二叔 提供；乙腈、异丙醇和乙醇，均为色谱级，ＣＮＷ公 丁基羟基甲苯）、ＴＢＨＱ（特丁基对苯二酚）是目前 司提供；ＢＨＡ，ＢＨＴ，ＴＢＨＱ标准品，德国Ｄｒ公司 我国比较常用于食品中的人工合成抗氧化剂，在油 提供。 脂、冷却肉贮存中起着重要作用，可以有效延缓脂 １．２标准溶液的配制 类氧化，但食用过多的抗氧化剂会对人体健康造成 准确称取１０ ｍｇ标准品于１０ ｍＬ容量瓶中，用质 一定的危害。 量浓度１００ ｍｇ／Ｌ抗坏血酸的甲醇溶液定容至１０ ｍＬ， 现行国家标准检测方法ＧＢ／Ｔ ２３３７３－－２００９ｍ中采 配制成标准储备液，使用时稀释用。 用气相色谱法测定食品中ＢＨＡ，ＢＨＴ和ＴＢＨＱ的含 １－３前处理操作 量，也有相关文献报道，采用气相色谱或液相色谱法 植物油：准确称取５ ｇ样品于２２５ ｍＬ的离心管 同时测定这３种抗氧化剂 。但是这些方法通常基质 中，加入５０ ｍＬ混合有机溶剂（乙腈、异丙醇与乙醇 影响大、灵敏度低。加之日本政府规定进口鸡肉中 体积比为２：１：１）充分混匀后，放人一２０—．５ ｃ《＝的 ＢＨＴ的残留限量为０．０２ ｍｇ／ｋｇ，因此急需开发一种灵 冰箱中冷却１ ｈ以上。提取上层后减压浓缩至１～ 敏度较高的方法。笔者在前人工作基础上开发了一种 ２ ｍＬ后，使用混合有机溶剂定容至５ ｍＬ。然后使用 快速、灵敏的ＢＨＡ，ＢＨＴ和ＴＢＨＱ的检测方法。 ０．４５ Ｉｘｍ的滤膜过滤，机器分析。 １材料与方法 鸡肉样品：准确称取５ ｇ样品于２２５ ｍＬ的离心管 中，加入１０ ｇ无水硫酸钠和５０ ｍＬ混合有机溶剂，均 １．１仪器与试剂 质２ ｍｉｎ后放入一２０—．５℃的冰箱中冷却１ ｈ以上， ＧＣ—ＭＳ ＱＰ ２０１０型气质联用仪，日本岛津公司 冷却后快速用滤纸过滤，滤纸上的残留物用１５ ｍＬ冰 收稿日期：２０１Ｉ－０５—１９ 作者简介：魏树龙（１９８０一），男，山东人，工程师，研究方向：食品安全与分析。 农产品加工・学刊 ２０１１年第１０期 箱中冷却的混合有机溶剂再次洗脱、过滤，合并滤 液。后续操作同植物油。 １．４色谱一质谱条件 色谱柱：ＤＢ＿＿５ｍｓ柱（３０ｍ×０２２５ｍｍ×０．２５ ｍ）。 柱温：８０℃保持１ ｍｉｎ，以６￣Ｃ／ｍｉｎ速度升至 ２００℃，保持１ ｍｉｎ，然后以２０℃／ｍｉｎ至２８０ ｏＣ， 保持１ ｍｉｎ。 氦气柱流量：１．２０ ｍＬ／ｍｉｎ，接触面温度：２５０℃， 离子源温度：２００℃，进样口温度：２６０℃。 ＢＨＡ定量离子ｍ／ｚ１６５，定眭离子为ｍ／ｚ１３７和１８０； ＢＨＴ定量离子ｍ／ｚ２０５，定性离子为ｍ／ｚ２２０，１４５ 和１７７； ２结果与讨论 ２．１ ＧＣ—ＭＳ分析方法的建立 由于样品提取液成分复杂，应选取合适的分析 条件使目标物和杂质分离，并使样品杂质完全流出 ＴＢＨＱ定量离子ｍ／ｚ１２３，定性离子为ｍ／ｚｌ５１和 ｌ６６： 色谱柱减少对其污染。经过大量测试，最终选取２．４ 中的分析条件。在此条件下，取１０ ｍｇ／Ｌ的ＢＨＡ， ＢＨＴ和ＴＢＨＱ标准溶液做Ｓｃａｎ分析。 ３种化合物的色谱图和质谱图见图１。 根据丰度比选择ＢＨＡ的离子碎片为ｍ／ｚ１６５＊， １３７和１８０，ＢＨＴ离子碎片为ｍ／ｚ２０５＊，２２０，１４５和 １７７，ＴＢＨＱ离子碎片为ｍ／ｚ１２３＊，１５１和１６６， 标 注为定量离子。 （×１ ０００ ｏｏｏ） ＢＨＡ的总离子流图 ＢＨＡ的棒状图 ＢＨＴ的总离子流图 ＢＨＴ的棒状图 ＴＢＨＱ的总离子流图 ＴＢＨＱ的棒状图 图１ ３种化合物的色谱图和质谱 ２０１１年第１０期 魏树龙，等：气相色谱一质谱联用法测定植物油和鸡肉中抗氧 里旦垒！旦 ！塑！里旦 ： ： ２．２前处理分析方法的确定 ＢＨＡ，ＢＨＴ和ＴＢＨＱ三种化合物的相关系数 均大 前处理方法参照日本药学会编 生试验法注 于０．９９；０．０１ ｍｇ／Ｌ的标准溶液出峰良好。 解》２０１０版，此方法主要应用于植物油、黄油等； ０．０１ ｍｇ／Ｌ标准溶液的谱图见图２。 本试验将此方法成功应用于鸡肉样品。 通过１０倍信噪比计算得出ＢＨＡ，ＢＨＴ和ＴＢＨＱ ２．３线性及定量下限 的仪器定量下限为３，２，５ ｇ，ＩＪ，由于前处理过程 分别用含抗坏血酸的甲醇配制质量浓度 未进行样品浓缩，因此方法的定量下限为３，２， ０．Ｏ１，０．１，１，１０ ｍｇ／Ｌ混合标准溶液，每个质量浓 ５ Ｉｘｇ／ｋｇ，可以满足出口样品关于抗氧化剂的残留限 度分析３针，数据稳定性良好，分析线性良好， 量要求。 图２ ０．０１ ｒｎｇ／Ｌ标准溶液的谱图 ２．４ 样品测定结果及回收率试验 结果较好。测定结果表明，大豆色拉油中有ＢＨＡ， 测定了大豆色拉油和鸡肉样品的添加回收情况 ＴＢＨＱ检出，质量分数分别为０．０１２，０．０２１ ｍｇ／ｋｇ， （ｎ＝３），样品中添加量为０．２ ｍｇ／ｋｇ，测定样品结果及 鸡肉样品中有ＢＨＴ检出，质量分数为０．０２７ ｍｇ／ｋｇ， 回收率。 表１样品中ＢＨＡ，ＢＨＴ和ＴＢＨＱ的测定结果／ｍｇ・ｋｇ 样品中ＢＨＡ，ＢＨＴ和ＴＢＨＱ的测定结果见表１， 回收率测定结果见表２。 由于基质效应较大，导致了色拉油中ＴＢＨＱ的 回收率较高，但从表２可以看出，其他添加回收率 表２ 回收率测定结果 ＢＨＡ ＢＨＴ ＴＢＨＱ ” 平均值ＲＳＤ 平均值 ＲＳＤ 平均值 ＲＳＤ 色拉油 １０４ １１１ １１０ １０８ ３．４ ８９ ９７ ９７ ９４ ４．９ ｌ３６ １５１ １６９ １５２ １Ｏ．９ 鸡肉 ７３ ７４ ７５ ７４ １．８ ７５ ７８ ７３ ７６ ３－３ ｌ１２ １０７ １ｌ２ １１０ ２．６ 其他未检出。 京：中国标准出版社，２００９． 色拉油和鸡肉样品及回收谱图见图３。 【２１ 余涛，叶坚．高效液相色谱同时测定食品中ＢＨＡ、ＢＨＴ、 ＴＢＨＱ方法的研究［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００７，１７ ３结论 （１２）：２ １３６—２ １３８． 试验结果表明，本方法灵敏度高、检出限低且 【３】 穆同娜，许华，李伟．凝胶渗透色谱—气相色谱法测定 稳定性好，可以应用于植物油和鸡肉样品中ＢＨＡ， 食用油脂中抗氧化剂ＢＨＡ、ＢＨＴ『Ｊ１．食品工业科技， ２００７（１）：２２８—２３１． ＢＨＴ和ＴＢＨＱ ３种抗氧化剂的同时分析检测。 【４】 叶坚，余涛．气相色谱法同时测定食品中ＢＨＡ、ＢＨＴ、 参考文献： ＴＢＨ ｌＪ１．中国卫生检验杂志，２００８，１８（６）：１ ０８２— １ ０８４． 【１】 国家食品质量安全监督检验中心．ＧＢ／Ｔ ２３３７３—２００９．食品 【５】 苏广健，李虹红．油脂中ＴＢＨＱ、ＰＧ、ＯＧ、ＢＨＡ和 中抗氧化剂叔丁基羟基茴香醚（ＢＨＡ）、二丁基羟基甲 ＢＨＴ的同时检测研究【Ｊ］．现代食品科技，２０１０，２６ 苯（ＢＨＴ）、特丁基对苯二酚（ＴＢＨＱ）的测定【Ｓ］．北 （１）：１ １６０—１ １６２． 农产品加工・学刊 ４ ２ ＢＨＡ．色拉油空白 ＢＨＴ．色拉油空白 ＢＨＡ．色拉油回收 ＢＨＴ．色拉油回收ＢＨＡ．鸡肉空白 ＢＨＴ．鸡肉空白 ＢＨＡ．鸡肉回收 ＢＨＴ．鸡肉回收 图３ 色拉油和鸡肉样品及回收谱图 ２０１１年第ｌＯ期 ＴＢＨＱ一色拉油空白 ＴＢＨＱ一色拉油回收 ＴＢＨＱ－鸡肉空白 ７ ５ ５ ０ ２ ５ １ ５ ５ １６ ０ ＴＢＨＱ一鸡肉回收