基于纳米脂质体的马卡制剂的

文章编号：（）1000-2472200505-0075-04

湖南大学学报（自然科学版）

（N）JournalofHunanUniversitaturalSciencesy，Vol.32No.5

Oct.2005

基于纳米脂质体的马卡制剂的制备及其性质研究✷

王柯敏，郑明彬，吴

萍，何晓晓，林

霞，龚

萍，陈小洪

（湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室，湖南省生物纳米技术工程中心，

湖南大学生物医学工程中心，湖南大学化学化工学院，湖南长沙4）10082

摘要：以大豆磷脂为载体，以葡萄糖液作为分散介质，采用旋转薄膜蒸发法，发展了一种

新的马卡纳米制剂制备方法.考察了该方法制备的不同药脂比的马卡纳米制剂的粒径及其Zeta

电位，并对马卡的包封率、制备的马卡纳米制剂的胶体溶液物理稳定性以及冻干粉剂有关性质进行了研究.结果表明，不同药脂比的马卡制剂的平均粒径在100~150nm之间，Zeta电位均小于-通过该方法获得的马卡纳米制剂的包封率高，其胶体溶液具有很好的物理稳定30mV；性，其粒径未发生显著变化，而且冻干粉剂的水再分散性较好.30d内，

关键词：马卡；纳米颗粒；制剂

中图分类号：R944.1

文献标识码：A

StudnthePrearationandProertiesofMacayopp

PharmaceuticsBasedonLiidNanoarticlespp

，，WUP，，WANGKe-minZHENGMin-bininHEXiao-xiaogg

，，LINXiaGONGPinCHENXiao-hongg

（S／；，；tateKeaboratorfChemoBiosensinandChemometricsEnineerinenterforBiomedicineHunanUnivyLyogggC

，，）HunanProvincialEnineerinesearchCenterforBio-NanotechnoloChansha410082ChinaggRgyg

：MAbstractacanano-harmaceuticswasrearedbtherotar-filmevaorationmethodwithsoalecithinpppyypyasthecarrierandglucosesolutionasthedisersionmedium.TheparticlesizeandZetapotentialofthemacap／nano-harmaceuticswithdifferentmacaliosomeweihtratiowerestudied.Theentramentefficiencndppgpyahsiccalstabilitfthemacanano-harmaceuticswereinvestiated.Theproertiesoffreeze-driedmacanano-pyyopgp

harmaceuticswerealsostudied.Theresultsshowedthatthemeansizeofthemacanano-harmaceuticswas100pp~150nm，andtheZetapotentialwaslessthan-30mV.Thismacapharmaceuticshadhihentramenteffi-gp；ciencndhsicalstabilitoftheircolloidalsolutionwassatisfactorandfreeze-driedmacanano-harmaceuticsyapyyypcouldberesusendedeasilinwater.py

：；；Keordsmacananoarticlesharmaceuticsppyw

植物提取物马卡是从南美安第斯高山地区盛产的一种被称为安第斯人参的名贵药材马卡根中，提

取出来的植物生理活性成分.马卡可使体力增强、精力充沛、消除焦虑、提高性功能，其保健作用在全球

✷收稿日期：2005-03-26

基金项目：国家自然科学基金资助项目（）；国家重点基础研究发展规划资助项目（）；国家科技攻关计划资助201350102002CB513100-10项目（）；国家科技发展规划资助项目（）；科技部国际合作重点资助项目（）；国家自然科学2003BA310A162003AA3022502003DF000039基金资助项目（）20405005作者简介：王柯敏（，男，湖南宁乡人，湖南大学教授，博士生导师1957-）

：E-mailkmwan@hnu.cng

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［］1-3范围内受到青睐但是由于马卡的水溶性差、.解，于旋转蒸发器上减压蒸发除去氯仿和乙醇.加入／60gL葡萄糖液10mL作为分散介质得脂质体初

混液，冰水浴超声1，制备马卡与大豆磷脂初0min始质量比（药脂比）分别为1，，:101:51:2的马卡纳米制剂.为设计空白对照的需要，同时本文还制备了空白的脂质体胶体溶液做空白对照.

1.2.2马卡纳米制剂的表征

取少许制剂混悬液适量加水稀释，滴于云母片上，自然干燥后，利用原子力显微镜表征纳米颗粒形及生物利用度低，严重影响了其在医药领域的广泛应用.目前尚没有研制出理想的马卡药物制剂.在解决脂溶性药物这一问题常采用的方法是将脂溶性药物溶于油中，再添加除油剂，以便油溶液进入人体后在水环境中溶解.但是该方法使用的油和除油剂都

［］4有可能引发人体的过敏反应等副作用因此，寻.

找和研究温和、毒副作用小的药物剂型来改善马卡的水溶性，并提高其生物利用度具有非常重要的意义.

纳米脂质体是极具开发潜力的药物载体，其作为难溶于水的药物输送载体具有许多优越性：纳米脂质体有双分子层所形成疏水的腔，有亲水性的外帽，可将难溶药物以纳米级包埋于脂质体形成的疏水腔内，使得药物粒子溶解度增大；能促进被包裹的难吸收性的药物在肠道的传递，提高其生物利用度；而且纳米脂质体制备简单，可多途径给药，易于规模

化生产，因此其应用日益受到重视［5-7］.

本文以大豆磷脂为载体，以葡萄糖液作为分散介质，采用旋转薄膜蒸发法，发展了一种简便易行的马卡纳米制剂制备新方法，考察了按不同药脂比制备的马卡纳米制剂的粒径及其Zeta电位，同时对马卡纳米制剂的包封率、马卡纳米制剂胶体溶液的物理稳定性以及冻干粉剂的相关性质进行了研究.

实验部分

.1仪器与试剂

SPA-400型原子力显微镜（日本精工公司）；000HS型Zetasizer分析仪（英国Malvern公司）

；C130型探头式超声处理机（美国onics&Materials公司）；LGJ-10型冷冻干燥机（四环科学仪器厂）；DU-800型紫外可见分光光度计Beckman公司）；RV06-ML型旋转蒸发仪（德国Ika公司）；马卡（美国PureWorldBotanicals公司赠送）；大豆磷脂（湖南农业大学赠送）；胆固醇（生化试剂，北京鼎国生物技术发展中心）；SephadexG-5（Pharmacia）；其余试剂均为分析纯，实验中用水均为超纯水.

.2实验方法.2.1以脂质体作为载体的马卡纳米制剂的制备

参照文献［8］方法，并加以改进，称取适量马卡、胆固醇80mg、大豆磷脂200mg置于圆底烧瓶中，加入体积比为5:1的氯仿与乙醇混合液30mL溶

貌.载药的纳米制剂的平均粒径、粒径分布、多分散系数以及Zeta电位通过MalvrenZetasizer3000HS分析仪测定.

1.2.3包封率的测定

用甲醇配制150，100，50，10，2和0.5μg／mL马卡溶液，在353nm处测量吸光度值，以吸光度对应的浓度线性回归，绘制标准曲线，得出标准曲线方程.

分别移取按药脂比1:10，1:5，1:2制备的马卡纳米制剂1mL过SephadexG-75柱分离（以超纯水为洗脱剂），收集脂质体流分，加入甲醇溶解并定容，测定吸光度值（条件同标准曲线），计算马卡含量.另取对应的马卡纳米制剂1mL直接加入甲醇溶解后测定马卡的含量.两者相除得包封率.

1.2.4马卡纳米制剂的稳定性研究将药脂比分别为1:10，1:5，1:2制备的马卡纳米制剂以及空白的纳米脂质体于4࠷密封储存30d.每隔10d检查纳米制剂的外观形态、平均粒径和粒度分布.

1.2.5马卡纳米制剂的冻干粉剂相关性质的研究

取药脂比分别为1:10，1:5，1:2制备的马卡纳米制剂及空白的纳米脂质体各2mL于4࠷的冰箱中预冻30min，置于冷冻干燥机中，在真空状态以-54࠷下冻干成粉末状.

取冻干粉剂分别加入2mL的超纯水，

振摇，考察再分散能力并测量平均粒径；于冰水浴重新超声10min，测量平均粒径；对比纳米制剂冻干前、冻干后以及重新超声后的平均粒径.

2结果与讨论

2.1以脂质体作为载体的马卡纳米制剂的表征

由表1中看出，随着药脂比的增加，纳米制剂的多分散系数没有明显变化；而纳米制剂的平均粒径由空白脂质体的147.9nm逐渐减小到102.8nm，

113VS（德国711第5期

王柯敏等：基于纳米脂质体的马卡制剂的制备及其性质研究

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其相应的Zeta电位由-49.4mV增大到-30.2这是因为作为核心的马卡带有正电荷的成分，mV.

被带负电荷的脂质体包埋后，由于异性电荷的静电吸引作用，带正电荷的内核与带负电荷的脂质体外壳吸附紧密，使得载药的马卡纳米颗粒的粒径比空白脂质体变小；同时随着马卡的相对量的增加，核心的正电荷增加，而负电荷的量保持不变，整个纳米颗粒Z而且单个纳米颗粒内正负电荷静eta电位增大，电吸引作用增强，因而载药纳米制剂的平均粒径随制剂稳定性较好.通过对储存30d以后的不同药脂比的马卡纳米制剂的平均粒径进行测量，结果表明，平均粒径基本无明显的变化（见图3）；新制的药脂比为1:5的纳米制剂经过30d储存以后的粒径分布没有显著的变化（见图4），这说明马卡被纳米脂质体包埋后的胶体溶液能在较长的时间内保持良好的物理稳定性，因而有利于开发成溶液状的制剂产品.

着药脂比的增加而逐渐减小.

表1不同药脂比的马卡纳米制剂的平均粒径、

多分散系数以及Zeta电位

ab.1Meansize，polydispersityindexandZetap

otentialofLacanano-pharLaceuticsatdifferentLaca／liposoLeweig

htratio药脂比平均粒径／nm多分散系数Zeta电位／mV空白147.9+2.00.353+0.097-49.4+3.21:10136.6+5.70.367+0.103-44.5+1.61:5126.1+4.60.388+0.055-37.3+3.31:2

102.8+6.8

0.356+0.071

-30.2+2.7

按药脂比为1：5制备马卡纳米制剂，从其原子力图（图1（a））可以看出，其颗粒呈完整的球形，粒径较均匀，分散性好.粒径分布如图1（b）所示，制剂的平均粒径为126.1nm.小于90nm占97%，其中5~55nm占71%，

颗粒的大小基本上与原子力图的结果吻合.马卡纳米制剂混悬液的Zeta电位为-7.3mV，纳米颗粒表面所带负电荷的电荷密度较高，颗粒之间有足够强的静电排斥力抑制颗粒的团

聚［9］，从而可以保持溶液稳定.

.2包封率的测定

脂质体包封率指的是被类脂双层膜所包封的成分占悬浮液中总成分的百分率.药物的高脂溶性使之易于插入双分子层中，并不易渗漏或渗漏极为缓

慢，因而脂溶性的物质包封率较高［10］.

我们的实验也证明了这一点.图2可以看出，药脂比为1:10，1:，1:2制得的马卡纳米制剂的包封率较高，

分别为7.5%，95.5%和85.1%..3马卡纳米制剂的稳定性研究

分别考察了生理盐水、PBS、葡萄糖水溶液作为分散介质的效果.采用生理盐水和PBS为分散介质的马卡纳米制剂放置后会分层、混浊，而以60g／L葡萄糖水溶液为分散介质在4࠷条件下放置30d马卡纳米制剂未见分层、絮凝，外观和色泽均无明显变化.说明以葡萄糖水溶液为分散介质的马卡纳米

图1药脂比为1:5的马卡纳米

制剂的原子力图（）和粒径分布图（Fig.1AFMimag

e（a）aandsizedistribution（b

）b）ofmacanano-pharmaceuticsat1:5initialmaca／liposomeweig

htratio图2不同药脂比的马卡纳米制剂的包封率

Fig.2Entrapmentefficiencyofmacanano-p

harmaceuticsatdifferentinitialmaca／liposomeweig

htratioT33259278

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图3不同药脂比的马卡纳米制剂的平均粒径的变化Fig.3Meansizevariatioatdifferentmaca／nofmacanano-p

harmaceuticsliposomeweig

htratio图4药脂比为1：5的马卡纳米制剂的粒径分布变化

Fig

.4Thesizedistributionvariationofmacanano-p

harmaceuticsat1:5initialmaca／liposomeweightratio.4马卡纳米制剂冻干粉剂相关性质的研究

冻干粉剂的水再分散性是评价纳米制剂的主要指标.不同药脂比的马卡纳米制剂冻干粉剂中分别加入超纯水，振摇后，形成均匀的淡黄色胶体溶液，外观上观察，水再分散性良好，对冻干粉剂用超纯水重新分散后的平均粒径进行测量，其平均粒径比新制马卡纳米制剂的都要大一些（见图5）；然而分别经过重新超声后其平均粒径大小与新制的马卡纳米制剂相近，并且恢复了随马卡的质量增加而逐渐变小的趋势.推测原因可能是冻干造成颗粒间的团聚使其平均粒径增大；而脂质体在强烈的超声作用下，重新分散并进行组装，构造新的纳米颗粒，消除了颗粒间的团聚现象.

结

论

马卡具有较强的亲脂性，以脂质体作为载体制成纳米制剂是增强其在水中溶解度的良好方法.本文以脂质体作为载体，采用旋转薄膜蒸发法，发展了

一种制备性质良好的马卡制剂的新方法.通过该方法制备的马卡纳米制剂的包封率高，其胶体溶液具有良好的物理稳定性，其冻干粉剂的水再分散性较好；并且在制备过程中不需经过离心等操作，马卡损失量少，产物性质优良，为难溶于水的植物提取物马卡下游产品的生产开发提供了一种新的途径.

图重新超声后的平均粒径的变化

5马卡纳米制剂经过冻干和

Fig.5Meansizevariationofmacanano-p

harmaceuticsafterfreeze-drying

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