指导脑脊液（CSF)常规测定。 2． 方法原理
2.1脑脊液是存在于脑室及蛛网膜下腔中的无色透明液体。由于脉络丛上皮细胞对血浆 中各种物质的选择性分泌和超滤作用，血浆中各种成分对血脑屏障的通透性各有不 同。其中最易通过血脑屏障的是氯、钠、镁离子及乙醇;其次为清蛋白、葡萄糖、钙 离子、乳酸、氨基酸、尿素和肌酐;纤维蛋白原、补体、抗体、某些药物、胆红素、 胆固醇则极难或不能通过。中枢神经系统任何部位发生器质性病变时，如感染、炎 症、肿瘤、外伤、水肿和阻塞等都可以引起脑脊液成分的改变。通过对脑脊液理学 检查，显微镜检查、化学和免疫学检查及脑脊液病原学检查，可对疾病的诊断、治 疗和预后判断提供依据。
2.2脑脊液（CSF）常规测定内容包括:颜色、性状、有核细胞计数、红细胞计数、潘 氏试验、细菌等。
2.3潘氏（pandys)试验：CSF中的球蛋白与苯酚结合，形成不溶性的蛋白盐而产生白 色混浊或沉淀。
3． 方法性能参数（如线性、检出限、测量区间、不确定度、准确性、精密度、灵敏度
1 2 3 4 5 和特
颜色（COLOR) 透明度（clearity) 凝固性（coagulability） 6 7 8 中性粒细胞（NE) 淋巴细胞（LY） 单核细胞（MO） 潘氏试验（pandys test） 脑脊液有核细胞计数（CSF—NUCL) 9 脑脊液红细胞计数（CSF—RBC) 4.标本类型
4.1标本类型：新鲜CSF。
4.2标本拒收条件：拒收延迟室温2h、冷藏6h未送达标本。
4.3标本保存与稳定性：一般室温1h内完成检验，久置可致细胞破坏，影响细胞计数
及分类检查。
5.要求的容器、防腐剂或添加物、仪器、试剂或分析系统
5.1标本容器：BD无促凝成分红头管或洁净干燥带盖玻璃管。 5.2试剂 生理盐水 白细胞稀释液 刘氏快速瑞氏染色液 0.9%Nacl溶液 1%冰乙酸（1ml分析纯冰醋酸+蒸馏水至100ml) A液：曙红、甲醇 B液：亚甲蓝 潘氏试剂 10%苯酚溶液（纯苯酚10ml+蒸馏水至100ml） 5.2.2 试剂存储和有效期： 试剂名称 生理盐水 冰乙酸 1%乙酸 10%苯酚溶液 刘氏快速瑞氏染色液 存储条件 有效期 开瓶有效期 位置 室温 室温 冷藏 室温 室温 1年 2年 1年 1年 2年 1年 1年 1年 1年 6个月 存货柜/血常规室操作台 药品柜 试剂冰箱 药品柜 药品柜/染色操作台 5.3仪器：OLYMPUS光学显微镜，血细胞计数板。 6. 校准程序 （计量学溯源性）
不适用
7. 质量控制，控制品使用水平和频率，允许限的纠正措施
不适用 8. 程序步骤
8.1一般性状检查：轻轻混匀CSF，观察量、颜色、有无凝块和透明度（一般细胞数≥300
/μl个时或蛋白增加可产生混浊），并记录。 8.2显微镜检查
（1）清或微混标本：a) 混匀后直接冲入计数池，计数四角四大方格内细胞总
数（包括RBC，NUCL）。
b) 用白细胞稀释液作1：1稀释，计数有核细胞数 c) 红细胞数＝细胞总数－有核细胞数
（当白细胞数≥30个/μl时，在白细胞计数池中直接分类至少50个白细胞）
（2）混浊及以上标本：
外观 稀释 样本量 稀释液/溶解剂 a)稀释
标本：粉色/轻度混浊 1:20 20μl 380μl 于清洁
1:50 10μl 490μl 试管中红色/混浊 按上表带血量极高/极度混浊 1:100 10μl 990μl 进行稀
释，用以计数细胞总数；
b)溶解RBC：于清洁试管中按上表进行稀释，用以计数有核细胞数； c)冲池；计数
d)红细胞数=细胞总数－有核细胞数 8.2.2 有凝块或粘稠标本：
（1）用吸管旋转并挤压凝块，挤出里面的液体及细胞。 （2）2000rpm×5min离心，分离上清液和沉渣。
（3）混匀沉渣，涂片，用高倍镜观察NUCL、RBC。 （4）报告每高倍镜视野的红细胞和有核细胞数。 ×5min离心,吸出上
清液于另一试管，并在试管上编号。 6
/μl时进行操作。将沉渣混匀涂片，厚薄根据有核细
胞数而定，血性标本可考虑推片。待干后，瑞氏染色进行分类（分
100个NUCL）；如见有不能分类细胞或怀疑有恶性细胞时，应请示
上级主管，由有经验的上级主管进行分析，并在报告时另行描述报
告，如脑膜白血病或肿瘤细胞等。 8.3潘氏试验
取小试管一支，加入10%的石碳酸水溶液约5ml，用一次性吸管
加一滴CSF上清液立即在黑色背景灯照下观察结果。 弱阳性（±）：微呈白雾状，在黑色背景下才能看到。
阳性（+）：灰白色云雾状。 （2+）：白色浑浊。 （3+)：白色浓絮状沉淀。 （4+）：白色凝块。 9. 计算结果原理 9.1颜色
为区别蛛网膜下腔出血和穿刺损伤应注意：
(1)离心沉淀后：如上层液体呈黄色，隐血试验阳性，多为蛛网膜下腔出
血，且出血时间已经超过4小时。如上层液体澄清无色，红细胞均沉
管底，多为穿刺出血或因病变所致的新鲜出血。
（2）红细胞皱缩，不仅见于陈旧性出血，在穿刺损伤引起出血时也可看
到，因脑脊液渗透压较血浆高所致。 脑膜炎、重症如核黄疸等引起。 素血症和脓性脑脊液。
9.2透明度：脑脊液混浊程度与细胞数量有关，脑脊液中细胞数超过300×10/L时，可出现
混浊。蛋白质含量增加或含大量微生物也可产生混浊。
9.3凝固性：结核性脑膜炎静置12-24小时后，标本表面有纤细的网膜形成。蛛网膜下腔
梗阻时，可产生黄色胶冻状。
9.4潘氏试验：有脑组织和脑脊髓膜疾患时常成阳性反应如化脓性脑脊髓膜炎、梅毒性中
枢神经系统疾病、脊髓灰质炎、流行性脑炎等。脑出血时多呈阳性反应，
如外伤性血液混入脑脊液中，亦呈阳性反应。 9.5细胞分类：
性质有关。 常以淋巴细胞为主。 10. 生物参考区间
颜色（COLOR) 无色 透明度透明 （clearity) 凝固性（coagulability） 无凝块 潘氏试验（pandys 阴性OR弱阳性 test） 有核细胞计数 （CSF—NUCL) 成人（0-8）×106/L 中性粒细胞（NE) 成人（0-6%） 儿童（0-15）×106/L 新生儿（0-8%） 新生儿（0-30）×106/L 淋巴细胞（LY） 成人（40-80%） 新生儿（5-35%） 红细胞计数（CSF—RBC) 0×10/L 单核细胞（MO） 成人（15-45%） 新生儿（50-90%） （正常脑脊液中白细胞主要为淋巴细胞、单核细胞，之比约为7:3，可含极少中性粒细
胞）。
11.警告值、危急值（适用时） 12.检验结果可报告区间
13.对超出可报告范围的结果的处理 13.1如检到细菌时应建议培养确认。
13.2有不能分类细胞，应请示上级主管，并另行描述报告，如脑膜白血病或肿瘤细胞。
14.实验室解释 15.安全防护措施
15.1所有样品按具有潜在传染性的标本处理。
15.2测定完成后，上清液及沉渣试管于2000mg/L有效氯消毒液浸泡4小时以上，倒入
医疗废物下水槽，由医院统一消毒处理；塑料试管或容器等容器等医疗废弃物倒入
黄色医疗垃圾袋，贴上标签并封口，由医院统一销毁处理。
15.3原液保存48小时或以上，倒入黄色医疗垃圾袋，贴上标签并封口，由医院统一销
毁处理，并做记录。 16.最常见的误差源。
手工操作，主观性较强，细胞鉴别需要有经验。
17.方法的局限性（如乳糜血、溶血、高胆红素血等干扰影响、交叉反应等） 18.参考文献
18.1全国临床检验操作规程-第三版 19.有关引用程序与文件 20.SOP涉及的记录与表格
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