应用气相色谱法同时测定食品中三种对羟基苯甲酸酯类的含量 摘要：本文主要研究了运用气相色谱法同时测 电），ＡＬ２０４电子天平（梅特勒一托利多仪器（上海） 有限公司），ＢＵＣＨＩ Ｒ２１０旋转蒸发仪瑞士Ｂｕｃｈｉ公 司。对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯和对羟 基苯甲酸丙酯标准对照品（含量 ９９．８％），重蒸乙 醚，无水乙醇（分析纯），１：１盐酸，饱和氯化钠溶 定食品中对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯和 对羟基苯甲酸丙酯的含量。采用岛津ＧＣ－２０１０Ｐｌｕｓ 气相色谱仪，配Ｒｔｘ一５（３０ ｍ×０．３２ １ＴＬＩＴＩ Ｘ ０．２５ Ｉ＊ｍ１毛细管柱分离．并用氢火焰检测器检测。 其结果表明：对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙 酯和对羟基苯甲酸丙酯的回收率均在８８．９７％～ ９８．９８％之间．不同的方法其精密度ＲＳＤ值均在 液，Ｉ ｇ／１００ ｍｌ碳酸氢钠溶液。 １．３主要检测对象。酱腌菜类食品中对羟基苯甲 酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯的 １０％以下。 关键词：气相色谱法；对羟基苯甲酸甲酯；对 羟基苯甲酸乙酯：对羟基苯甲酸丙酯 在任何一种食品添加剂中，防腐剂都是其重要 的组成部分。众所周知，防腐剂的主要作用就是抑 制食品氧化变质和腐败，延长食品储存期和保鲜 期。对羟基苯甲酸酯是一类新一代高效低毒消毒杀 菌防腐剂，与苯甲酸和山梨酸及其盐类相比，它具 有抗菌能力强、应用ｐＨ范围广、用量少等优点， 并且使用安全，经济方便，对人体刺激较小【”。目 前广泛应用于目化、医药、食品、饲料及各种工业 防腐等方面ｌ２Ｊ。 对羟基苯甲酸酯类在世界范围内得到了各国及 国际性官方组织的认可。美国食品药品管理局（ｕｓ ＦＤＡ）批准对羟基苯甲酸酯类可以作为化妆品防腐 剂使用。欧盟认为低碳链的对羟基苯甲酸酯类（又 称尼泊金酯１是安全的，如尼泊金甲酯、乙酯和丙 酯限餐≤０．４％。在我国食品工业中，对羟基苯甲酸 酯类主要以对羟基苯甲酸甲酯、乙酯和丙酯为主。 参照国家标准ＧＢ ２７６０．２０１１规定，酱及酱制品类 食品中最大使用鼍为０．２５ ｇ，ｋｇ（以对羟基苯甲酸计）， 因此需要对加有对羟基苯甲酸酯类的产品进行检测 本文采用气相色谱法［４１同时测定食品中对羟基 苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙 酯的含量，通过在酸性条件和高无机盐离子强度 下，用乙醚萃取剂提取，洗涤净化提取液，浓缩定 容，过滤进样分析 。 １ 试验材料与仪器 １．１试验样品。阴性样品：萝卜干和榨菜，其中 未添加三种对羟基苯甲酸酯类。 １．２仪器和试剂。阳性样品：甜面酱，其中含有 对羟基苯甲酸丙酯。岛津ＧＣ一２０１０ Ｐｌｕｓ气相色谱 仪：Ｖｏｒｔｅｘ—ＧｅｎｉｅＲ２２涡旋混合器ｆ美国Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ ｉｎ— ｄｕｓｔｒｉｅｓ），Ｂｉｏｆｕｇｅ Ｓｔｒａｔｏｓ高速冷冻离心机（美国热 ・６６・ 含量。 ２试验方法 ２．１ 标准储备液的配制。用电子天平精确称量对 羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲 酸丙酯标准品各０．０５ ｇ于５０ ｍｌ容量瓶中，用无水 乙醇稀释定容至５０ ｍｌ，然后摇匀，配制浓度为１ ｍｇ／ｍｌ的三种对羟基苯甲酸酯类混合标准储备液， 放置冰箱中保存。 ２．２样品处理。取５．００ ｇ均匀性好的阴性样品放 入具塞离心管中，加１ ｍｌ １：１盐酸溶液酸化，再 加入１０ ｍｌ饱和氯化钠溶液，摇匀，依次用４Ｏ ｍｌ 的乙醚提取４次，每次在涡旋混合器上涡旋２ ｍｉｎ， 充分提取，然后放置在高速离心机中离心，防止样 品乳化，节约静置时间，重复提取离心４次，弃去 水层，将乙醚层在２５０ ｍｌ的分液漏斗中合并。在 分液漏斗中加入１０ ｍｌ的饱和氯化钠溶液洗涤１ 次，弃去水层，然后以１ ｇ／１００ ｍｌ的碳酸氢钠溶液 洗涤３次，再次弃去水层。用滤纸吸去漏斗颈部水 分，填充脱脂棉，加约１０ ｇ无水硫酸钠干燥，在 室温下放置３０ ｍｉｎ后，转移到２５０ ｍｌ平底烧瓶中， 用旋转蒸发仪浓缩以除去残留的溶剂，通过吹入氮 气吹至近干后，用５ ｍｌ无水乙醇定容，用０．２２ ｍ 的有机滤头过滤，装入２ ｍｌ进样小瓶，待测。 ２．３ 色谱条件。色谱柱：Ｒｔｘ一５（Ｃｒｏｓｓｂｏｎｄ ５％ ｄｉｐｈｅｎｙｌ／９５％ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｐｏｌｙｓｉｌｏｘａｎｅ）（３０ ｍ×０．３２ １１１１１１×０．２５ ｔｚｍ）载气为氮气，纯度 ９９．９９９％，流 量为１．０ ｍｌ／ｍｉｎ；进样口温度：２２０℃，检测器温 度：２８０℃；采用程序升温，初始温度１２０℃，保 持３ ｒａｉｎ，以２Ｏ℃／ｍｉｎ升至２５０℃，保持５ ｍｉｎ， 再以５０℃／ｍｉｎ升至２８０℃，保持５ ｍｉｎ。分流进 样，分流比为１０：１。 ２．４工作曲线法测定含量。分别吸取标准液１ １ 进样，以浓度为横坐标、峰高为纵坐标绘制标准曲 线。同时进样１ ｐ．１样品溶液，测定峰高，与标准 曲线比较定量。对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸 乙酯和对羟基苯甲酸丙酯的标样色谱图见图１。 重量型塑苎苎！竺亘堕塑些竺查矍 塑塑墼 １一对羟基苯甲酸甲酯（９．２６６ ｍｉｎ）；２一对羟基苯甲酸乙酯 （１ｏ．５３０ ｍｉｎ１；３一对羟基苯甲酸丙酯（１２．９５６ ｍｉｎ） ．．５ｔ帅ｌⅧ０ 图１ 对羟基苯甲酸甲酯对羟基苯甲酸乙酯 匾ｌ 对羟基苯甲酸丙酯的标样图谱 掌４０ｌｍ００ ３￣１０００ ３结果与讨论 ｍ．ＩＩＩＩ’ ３．１ 标准曲线绘制。用移液枪准确吸取标准储备 １０咖Ｏ０ 液５０ ｌ、ｌ００ ｌ、２００ ｌ、４００；ｘｌ、８００ ｌ，分另０ 用无水乙醇定容至ｌ ｍｌ，进样１ ｌ，相当于每毫升 、 酯设鹰Ｉ ｇ Ｉ） 含有５０ 、１００ Ｉｘｇ、２００ ｇ、４００ Ｉｘｇ、８００ ｇ的 图４对羟基苯甲酸丙酯的标准曲线 对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯 ３．２方法的精密度实验结果。准确称取标签上标 甲酸丙酯。对羟基苯甲酸甲酯的曲线方程和相关系 有对羟基苯甲酸丙酯的阳性样品甜面酱５．００ ｇ，８ 数见表１所示，标准曲线见图２所示。 次重复，样品进行前处理方法同２．２，色谱条件同 表１ 对羟基苯甲酸甲酯的曲线方程和相关系数 ２．３，样品中对羟基苯甲酸丙酯的检测结果如表４。 表４方法的精密度实验 ／／ 通过对阳性样品甜面酱进行８次实验，实验测 ０ １００ ２００ 圳４００ ５００ ６ＯＯ ７００ ８００ 甲｛譬｝浓度｛ 得的相对标准误差ＲＳＤ＝１．１５％，符合标准要求。 图２对羟基苯甲酸甲酯的标准曲线 ３．３加标回收率实验结果。分析结果的准确度可 对羟基苯甲酸乙酯的曲线方程和相关系数见表 以用回收率来衡量。回收率越接近１００％，测得的 ２所示，标准曲线见图３所示。 结果越接近真值，即准确度越好。同时平行测定结 表２对羟基苯甲酸乙酯的曲线方程和相关系数 果的相对标准偏差可以表明方法的重现性。本研究 采用标准加入法测定方法回收率。通过对样品进行 表５榨菜中三种对羟基苯甲酸酯的加标回收率测定结果 ／／／／ ／／／ ／ ／，／／／／／ ０ ｌ ０ｌ｝ ２００ ３ＯＯ ４‘ｍ ５００ 捌ＮＩ ７００ ｍ 己瞒浓度｛“ｇ／ｍ１） 图３对羟基苯甲酸乙酯的标准曲线 对羟基苯甲酸丙酯的曲线方程和相关系数见表 ３所示，标准曲线见图４所示。 ・６７・ 河北省唇形科野生植物资源价值研究 摘要：通过实地调查及统计分析。对河北省唇 形科野生植物资源的种类、数量、分布、生态环境 通过实地调查获得河北省野生唇形科植物的种 类、分布及资源现状的第一手资料。并通过标本采 集、整理，参考《中国植物志》、 《高等植物图 等进行了研究。结果表明，河北省唇形科植物多数 均具有很高的药用价值、生物学作用及生态价值 关键词：唇形科；野生植物；价值；河北省 鉴》、 《河北植物志》等文献，并借助丰富的网络 资源，对河北省唇形科野生高等植物资源在药用价 值和生物学价值等方面进行了较为全面的分析研究。 ２研究结果 河北省位于东经ｌｌ３。０４’～１１９。５３’，北纬 ３６。０１’～４２。３７’，地处华北，漳河以北，东临渤 海，内环京津，西为太行山地，北为燕山山地，燕 山以北为张北高原，其余为河北平原。属温带大陆 性季风气候，四季分明，热源充沛，年无霜期１２０ ～经过调查发现，多数唇形科植物具有很高的药 用价值及其他生物学价值。 ２．１药用价值 ２４０ ｄ；年均降水量３００～８００ ｍｍ，主要集中在 ２．１．１唇形科植物中有很多活性成分可提取。主要 为二萜类、挥发油、生物碱等。 ２．１．２唇形科植物中很多植物可做为中草药直接入 药。如薄荷、筋骨草、黄芩、活血丹、岩青兰、糙 苏、串铃草、百里香、益母草等。①薄荷。味辛、 干和榨菜中均未含对羟基苯甲酸酯类。 ４结论 ７、８月份。唇形科植物为世界性分布，有２２０属 ６ ０００余种。我国自然分布９９属８００余种，河北省 ２８属７４种１７变种。 １ 研究方法 不同添加浓度回收率的测定，计算标准偏差Ｓ和相 对标准偏差ＲＳＤ。准确称取同一种阴性样品榨菜 平行５份，各５．００ ｇ，３份加入１ ｍｇ／ｍｌ的标样５００ ＩＬｌ，２份加入ｌｍｇ／ｍｌ的标样１ ｍｌ，按上述前处理 方法进行处理，最后都定容至５ ｍｌ，进行加标回收 实验。加标回收率见表５所示。 ３．４样品中对羟基苯甲酸酯类含量的检测结果。 本次试验的检测对象主要是萝卜干和榨菜。样品进 行前处理方法同２，２，色谱条件同２＿３其对羟基苯 本试验采用气相色谱法同时测定食品中对羟基 苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙 酯的含量，以保留时间定性和外标法定量。 本试验方法具有灵敏度高、萃取完全、重现性 好和准确度高的优点，为同时测定三种对羟基苯甲 酸酯类物质含量提供了良好的分析方法。 参考文献 甲酸酯类的谱图如图５和图６。 『１１王勃．ＡＳＥ及ＧＰＣ技术在测定对羟基苯甲酸酯 类防腐剂中的应用【ｌ１．福建农业学报，２０１０ （１）：７７～８１． 『２］张群林，刘毅，李俊，等．食品和药品中对羟基 苯甲酸酯类防腐剂色谱分析法的研究进展『Ｉ１， ‘ｍ ２ ｊ ｓ一…●－Ｋ．Ａ ｑ ｌＩ １２Ａｌｌ＾Ｉ…ｌ ＩＩｌ１７（ｔｌ ＩＩｌｑ．． “ｍｔ ｎ 安徽医药，２００６ ｆ４）：２４１～２４４． 图５萝ｌ、千中对羟基苯甲酸酯类的谱图 ［３】ＧＢ ２７６０—２０１０．食品安全国家标准食品添加剂使 用标准［Ｍ】． 【４１殷德荣．毛细管气相色谱法同时测定食品中多种 防腐剂Ｕ１．实用预防医学，２００５（１）：１６８． 『５１陈利国，黄辉，等．毛细管气相色谱法直接测定 食品中４种对羟基苯甲酸酯【ｌ１．食品与机械， 图６榨菜中对羟基苯甲酸酯类的谱图 ２０１０（１）：６７ ６９，８５． 对羟基苯甲酸甲酯的保留时间为９．２６６ ｍｉｎ， 『６周晶，戴发荣，李拥军．食品中对羟基苯甲酸甲 ６１酯和对羟基苯甲酸丙酯的气相色谱同时测定法 对羟基苯甲酸乙酯的保留时间为１０．５３０ ｍｉｎ，对羟 基苯甲酸丙酯的保留时间为１２．９５６ ｍｉｎ，上面图５ 和图６中除了溶剂峰无水乙醇外，保留时间 ９．７９１ ｍｉｎ处有一峰，非三个目标物峰，所以萝卜 ・【ｌ】．职业与健康杂志，２００５，２１（１）：． ３１００１３ 浙江省质量检测科学研究院 赵素华 郑军科金绍强邢峰 ６８・