生物肥料和杀菌剂联合使用对西瓜枯萎病防治效果研究

ＯＨ　Ｉ　ＮＥＳＥ　ＨＯＲＴ　Ｉ　ＣＵＬＴＵＲＥ　ＡＢＳＴＲＡＣＴＳ　生物肥料和杀菌剂联合使用对西瓜枯萎病防治效果研究　陈传翔　唐懋华　王东升　常义军　（江苏省南京市蔬菜科学研究所，江苏南京２１　００４２）　摘要：针对设施西瓜栽培中枯萎病发生严重的问题，广泛收集西瓜病株，对其致病真菌进行分离和鉴定；对尖　孢镰刀菌进行分离、纯化、保存，利用对峙培养法研究ＢＧＢ生物茵剂对西瓜枯萎病的抑制作用，并对ＢＧＢ生物肥和　恶霉灵或“久安”联合使用对西瓜枯萎病的防治效果进行探讨。结果表明：西瓜生长期以枯萎病菌为主要优势菌，　其病原茵为尖孢镰刀茵；ＢＧＢ生物肥具有对环境安全、无污染，提高西瓜抗枯萎病能力，改善品质、增加产量的作　用，配合高效杀菌剂使用，效果更好。以每６６７　ｍ　施６０　ｋｇ　ＢＧＢ生物／￣＋９４０　ｋｇ有机肥作基肥，在西瓜枯萎病发病　初期（花期），使用“久安”１　５００倍稀释液灌根，１　０　ｄＮ再灌根１次，共２次，即可达到理想的防治效果。　关键词：西瓜ＢＧＢ生物肥；杀茵剂；枯萎病；防效　由于受保护地特殊生态环境条件的影响，近年来设施　西甜瓜栽培的病害在发生种类、数量及危害程度上越来越　严重。由于大多数农户对其症状和发病规律缺乏认识，一　旦发生蔓延，采用常规杀菌剂如多菌灵、甲基托布津、百　的田块，收集西瓜病株多份，对其致病真菌进行分离和鉴　定，并对主要优势菌进行分离、纯化、保存，利用对峙培　养法，研究ＢＧＢ生物菌对西瓜枯萎病的抑制作用　（１）培养基配制　菌清等很难控制，导致西瓜品质下降、产量大减，给瓜农造　成很大的经济损失，严重挫伤瓜农种瓜的积极性，影响了南　京市西瓜产业的健康发展。鉴于生物肥料和杀菌剂试验的结　果，结合南京市蔬菜科学研究所正在开展ＢＧＢ生物肥的推　广，我们对南京地区西瓜土传病害种类调查及鉴定，通过对　ＰＤＡ培养基：２０％马铃薯浸出液ｌ　０００　ｍｌ（２００　ｇ马铃　薯煮沸１５　ｍｉｎ，定容至１　０００　）、葡萄糖２０　ｇ、琼脂１８　ｇ，　１２１℃下灭菌３０　ｒａｉｎ。　尖孢镰刀菌的选择性培养基：Ｋ２ＨＰＯ　１．０　ｇ、ＫＣ１　０．５　ｇ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ　０．５　ｇ、Ｆｅ—Ｎａ—ＥＤＴＡ　０．０１　ｇ、Ｌ一天门　峙培养试验对ＢＧＢ生物菌剂对西瓜枯萎病的抑制作用进行研　究，并对ＢＧＢ生物肥和恶霉灵或“久安”联合使用对西瓜枯　冬酰铵２．０　ｇ、Ｄ一半乳糖２０．０　ｇ、蒸馏水１　０００　ｍｌ，１２１℃　下灭菌２０　ｍｉｎ。　萎病的防治效果进行探讨。现将本试验结果总结如下。　抗生素类物质：二硝基苯（７５％ＷＰ）１．０　ｇ、牛胆汁０．５　ｇ、　Ｎａ２Ｂ４Ｏ７・１０Ｈ２Ｏ　１．０　ｇ、硫酸链霉素０．３　ｇ（培养基用１０％磷　酸调节ｐＨ至３．８土０．２）。　Ｂｉｌａｙ　ｓＮ养基：葡萄糖０．２　ｇ、ＫＨ２ＰＯ４　１．０　ｇ、ＫＮＯ３　１．０　ｇ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２０　０．５　ｇ、ＫＣ１　０．５　ｇ、蔗糖０．２　ｇ、淀粉　０．２　ｇ、蒸馏水１　０００　ｍｌ、琼Ｎ２ｏ　ｇ，１１５￣Ｃ下灭菌３０　ｍｉｎ。　１材料与方法　１．１　供试材料　１．１．１供试土壤试验地点设在南京市蔬菜科技园大棚　内，土壤基本理化性质见表１。　表１供试土壤理化性状　（２）西瓜枯萎病病原菌的分离　从西瓜枯萎病发病部位采集枯萎茎秆，无菌水轻微漂　洗３次，７５％乙醇表面消毒３　ｍｉｎ。无菌水冲洗后放置于灭　菌吸水纸上晾干，转接于尖孢镰刀菌选择性培养基上，　２８Ｘ２培养３　ｄ，挑取菌丝进行纯化培养后，低温保存备用。　１．１．２供试药剂　９７％恶霉灵原药；　“久安”；７５％百菌清　可湿性粉剂。　（３）西瓜枯萎病病原菌的显微鉴定　将分离到的病原菌菌株接种于ＰＤＡ平板上，２８￣Ｃ培养３　ｄ　后，肉眼观察菌落形态及色素，显微观察分生孢子、厚垣　１．１．３供试生物有机肥北京嘉博文ＢＧＢ生物肥（由优势　菌种芽孢菌、放线菌、乳酸菌、酵母菌等十几种菌种组成，　是来源于土壤的复合微生物菌）。　１．１．４供试品种西瓜品种为‘早佳一８４２４’非嫁接苗，　于２００９年４月１５日定植。　孢子等性状，并依据Ｂｏｏｔｈ　ｓ镰刀菌分类标准进行鉴定。　（４）对峙培养试验　制备ＰＤＡ平板，用打孔器（直径５　ｒａｍ）在培养３　ｄ的供　试菌剂和西瓜枯萎病菌菌落边缘打取菌龄相同的菌块，分　别移植在平板相对的两侧，相距５～６　ｃｍ，倒置在２８℃恒　１．２试验方法　１．２．１西瓜菌株的分离鉴定及对峙试验在连作障碍严重　温培养箱内培养。培养一段时间后，观察ＢＧＢ菌剂对病原　菌的抑制作用，重复３次，以仅接种西瓜病菌株为对照。　１．２．２生物肥料和杀菌剂联合使用田间试验试验设５个　处理，即：　第一作者简介：陈传翔（１９６３－），男，高级农艺师；主要从事植　物保护方面的研究及推广　处理１：每６６７　ｍ２Ｎ６０　ｋｇ　ＢＧＢ生物Ｂ５＋９４０　ｌ（ｇ有机肥　一４２一　中国园艺文摘２０　１　１年第１０期　作基肥；　根据形态排除常见腐生真菌，对其余５０份分离真菌进行鉴　定与归类（见表２）。通过分析发现，南京地区西瓜生长期根　部病害分离到６种致病真菌，以枯萎病菌为主要优势菌。依　据Ｂｏｏｔｈ　ｓ镰刀菌分类鉴定标准从菌落形态、色素、菌丝形　处理２：每６６７　ｍ　施６０　ｋｇ　ＢＧＢ生物肥＋９４０　ｋｇ有机肥　作基肥，定苗时使用９７％恶霉灵３　０００倍稀释液灌根１次，　３０　ｄ后再灌根１次；　处理３：每６６７　ｍ　施６０　ｋｇ　ＢＧＢ生物）］Ｅ＋９４０　ｋｇ有机肥　态、分生孢子特征等方面进行鉴定，确定该菌株为尖孢镰　刀菌。　作基肥，于开花结果期使用“久安”１　５００倍稀释液灌根，　１０　ｄ后再灌根１次；　处理４（ＣＫ　）：每６６７　ｍ　施１　０００　ｋｇ有机肥，于开花结　果期使用７５％百菌清６００倍稀释液灌根，１０　ｄ后再灌根１次，　处理５（ＣＫ２）：每６６７　ｍ　施１　０００　ｋｇ有机肥，于开花结　果期灌等量清水。　２．２　ＢＧＢ生物菌对西瓜枯萎病的抑制作用　试验结果表明：ＢＧＢ生物菌对西瓜枯萎病有一定的抑　制作用（见表３）。　表３　ＢＧＢ生物菌对西瓜枯萎病的抑制作用　每处理均设３次重复，小区面积２０　ｍ　，随机区组排列。　ＢＧＢ生物肥与有机肥拌均匀后作为基肥施入土壤，化学杀　菌剂稀释后于开花结果期灌根，其他无机肥的施肥水平相　同，管理一致。当瓜长至拳头大小时，调查小区内所有植　株发病情况，采收时取西瓜样品进行品质分析并测产。　Ｒ，一Ｒ１　Ｉ（％）＝——Ｘ　１００　Ｒ２　２结果与分析　２．１　西瓜菌株的分离鉴定　在生长田块中共采集病样１００份，分离出２００余份真菌，　表２　西瓜生长期根病病原种类及比例　式中：Ｒ　为对照枯萎病菌的菌落半径（ｃｍ），Ｒ　为处理　枯萎病菌的菌落半径（ｃｍ）；Ｉ为抑菌率（％）。　２．３不同处理对西瓜防病和产量的影响　试验结果表明：单独使用ＢＧＢ生物肥对西瓜枯萎病有　较好的防效，与杀菌剂联合使用效果更佳。其中ＢＧＢ生物　肥与“久安”灌根这一处理的防效最佳，对西瓜枯萎病的　防效达Ｎ８５．２％，且产量也最高，与对照比差异达显著水平　（见表４）。　２．４不同处理对西瓜品质的影响　试验结果表明：施生物肥或生物肥配合杀菌剂施用，　与对照比西瓜的可溶性糖含量提高，ＢＧＢ生物肥与“久安”　灌根这一处理的效果最好（见表４）。　表４不同处理对西瓜枯萎病防效、产量和品质的影响　注：表中小写字母表示处理间差异显著性（ｐ＜０．０５）。　３结论　西瓜生长期以枯萎病菌为主要优势菌，其病原菌为尖　杀菌剂使用效果更好。以每６６７　ｍ　施６０　ｋｇ　ＢＧＢ生物肥　＋９４０　ｋｇ有机肥作基肥，在西瓜枯萎病发病初期（花期），使　用“久安”１　５００倍稀释液灌根，１０　ｄ后再灌根１次，共２　孢镰刀菌，ＢＧＢ生物肥具有对环境安全、无污染，提高西　瓜抗枯萎病能力，改善品质、增加产量的作用，配合高效　次，即可达到理想的防治效果。　（上接１０７页）　热带雨林物种无疑是一个很好的尝试和行之有效的办法，　有着极为重要的意义。　引进热带雨林绿化种植，建立雨林独特植物园和奇异　雨林景观，为城市居民进行科学普及教育提供就近的学习　园地，培养人们热爱自然、回归自然的朴素唯物主义观念，　为顺利实施生态标志性工程、生物多样性保护工程、绿色　通道工程、退耕还林工程等生态工程提供切实可行的教育　手段。　一４３—