维普资讯 http://www.cqvip.com ・２８・ 里堕塑 兰垄查 ！ 月第３５卷第１期 Ｊ Ｉｎｔ Ｏｂｓｔｅｔ Ｇｙｎｅｃｏｌ，Ｆｅｂ．２００８，Ｖｏ１．３５，Ｎｏ．１ ＲＮＡ干扰技术在宫颈癌治疗中的研究进展 郑州大学第一附属医院妇产科（４５００５２）王巍综述摘 要史惠蓉审校 ＲＮＡ干扰（ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ，ＲＮＡｉ）是由外源性双链ＲＮＡ诱发的转录后基因沉默机制（ｐｏｓｔ— ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ，ＰＴＧＳ），能高效特异性抑制突变基因表达，恢复正常基因功能。综述ＲＮＡ干扰作用机制 以及ＲＮＡ干扰技术在官颈癌治疗研究中抑制人乳头状瘤病毒、抗凋亡基因、生长因子、酶和蛋白等方面现状、进展及 其应用前景。 关键词ＲＮＡ干扰小干扰ＲＮＡ短发夹ＲＮＡ宫颈癌基因治疗 宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤。在全球女性 切酶￣ｉｃｅｒ从ｓｉＲＮＡ反义链３’末端结合部位开始降 解ｍＲＮＡ，从而阻止目的基因的表达。 恶性肿瘤中其发病率仅次于乳腺癌。在发展中国家 则居首位，严重威胁妇女生命。近年来通过宫颈癌脱 落细胞学筛查的逐渐开展，有效提高了宫颈癌的检 ＲＮＡｉ技术在宫颈癌治疗中的研究 一、ＲＮＡｉ抑制ＨＰＶ 出率和早期宫颈癌的手术治愈率，但对于进展期宫 颈癌（ＦＩＧＯ，１１Ｉ或Ⅳ期），由于手术切除率低，化疗和 生殖道ＨＰＶ感染在宫颈癌病因中起着重要的 作用，是宫颈癌的主要危险因素。其中的高危型 ＨＰＶ一１６和一１８与宫颈癌发生密切相关。流行病学调 查显示，９０％以上宫颈癌肿瘤组织中存在ＨＰＶ一１６或 ＨＰＶ一１８的核酸序列。ＨＰＶ一１６和ＨＰＶ一１８的活性变化 依赖于Ｅ６和Ｅ７病毒基因的功能。在宫颈癌的发生 发展、维持肿瘤恶性表型中起重要作用，Ｅ６和Ｅ７基 因在ＨＰＶ感染所致宫颈癌细胞中过表达。导致Ｐ５３ 及Ｒｂ蛋白持续失活，严重干扰Ｐ５３和Ｒｂ蛋白对细 胞周期激活一停滞状态的调控。使Ｐ５３蛋白介导的细 放疗的毒副作用大，疗效仍难令人满意。近期研制的 预防宫颈癌的人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）疫苗也仅适用 于尚未感染ＨＰＶ病毒者，甚至尚无性生活经历的年 轻人群，因此，寻找一种新的治疗方法已成为目前宫 颈癌治疗中的一个重要课题。ＲＮＡ干扰（ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ。ＲＮＡｉ）是由外源性双链ＲＮＡ（ｄｏｕｂｌｅ— ｓｔｒａｎｄｅｄ ＲＮＡ，ｄｓＲＮＡ）诱发的转录后基因沉默（ｐｏｓｔ— ｒｔｎｓｃｒｉａｐｔｉｏｎａｌ ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ，ＰＴＧＳ）机制，能高效特 异性地抑制突变基因表达而对正常基因功能无影 胞凋亡降低，细胞进入Ｓ期并活跃增殖。Ｙａｍａｔｏ等［ ］ 构建了以ＨＰＶ一１８ Ｅ６为靶点的ｓｉＲＮＡ。分别转染 ＨＰＶ一１８阳性宫颈癌ＨｅＬａ和ＳＷ７５６细胞系。使Ｅ６ 基因表达抑制。诱导了肿瘤细胞凋亡。Ｆｕｊｉｉ等［４］在体 外将以ＨＰＶ一１８ Ｅ６和Ｅ７基因为靶点的ｓｉＲＮＡ转染 响，有望为肿瘤基因治疗带来新希望。 ＲＮＡｉ作用机制 ＲＮＡｉ是一种在动植物中广泛存在的由外源性 双链ＲＮＡ分子（ｄｏｕｂｌｅ—ｓｔａｎｄｅｄ ＲＮＡ。ｄｓＲＮＡ）诱导 同源序列ｍＲＮＡ的特异性降解，导致基因沉默（ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ）的现象。即ＰＴＧＳ。ＲＮＡｉ诱导基因沉默的机 制为：导人生物体内的ｄｓＲＮＡ在ＡＴＰ供能下被细胞 内的多结构的ＲＮａｓｅ １１１蛋白（Ｄｉｃｅｒ ｒｉｂｂｏｎｕｃｌｅａｓｅ。 Ｄｉｃｅｒ ＲＮａｓｅ）［１ 切割成２１ｎｔ～２３ｎｔ的小干扰ＲＮＡ （ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡ，ｓｉＲＮＡ）片段，转染至靶细胞 后与细胞内的一些蛋白和酶如ＭＵＴ一７。ＲＥＤ一１，ＰＡＺ 宫颈癌细胞，使Ｅ６和Ｅ７ ｍＲＮＡ表达水平降低，Ｒｂ 蛋白、Ｂ一半乳糖苷酶表达增加，肿瘤细胞生长抑制； 在体内将以靶向ＨＰＶ一１８ Ｅ６及Ｅ７基因的ＨＰＶ一１８ Ｅ６和Ｅ７ ｓｉＲＮＡ瘤内注射成功地抑制了肿瘤细胞的 生长。肿瘤体积明显缩小。Ｋｕｎｅｒ等 应用ＲＮＡｉ技 术沉默感染ＨＰＶ宫颈癌细胞中的ＨＰＶ Ｅ６和Ｅ７基 因。在分子水平分析了参与宫颈癌细胞凋亡调控，纺 锤体构成，细胞周期调节等多个基因的功能。Ｖｏｇｔ 等＿６］用ＲＮＡｉ技术靶向作用于ＨＰＶ一１６阳性宫颈癌 细胞中的Ｅ６基因。抑制Ｅ６基因表达，可激活线粒 体膜表面促凋亡基因Ｂａｘ活性。使线粒体膜通透性 增加，释放细胞色素Ｃ（ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｃ）人胞质，激活 ｃａｓｐａｓｅ ３。恢复肿瘤细胞凋亡表型。Ｌｅａ等［ 构建了 针对ＨＰＶ一１８ Ｅ７基因的ｓｉＲＮＡ。转染ＨＰＶ １８阳性 蛋白。ＤＮＡ和ＲＮＡ螺旋酶结合形成ＲＮＡ诱导沉默 复合体（ＲＮＡ ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｉｌｌｅｎｃｉｎｇ ｃｏｍｐｌｅｘ，ＲＩＳＣ）口］， ＲＩＳＣ是一种核糖核蛋白。含有１个解旋酶和１个核 酸内切酶ｓｌｉｃｅｒ。受ＡＴＰ激活后。其中的解旋酶将 ｓｉＲＮＡ双链解开活化。以其负链为模版通过碱基互 补配对识别并结合至靶ｍＲＮＡ后。ＲＩＳＣ中的核酸内 收稿日期：２ｏ０７－０５—２９ 修回日期：２００７－０７—１９ 维普资讯 http://www.cqvip.com 国际妇产科学杂志２００８年２月第３５卷第ｌ期 Ｊ Ｉｎｔ Ｏｂｓｔｅｔ Ｇｙｎｅｃｏｌ，Ｆｅｂ．２００８，Ｖｏ１．３５，Ｎｏ．１ ・２９・ 宫颈癌ＨｅＬａ和Ｃ４Ｉ细胞系，不仅能使Ｅ７基因沉 默．还能使Ｅ６基因表达抑制，Ｐ５３蛋白表达增强，Ｒｂ 蛋白磷酸化受阻，肿瘤生长显著抑制。 二、抑制抗凋亡基因的表达 ｓｕｒｖｉｖｉｎ是凋亡抑制蛋白（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ Ｄｒｏｔｅｉｎ，Ｉａｐ）家族成员，具有抑制细胞凋亡，参与细胞 周期调控，促进肿瘤血管形成的功能，其在肿瘤组织 中表达水平升高可降低肿瘤细胞对放、化疗的敏感 性．并与肿瘤的发展和预后密切相关 ｊ。ｓｕｒｖｉｖｉｎ在 宫颈癌组织中呈现过表达，可通过其含有半胱氨酸／ 组氨酸的杆状病毒ＩＡＰ重复序３￣］ｉ（ｂａｃｕｌｏｖｉｒａｌ ＩＡＰ ｒｅｐｅａｔｓ．ＢＩＲｓ）结构域直接或间接干预ｃａｓｐａｓｅ功能 而发挥其抗凋亡作用。Ｕｃｈｉｄａ等 构建针对ｓｕｒｖｉｖｉｎ 基因的ｓｉＲＮＡ表达载体．转染宫颈癌Ｈｅｌａ细胞，使 ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｍＲＮＡ表达水平降低，在体内和体外均显著 抑制了肿瘤细胞增殖，促进了肿瘤细胞凋亡。Ｚａｆｆａ． ｒｏｎｉ等＿ｌＯ 设计合成了以ｓｕｒｖｉｖｉｎ和端粒酶基因为靶 点的ｓｉＲＮＡ表达载体，体外细胞培养和动物肿瘤模 型实验研究均显示．ｓｕｒｖｉｖｉｎ和端粒酶基因表达抑 制．肿瘤细胞凋亡增加，肿瘤体积显著缩小。Ｈｕｙｎｈ 等Ⅲ构建了ｓｕｒｖｉｖｉｎ启动子肿瘤特异性ｓｉＲＮＡ质粒表 达载体．在不同肿瘤细胞株中显著抑制了癌基因的 表达，且对正常细胞基因无抑制作用。 三、抑制肿瘤血管生成 血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）在肿瘤血管生成中 有重要作用．其高水平表达不仅诱导肿瘤血管增生 促进宫颈癌的发生发展．增加宫颈癌的转移潜能，还 与宫颈癌的预后较差有关。在ＲＮＡｉ抗血管生成的 研究中，Ｙｏｏ等ｎ 构建了以溶瘤细胞腺病毒为基础 的靶向作用于ＶＥＧＦ的短发夹ＲＮＡ（ｓｈｏｒｔ ｈａｉｒｐｉｎ ＲＮＡ． ｓｈＲＮＡ）表达载体，体内和体外实验均显示ＶＥＧＦ表 达水平降低，肿瘤血管生成抑制。Ｔａｎｇ等＿ｌ３ 用ＲＮＡｉ 技术成功抑制了宫颈癌Ｃ．３３Ａ．Ｈｅｌａ细胞株中 ＶＥＧＦ和乏氧诱导因子．１ （ＨＩＦ．１ ）的表达．显著抑 制了肿瘤血管的生成。 四、抑制癌症高表达蛋白（ｈｉｇｈｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ，Ｈｅｃ１） Ｈｅｃ１是一种丝氨酸磷酸化蛋白．因在癌症中表 达高于正常组织而命名，是纺锤丝检查点复合物的 重要组分，通过与调控ＧＪＭ期的蛋白间相互作用 在染色体分离中起重要作用，Ｈｅｃ１基因表达抑制， 可使细胞有丝分裂阻滞在中期，Ｇｕｒｚｏｖ等＿ｌ４ 构建了 靶向Ｈｅｃ１基因的ｓｈＲＮＡ表达载体，转染宫颈癌 ＨｅＬａ细胞和恶性胶质瘤Ｕ．３７３．ＭＧ细胞．成功抑制 了目的基因的表达，使细胞周期停滞在有丝分裂中 期．诱导了肿瘤细胞凋亡。此外，转染Ｈｅｃ１ ｓｈＲＮＡ 的腺癌裸鼠模型组与对照组相比，肿瘤体积明显 缩小。 五、抑制ｈＷＡＰＬ基因表达 ｈＷＡＰＬ（ｈｕｍａｎ ｗｉｎｇｓ ａｐａｒｔ ｌｉｋｅ）是果蝇ｗａｐｌ （ｗｉｎｇｓ ａｐａｒｔ．１ｉｋｅ）基因同系物，编码调节异染色质结 构的蛋白．ｈＷＡＰＬ ｍＲＮＡ在宫颈癌组织中过表达， 在其他癌组织及正常组织中呈现弱表达，可能在宫 颈癌发生发展，促进肿瘤细胞增殖中起重要作用。 Ｋｕｒｏｄａ等＿１５ 将靶向作用于ｈＷＡＰＬ的ｓｉＲＮＡ转染宫 颈癌ＳｉＨａ细胞，诱导肿瘤细胞死亡，肿瘤生长 抑制。 六、增强放疗、化疗敏感性 放射治疗是晚期宫颈癌患者的主要治疗手段， 可达到与手术类似的治疗效果，可减少高危患者术 后局部复发．但随着放疗疗程增加，其放疗敏感性逐 渐降低。葡萄糖调节蛋白９４（ｇｌｕｃｏｓｅ—ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ．ＧＲＰ９４）属于热休克蛋白９０家族，是一种高 度保守的内质网驻留糖蛋白．肿瘤细胞接受放射线 照射后大量合成。ＧＲＰ９４蛋白高水平表达导致肿瘤 细胞抵抗放射线的杀伤。Ｋｕｂｏｔａ等口 将针对ＧＲＰ９４ 的ｓｉＲＮＡ转染宫颈癌Ｈｅｌａ细胞．抑制了ＧＲＰ９４蛋 白的表达．增强了肿瘤细胞对放疗的敏感性。 多药耐药（ｍｕｈｉｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＭＤＲ）是宫颈癌 患者术前化疗缩小癌灶及术后化疗消除残存癌灶的 主要障碍，ＭＤＲ１编码Ｐ糖蛋白（Ｐ—ｇＰ），是化疗药物 产生耐药最主要的基因．其功能如同泵．把药物从细 胞内排到细胞外。Ｐｉｃｈｌｅｒ等 构建了靶向作用于 ＭＤＲ１的ｓｈＲＮＡ，抑制了ＭＤＲ１ ｍＲＮＡ及Ｐ．ｇＰ蛋白 表达，ＭＤＲ１转染细胞对长春新碱、紫杉醇、阿霉素 化疗的敏感性增强。 簇集蛋白（ｃｌｕｓｔｅｒｉｎ，ＣＬＵ）是异源二聚体硫酸糖 蛋白（ｓｕｌｆａｔｅａｌｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＳＧＰ２２），具有植物血凝素 样促悬浮细胞聚集作用，可能参与凋亡组织的调控、 修复等．其异常表达在肿瘤的发生发展过程中起重 要作用。Ｐａｒｋ等Ｈ。 的研究显示．ＣＬＵ在宫颈癌组织中 呈过表达，在正常宫颈组织中呈现低表达（４．０８对 １－３５，Ｐ＜０．０５），且宫颈癌组织中ＣＬＵ过表达与宫颈 癌细胞对紫杉醇的耐药有关，将ＣＬＵ的ｓｉＲＮＡ转染 宫颈癌ＨｅＬａＳ３细胞，逆转了肿瘤细胞对紫杉醇的耐 药性。 端粒酶（ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ）是一种依赖ＲＮＡ的ＤＮＡ 聚合酶和逆转录酶，通过添加（ＴＩ＇ＡＧＧＧ）ｎ重复序列 维普资讯 http://www.cqvip.com
・３０・ 国际妇产科学杂志２００８年２月第３５卷第１期 Ｊ Ｉｎｔ Ｏｂｓｔｅｔ Ｇｙｎｅｃｏｌ，Ｆｅｂ．２００８，Ｖｏ１．３５，Ｎｏ．１ 到染色体末端来延长端粒长度，阻止端粒丢失。使细 胞增殖过度。在宫颈癌及癌前病变中，端粒酶活性呈 不同程度升高，催化亚单位人端粒酶逆转录酶 （ｈｕｍａｎ ｔｅｌｏｍｅｍｓｅ ｌ＇ｅｖｅｌ￣ｔｍｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ，ｈＴＥＲＴ）ｍＲＮＡ ｔｌｌｅａｎｔｉａｐｏｐｔｏｔｉｃｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｍＥ６ｏｎｃｏｐｌＯ＇－ ｔｅｉｎ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２００６，２５（２９）：４００９－４０１５． ｎａｇａ Ｎ，Ｓａｔｏ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｏｆ｝ｉｆ＇Ｖ Ｉ８ ０ｎ。０ｐｆｏ‘ｅｉＩ１８ ［７］ １ｅａ ＪＳ，Ｓｕｗｉｈ ＲＮＡ ｉｔｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ｃａＩｌｓｅ８ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｃｌｎｌｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ［Ｊ］．Ｒｅｐｒｏｄ Ｓｃｉ，２００７，１４（１）：２０－２８． 表达水平上调，并与高危型ＨＰＶ感染密切相关。 ［８］ Ｉｔ０Ｒ，Ａｓａｍｉ Ｓ，Ｍｏｔｏｓａｓｈｉ Ｓ，ｅｔａ１．Ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅｏｆ ｓｕⅣｉ峨（４）：５６５—５６８． ｍＲＮＡ ｅｘｏ Ｋｕｒｖｉｎｅｎ等［１９Ｊ构建了靶向ｈＴＥＲＴ ｍＲＮＡ序列的发 夹状ＲＮＡ表达载体，体外转染宫颈癌ＨｅＬａ细胞，使 细胞中ｈＴＥＲＴ ｍＲＮＡ表达降低，端粒酶活性受抑。 从而抑制细胞生长，诱导细胞凋亡。Ｎａｋａｍｕｒａ等 将靶向ｈＴＥＲＴ的ｓｉＲＮＡ表达质粒转染宫颈癌细胞。 抑制了端粒酶活性，缩短了端粒长度，细胞凋亡率明 显增加，肿瘤生长抑制，且ｈＴＥＲＴ表达抑制的肿瘤 细胞对化疗及放疗的敏感性增强。 展 望 ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｉｎ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｆｎｅｕｒａｏｂｌａｓｔｏｍａ［Ｊ］．Ｂｉ０ｌ Ｐｈａｒｍ Ｂｕｌｌ，２００５，２８ ［９］ Ｕｃ｝ｄｄａＨ，ＴａｎａｋａＴ，ＳａｓａｋｉＫ，ｅｔａ１．Ａｄｅｎｏｖｉｍａ—ｍｅｄｉａｔｅｄｔｌ￣ｅｒｏｆ ｓｉＲＮＡ ａｇａｉｎｓｔ ｓｕ＿ｒｖｉｉｎ ｉｖｎｄｕｃｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｎｄ ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｉｎｖｉｖｏ［Ｊ］．ＭｏｌＴｈｅｒ，２００４，１０（１）：１６２—１７１． Ｚａｆｆａｒｏｎｉ Ｎ，Ｐｅｎｎａｆｉ Ｍ，Ｆ０ｌｉｎｉ Ｍ．Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ａｎｄ ｓｕｒｏ ［１０］ ｉｖｖｉｎ ａ８ ａｎｔｉｅａｎｅｅｒｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｔａｒｇｅｔｓ ｕｓｉｎｇ ｒｉｂｏｚｙｍｅｓ ａｎｄ ｓｍａｌｌ—ｉｎ－ ｔｅｆｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡｓ［Ｊ］．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｄ Ｂｉｏｌ，２Ｏ０７，３６（１）：２３９～２６３． Ｈｕｙ￣ｈＴ，Ｗａｌｃｈｌｉ Ｓ，Ｓｉｏｕｄ Ｍ．Ｔｒａｎｓｃｆｉｐｔｉｏｎａｌｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆｓｍａｌｌｉｎｔｅｒ－ ｆｅｔｉｎｇ ＲＮＡｓ ｉｎｔｏ ｅｆｌｎｅｅｒ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｂｉｃｈｅｍ Ｂｉｅｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｎｍｍｎ， ２Ｏ０６，３５０（４）：８５４—８５９． 肿瘤的发生是一种多基因协同作用的结果。 ＲＮＡｉ技术可同时阻断多个癌基因转录表达。不干扰 正常基因功能，在研究原癌基因、抑癌基因功能方面 发挥了巨大作用。大量实验结果显示，ＨＰＶ．１６和 ．［１２］ Ｙｏｏ ＪＹ，Ｋｉｍ ＪＨ，ＫｗｏｎＹＧ，ｅｔ ａ１．ＶＥＧＦ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｓｈｏｒｔ ｈａｉｒｐｉｎＲＮＡ— ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｏｎｃｏｌｙｔｉｃ ａｄｅｎｏｖｉｍｓ ｅｌｉｃｉｓ ｔｐｏｔｅｎｔ ｉｎｈｉｂｉｉｔｏｎ ｆ ｏａｎｇｉｎｇｅｎｅｓｉｓ ｎｄ ａｔｕｎｌｏｒｇｒｏｗｔｈ［Ｊ］．ＭｏｌＴｈｅｒ，２００７，１５（２）：２９５—３０２． ［１３］ ＴａｎｇＸ，ＺｈａｎｇＱ，Ｎｉｓｈｉｔａｎｉ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｈｕｍａｎ － ｍａｖｌｍｓ ｔｙｐｅ １６ ｏｎｃｅｐｒｏｔｅｉｎｓ ｅｎｈａｎｃｅ￥ｈｙｐｏｘｌａ－ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｍ＂１ ａｌ— １８，ｓｕｒｖｉｖｉｎ，ＶＥＧＦ，Ｈｅｃ１，ｈＷＡＰＬ和端粒酶等肿瘤 相关基因的ＲＮＡｉ，能抑制宫颈肿瘤细胞增殖，阻遏 ｐｈａｐｒｏｔｅｉｎ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ・ ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＣＡｉｎ Ｃａｎｃｅｒ ｌｉｅｓ， ２ｏｏ７，１３（９）：２５６８－２５７６． 肿瘤血管生成，逆转肿瘤细胞耐药性，增强放疗敏感 性，诱导肿瘤细胞发生凋亡，降低宫颈癌恶性表型。 ［１４］ Ｇｔａ＇ｚｏｖ ＥＮ，ｈ＃ｅｒｄｏ Ｍ．ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ａｇａｉｎｓｔ Ｈｅｅｌ ｉｎｈｉｂｉｓｔ ｔｎ－ ｍｏｔ ｇｒｏｗｔｈｉｎｖｉｖｏ［Ｊ］．ＧｅｎｅＴｈｅｒ，２００６，１３（１）：１＿７． 目前，ｓｉＲＮＡ的具体作用机制尚未完全明了，如何使 ＲＮＡｉ抑制癌基因效果更稳定持久以应用于临床治 ［１５］ Ｋｕｒｄａ Ｍ，Ｋｉｏｙｏｎｏ Ｔ，Ｏｉｋａｗａ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｐａｐｉＵｏｍａｖｉｍｓ Ｅ６ ｎｄ Ｅ７ ｉａｎｄｕｃｉｂｌｅ ｏｎｃｏｇｅｎｅ，ｈＷＡＰＬ，ｅｘｈｉｂｉｓ ｐｏｔｔｎｔｅｉａｌ ａｓ ａ ｈｅｒａｐｅｕ－ ｔ疗还有待进一步研究。随着研究的深入，ＲＮＡｉ技术 将会为宫颈癌的基因治疗带来新希望。 参考文献 ［１］ＴｉｊｓｔｅｌⅡｌａｒＩ Ｍ，Ｐｌａｓｔｅｒｋ ＲＨ．Ｄｉｃｅｒｓ ａｔ ＲＩＳＣ；ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆＲＮＡｉ ［Ｊ］．ｃｅｌ１，２ｏｏ４，１１７（１）：１－３． ｉｔｃ ｔａｒｇｅｔ［Ｊ］．ＢｒＪ Ｃａｎｃｅｒ，２００５，９２（２）：２９０－２９３． ［１６］ ＫｕｂｏｔａＨ，ＳｕｚｕｋｉＴ，Ｌｕ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＲＰ９４ｐｍ－ ｔｅｉｎｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｓｅｎｓｉｉｔｉｔｖｙｔｏＸ－ｒａｙｓｉｎ ｃｅｒｖｉｃａｌ Ｐ￣ｒｌｏ ｅｅｌ＂ｃｅｌｌ ｉｌｎｅｓ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｂｉ０ｌ，２ｏｏ５，８１（９）：７０１－７０９． ｅｒＡ，ＺｅｌｃｅｒＮ，Ｐｒｉｏｒ ＪＬ，ｅｔａ１．ＩｎｖｉｖｏＲＮＡｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ［１７］ Ｈｅｈｌ［２］ Ｙ，Ｄｕ Ｔ，Ｈａｌｅｙ Ｂ，ｅｔ ａ１．ＲＩｓＣ ａｓｓｅｍｂｌｙ ｄｅｆｃｔｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ＤｒｏｓｏｐｈｉｌａＲＮＡｉｍｕｔａｎｔ ａｍｒｉｔｇｅ［Ｊ］．Ｃｅｌｎｌ，２００４，１１６（６）：８３１—８４１． ａｂｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＭＤＲ １ Ｐ－ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ［Ｊ］．Ｃａｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２ＯＯ５，ｌ１ （１２）：４４８７－４４９４． ｋ ＤＣ，Ｙｅｏ ＳＧ，Ｓｈｉｎ ＥＹ，ｅｔ ａ１．Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎ ｃｏｎｆｅｒｓ ｐａｃｌｉｔａｘｄ ｒｅｓｉｓ－ ［１８］ Ｐａｒ［３］ＹａｍａｔｏＫ，Ｆｅｎ Ｊ，ＫｏｂｕｃｈｉＨ，ｅｔａ１．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈｉｎ ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｍｓ １８－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｉｌｓ ｂｙ Ｅ６ ｓｉＲＮＡ［Ｊ］． ＣａＩ ｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ，２００６．１３（３）：２３４—２４１． ｔａｎｅｅ ｉｎ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｇｙｎｅｃｏｌ Ｏｎｃｏｌ，２ＯＯ６，１０３（３）：９６－１００． ［１９］ Ｋｕｒｖｉｎｅｎ Ｋ，ＳＤｊ［ｉｎｅｎ Ｓ，Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ Ｂ．Ｌｏｎｇ－ｔｅａｍ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＨｄａｃｅｌ ｃｌｏｎｅｓ，ｔｍｍｆｅｃｔｅｄｗｉｔｈ ａｎ ｅｘｐｒｅ￣ Ｅ４］ｒｕｊａ Ｓａｉｔｏ Ｍ，１ｗａｓａｋｉ Ｅ，ｅｔ １ａ．Ｉｎｔｒａｔｕｍｏ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｆｒｅｒｉｎｇ ＲＮＡ－ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｍｓ １８ Ｅ６ ａｎｄ Ｅ７ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ ｉｎｈｉｂｉｓ ｔｓｉｏｎ ｖｅｃｔｏｒ ｃａｒｒｙｉｎｇ ｓｉＲＮＡｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｈＴＥＲＴｍＲＮＡ［Ｊ］．Ｉｎｔ ＪＯｎｃｏｌ， ２００６，２９（１）：２７９—２８８． ｏｍｉＫ，Ｋｙｏ Ｓ，ｅｔａ１．Ｈｌｉｄｅｎｔｉｎｈｉｂｉｉｔｏｎｏｆｈｕｍａｎ ［２０］ ＮａｋａｍｕｒａＭ，Ｍａｓｕｔｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ Ｄ￣ｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｌｐｔａｓｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ＂ｂｙＲＮＡｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ｓｅｍｉ－ ｔｈｅ ｆｃｅｒｖｉｏｃｌ ａｅａｌｌ￣［Ｊ］．ＩｎｔＪＯｎｃｏｌ，２ＯＯ６，２９（３）：５４１－５４８． ［５］Ｋｕｎｅｒ Ｒ，ＶｏｇｔＭ，ＳｕｈｍａｎＨ．Ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌｕｌａｒｔａｒｇｅｓｆｔｏｒｔｈｅ ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｍｓＥ６ ａｎｄＥ７ ｏｎｃｅｇｅｎｅｓ ｂｙＲＮＡｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅａｎｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｏ ａｎａｌｙｓｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｍｏｌ Ｍｅｄ，２００７，８５（１ １）：１２５３—１２６２． ｔｉｚｅｓ ｏａｌｌｅｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ，２０ｏ５，１６（７）：８５９－８６８． ［６］ｖｏｇｔＭ，ＢｕｔｚＫ，ｎｙｉｎａｌｌａ Ｓ，ｅｔａ１．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆＢａｘ ａｃｔｉｖｉｔｙｉｓ ｃｒｕｃｉａｌ