RNF213基因完整敲除纯合子斑马鱼的制备方法和用途

（12）发明专利申请

（21）申请号 CN201910592731.2 （22）申请日 2019.07.03

（71）申请人 中山大学附属第一医院

地址 510080 广东省广州市中山二路58号

（10）申请公布号 CN110396525A

（43）申请公布日 2019.11.01

（72）发明人 盛文利;林晶;杨蜀岚;孙逊沙;温骏;梁杰;张晶晶 （74）专利代理机构 广州三环专利商标代理有限公司

代理人 颜希文

（51）Int.CI

权利要求说明书 说明书 幅图

（54）发明名称

RNF213基因完整敲除纯合子斑马鱼的制备方法和用途

（57）摘要

本发明公开了一种rnf213a基因完整敲除

斑马鱼突变体的制备及其应用；设计针对斑马鱼rnf213a基因的TALEN序列；构建其左右臂质粒，并体外转录出相应的mRNA；将TALEN左右臂mRNA混合并注射到斑马鱼胚胎中；注射后的胚胎养至F0成鱼与野生型成鱼交配，将携带有rnf213a基因突变的胚胎养至F1成鱼；F1代鱼剪尾基因型鉴定发现存在两种杂合子基因型：+2bp及‑7bp；将杂合子与野生型成鱼外交3代，净化

其遗传背景后，再将同种基因型的杂合子杂交得到纯合子两种基因型：+2bp及‑7bp。纯合子与纯合子杂交得到的胚胎进行表型观察发现存在与人相似的烟雾病表型及海绵状血管瘤表型。本发明通过TALEN基因编辑技术，能够快速高效的建立rnf213a基因完整敲斑马鱼品系，利用该模型能够开展针对烟雾病或/和海绵状血管瘤的药物筛选工作。

法律状态

法律状态公告日

2019-11-01 2019-11-01 2019-11-26

法律状态信息

公开 公开

实质审查的生效

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权利要求说明书

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说明书

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