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蛋白酶活性采用茚三酮比色法测定

来源:九壹网
蛋白酶活性采用茚三酮比色法测定

称取29过lm二筛的风干土样置于IOOml三角瓶中。往三角瓶中加入 0.5ml甲苯,摇匀后放置15分钟。再加入10ml用pH7.4磷酸缓冲液配制的白明胶溶液,将瓶塞紧,小心摇荡。将三角瓶置于30℃恒温箱中,培养24h。培养结束后,将瓶中悬液用致密滤纸过滤至另一三角瓶中。吸取sml滤液于一试管中,加 0.5ml0.IN硫酸和 3ml20%硫酸钠以沉淀蛋白质,然后再过滤到另一试管中。于上述试管中加入lm120/0荀三酮溶液,将混合物仔细摇荡,并在煮沸的水浴上 加热 10min。将着色液转移到50ml容量瓶中,并用蒸馏水稀释至刻度。用光电比色计于56Onm处进行比色测定。实验设无土对照和无基质对照。蛋白酶活性以24h后19土壤中酶促反应后生成的甘氨酸毫克数表示。

中性磷酸酶活性采用磷酸苯二钠比色法测定

取10.00g新鲜土壤(

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