浙江海洋学院大学生生物技能竞赛活动
项 目 申 报 表
项目名称 初步研究嗜盐放线菌的专嗜性 项目类别 研究性实验 项目编号
项目负责人 颜巾斌
项目组成员 曾一鸣 曹萍麟 张娟 肖亮 许则滩 联系电话 669577 /661293 申请日期 2010 年 4 月 17日 海洋科学学院生物技能竞赛组委会制
项目名称 项目类别 完成时间 申请经费 300 初步研究嗜盐放线菌的专嗜性 √1、创新研究 2、发明制作 3、验证实验 4、其他 成果形式 科技小论文 其他经费及来源 项目研究的背景、目的、内容和步骤（本栏填写不够另附页） 背景：尽管科学家对嗜盐放线菌进行了大量研究，但在嗜盐放线多孢菌（Actinopolyspora halophila）（Gochnaner et al., 1975）发表后的相当长时期内却没有任何新的嗜盐放线菌新种发表，直到1991年后才陆续发表了一些新的嗜盐放线菌，尤其是最近几年，研究嗜盐放线菌的机构越来越多，2000年后发表的嗜盐放线菌新种属迅速增加。 目的: 1.掌握从海水中提取嗜盐放线菌 2.初步研究嗜盐放线菌对KCL ，Nacl的专嗜性 3.通过此次嗜盐达到了解嗜盐放线菌的生理机制的目的。 内容：先从舟山海域取海水和晒盐场去底泥，然后在实验室对嗜盐放线菌的提取和培养，，接着取生长期的嗜盐放线菌放入不同浓度梯度的KCL 、Nacl中培养，通过观察放线菌的生长数量来初步判定嗜盐放线菌的偏嗜性，以及较适宜生长浓度。 步骤： 1.材料取材：取2L海水（包含底泥）和适量晒盐场底泥，无菌封装。带回实验室 2.材料各组分测定与记录：包括海水中主要物质的离子浓度,如KCL，Nacl ,硫酸镁，温度，PH，溶解氧含量的测定。
2.培养基配置：本实验根据已有的科技文献资料，采用改良酪素培养基，并设置一系列复合盐浓度梯度差。 标准改良酪素培养基的配制：取葡萄糖10g ，水解酪素0.3g, KNO3 2g ,MgSo4.7H2O 0.05g ，磷酸一氢二钾（） 2g ，氯化钙(Cacl2 )2g ，硫酸铁 10mg 不同比列复合盐150g,琼脂 20g加适量蒸馏水1L，并加热溶解。 PH调节。 3.放线菌的接种分离纯化(不同复合盐浓度培养基) 3.1在超菌工作台下，采用平板稀释划线法 ，接种分离出实验所需的嗜盐放线菌 3.2接着在同浓度的复合盐梯度的培养基下，扩大培养，进行菌种纯化。 4.嗜盐放线菌的筛选：将分离纯化得到的放线菌菌株，制成装片，挑选出纯度较高，形态较好的菌株，即最适生长菌株，并统计最适生长菌株数和总数量。 5.分析实验数据，汇表制图，讨论实验结果。 （项目研究的条件分析（包括研究工作基础、已取得的研究成果及设备条件等）
预期成果形式及去向、经济效益及社会效益分析 研究嗜盐细菌对盐离子的偏嗜性，为后续的科技工作者提供参考。 项 姓名 出生年月 1990.11.16 1990.12 1990.12.22 1988.02.11 1990.12.03 项目内分工 实验操作及分析 取材以及操作 实验操作 实验操作 实验操作 实验操作 所在班级 A08生技 A08生技 A08生技 A08生技 A08生技 A08生技 联系方式 669577 661293 654325 668053 654383 652702 目 颜巾斌 组 许则滩 有 曾一鸣 关 张娟 成 肖亮 员 曹萍麟 19.08.12 情 况 指导教 师 意见 签名 年 月 日 竞赛组 委会意 签名盖章： 见 年 月 日
