XE-2100全自动血液分析仪操作规程(SOP)
1. 仪器简介
Sysmex公司的XE-2100全自动血液分析仪，每小时可检测150个样品，加网织红细胞的检测速度为每小时113个样本。XE-2100除常规检测功能外，还具有有核红细胞（NRBC）、网织红细胞（RET）、造血祖细胞（HPC）、未成熟粒细胞（IG）等的检测功能。XE-2100运用DIFF通道、WBC/BASO通道和MI通道三个专用通道和专用试剂用于白细胞的计数和分类及幼稚细胞的定量检测，使外周血中的异常细胞检测灵敏度高达1%，能有效避免早期白血病的漏检；同时排除了难溶红细胞、血小板聚集、巨大血小板及细胞碎片对白细胞计数的干扰，保证了白细胞计数的准确。另外XE-2100配备了两个血小板检测通道，电阻抗和荧光染色双方法检测血小板可有效排除常见的巨大血小板、血小板聚集、小红细胞、细胞碎片等的干扰，保证了正常血液样本和异常血液样本的结果都具有高度可靠性。
2. 分析原理
2.1RF/DC检测方法：
通过直流电阻的变化测定血细胞的大小，并通过射频电阻测定血细胞内的密度。一个血液样品经过吸液、定量、稀释为指定比，然后输送给相应的检测室。检测室内有一个称为“小孔”的圆孔，两侧均为电极。两个电极之间施以直流电和射频电流。稀释后样品中悬浮的血液细胞通过该孔，使两个电极之间的直流电阻和射频电阻发生变化。通过直流电阻的改变测定血细胞的体积大小，而射频电阻的变化检测血细胞内的密度（细胞核大小与其它信息），这种检测是以电脉冲的形式进行的。根据这些脉冲大小的不同，可得到血细胞
大小和内部密度的二维分布（散点图）。通过对这些分布的检测，可得到各种测量数据。
2.2鞘流DC检测方法（RBC、PLT、HCT）
在该检测器内，样品喷嘴定位在孔的前面且与中心对齐。将稀释后的样品由样品喷嘴推入锥形室以后，由前鞘流内的试剂包裹通过小孔的中心。
通过小孔以后，经过稀释的样品由后鞘流中的试剂包裹送入捕集管中。这样就可以防止该区域的血细胞回流，并防止产生假性血小板脉冲。鞘流方法改善了血液计数的准确性和重现性。同时由于血细胞通过在一条直线上的小孔，所以也可防止产生异常血细胞脉冲。
使用半导体激光器的流式细胞计数方法
使用流式细胞计数法检测细胞和其它生物粒子的物理和化学性质。使用流式细胞计数法只需很少的样品就可对这些细胞和粒子进行检测。
一个血液样品经过吸液和定量、稀释至指定的稀释比，并进行染色。然后将该样品送入流动池中。
这种鞘流装置改进了细胞计数的准确性和重现性。同时，由于血细胞颗粒成行通过该流动池的中心，故而防止产生异常血液脉冲并可减少流动池的污染。
一个半导体激光束通过该流动池照射到血细胞上。前向散射光由光电二极管接收，侧向散射光和侧向荧光则由光电倍增管接收。光信号被转化为电脉冲，从而可以得到有关血液细胞的信息。
前向散射光和侧向散射光
当一束激光照射到血细胞颗粒上时，就产生光散射。XE-2100检测前向散射
光和侧向散射光，前向散射光的强度反映血液细胞体积大小。侧向散射光的强度反映细胞内部（如细胞核的体积大小）的信息。
侧向荧光
当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时，就产生比入射光波长更长的光。随着染色集团浓度的增加，荧光强度也增加。通过测量荧光强度，可以得到有关血细胞染色的信息，XE-2100检测侧向荧光。
2.3SLS-血红蛋白测定法
在稀释的血液中加入溶血素，红细胞中的血红蛋白被释放出来。血红蛋白在月桂洗硫酸钠的作用下，二价铁转变成三价铁，并与月桂洗硫酸钠结合形成SLS-Hb，SLS-Hb进入血红蛋白检测系统。测定SLS-Hb在555nm波长下的吸光度值，并通过与加入样品前稀释液的吸光度进行对比进行计算。
2.4计算（红细胞指数）
红细胞指数（MCV、MCH和MCHC）通过RBC计数（RBC）、Hb浓度（HGB）和红细胞压积（HCT）的值计算出。计算公式如下：
MCV（fl）＝ HCT×1015
RBC/L
MCH (pg)＝ HGB(g/L)×1012
RBC/L
MCHC(g/L)＝ HGB(g/L)
HCT
3. 基本资料与性能参数
Sysmex XE-2100提供32项参数的结果，各检测参数和方法见表1。
表1. Sysmex XE-2100各检测参数和方法
参数 首字母缩写 检测方法
白细胞 WBC 流式细胞计数
红细胞 RBC 鞘流DC检测方法
血红蛋白 HGB SLS血红蛋白检测法
红细胞比积 HCT RBC累积脉冲高度检测法
平均红细胞体积 MCV 由RBC和HCT算出
平均红细胞血红蛋白量 MCH 由RBC和HGB算出
平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC 由HCT和HGB算出
血小板 PLT 鞘流DC检测方法
中性粒细胞百分比 NEUT%
流式细胞计数
淋巴细胞百分比 LYMPH%
单核细胞百分比 MONO%
嗜酸性粒细胞百分比 EO%
嗜碱性粒细胞百分比 BASO%
中性粒细胞数 NEUT#
淋巴细胞数 LYMPH#
单核细胞数 MONO#
嗜酸性粒细胞数 EO#
嗜碱性粒细胞数 BASO#
红细胞分布宽度－标准差 RDW-SD 根据红细胞直方图算出
红细胞分布宽度－变异系数 RDW-CV 根据红细胞直方图算出
血小板分布宽度 PDW 根据血小板直方图算出
平均血小板体积 MPV 根据血小板直方图和PLT算出
大血小板比率 P-LCR 根据血小板直方图算出
血小板压积 PCT 根据血小板直方图算出
网织红细胞百分比 RET%
流式细胞计数
网织红细胞数 RET#
幼稚网织红细胞比率 IRF
低荧光强度网织红细胞比率 LFR
中荧光强度网织红细胞比率 MFR
高荧光强度网织红细胞比率 HFR
有核红细胞百分比 NRBC%
有核红细胞数 NRBC#
4. 试剂
4.1稀释液（CELLPACK）
试剂品牌：Sysmex 代码：PK-30L 包装规格：20L
试剂成份：
氯化钠 6.38g/L
硼酸 1.00g/L
四硼酸纳 0.20g/L
EDTA-K2 0.20g/L
储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为15~30℃。
使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。
安全事项：在使用前确认是否有污染或颜色变化，一经发现，请速更换。如出现冻结现象，将其解冻，混匀后使用。
注意事项：注意防尘。
4.2鞘液（CELLSHEATH）
试剂品牌：Sysmex 代码：SE-90L 包装规格：20L
试剂成份：
氯化钠 7.1g/L
氨丁三醇缓冲液 2.0g/L
乙二胺四乙酸二钾 0.20g/L
表面活性剂 0.8g/L
储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为5~30℃。
使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。
安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的
医疗措施。
注意事项：若试剂有污染或颜色的变化，更换试剂。如出现冻结现象，将其解冻、混匀后使用。
4.3嗜碱细胞溶血素（STROMATOLYSER-FB）
试剂品牌：Sysmex 代码：FBA-200A 包装规格：5L
试剂成份：
非离子表面活性剂 0.4%
储存条件：须存储于干净的环境中，适宜温度为5~30℃。
使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。3.5安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的医疗措施。
注意事项：在试剂使用前须确认是否有污染或颜色的变化，一经发现，须速更换。若试剂出现冻结现象，用前将其解冻充分混匀后使用。
4.4白细胞分类溶血素（STROMATOLYSER-4DL）
试剂品牌：Sysmex 代码：FFD-200A 包装规格：5L
试剂成份：
非离子表面活性剂 0.18%
有机季铵盐 0.08%
储存条件：须存储于干净的环境中，适宜温度为5~30℃。
使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。
安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的医疗措施。
注意事项：在试剂使用前须确认是否有污染或颜色的变化，一经发现，须速更换。若试剂出现冻结现象，用前将其解冻充分混匀后使用。
4.5白细胞分类染液（STROMATOLYSER-4DS）
试剂品牌：Sysmex 代码：FFS-800A 包装规格：42ml×3袋
试剂成份：
聚次甲基染料 0.002%
甲醇 3.0%
1，2-亚乙基二醇 96.9%
储存条件：须存储于干净的环境中，避光，适宜温度为2~35℃。
使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。
安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的医疗措施。
注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。但避免冻结。
4.6有核红细胞染色液（STROMATOLYSER－NR）
试剂品牌：Sysmex 代码：SNR-800 包装规格：12ml×3袋
试剂成份：
聚次甲基染料 0.01%
1，2-亚乙基二醇 99.9%
储存条件：须存储于干净的环境中，避光，适宜温度为2~35℃。
使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。
安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的医疗措施。
注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。但避免冻结。
4.7血红蛋白溶血素（SULFOLYSER）
试剂品牌：Sysmex 代码：SLS-220A 包装规格：5L
试剂成份：
月桂洗硫酸钠 1.7g/L
储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为5~30℃。
使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。
安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的医疗措施。
注意事项：若试剂有污染或颜色的变化，更换试剂。如出现冻结现象，将其解冻、混匀后使用。
4.8幼稚细胞溶血素（STROMATOLYSER－IM）
试剂品牌：Sysmex 代码：SIM-220A 包装规格：10L
试剂成份：
氢氧化钠 0.03%
氯化钠 0.41%
非离子表面活性剂 2.4%
储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为5~30℃。
使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。
安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的医疗措施。
注意事项：若试剂有污染或颜色的变化，更换试剂。如出现冻结现象，将其解冻、混匀后使用。
4.9清洁剂（CELLCLEAN）
试剂品牌：Sysmex 代码：CL-50 包装规格：50ml
试剂成份：
次氯酸钠（有效氯浓度为5%）
储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为1~30℃。
使用期限：在失效期前使用。
安全事项：本品为强碱性洗涤剂，避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的医疗措施。
注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。若试剂发生凝固，须替换。
4.10有核红细胞溶血素（STROMATOLYSER-NR）
试剂品牌：Sysmex 包装规格：1L
试剂成份：乙二醇
储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为1~30℃。6．10．4．使用期限：在失效期前使用。
安全事项：避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑
必要的医疗措施。
注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。若试剂发生凝固，须替换。
4.11网织红细胞稀释液（RETSEARCH-II Dilution）
试剂品牌：Sysmex 包装规格：1L
试剂成分：甲醇和乙二醇
储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为1~30℃。
使用期限：在失效期前使用。
安全事项：避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的医疗措施。
注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。若试剂发生凝固，须替换。
4.12网织红细胞染液（RETSEARCH-II Stain）
试剂品牌：Sysmex 包装规格：12ml
试剂成分：聚次甲基染料。
储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为1~30℃。
使用期限：在失效期前使用。
安全事项：避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的医疗措施。
注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。若试剂发生凝固，须替换。
试剂的使用：以上所有试剂每瓶试剂开封后应注明启用日期、失效期（开瓶后2个月，或有效期内）并附签名。
5. 授权操作人
临检室×××，×××，×××
6. 仪器的常规操作
开机后先做质控，质控通过后进行样本检测。标本验收合格,经接收标号打印XE-2100样本分配单,待检。
6.1标本检测：为了验证手动与自动模式，每日随机取2份新鲜血标本进行close与open模式结果比对，以close为靶值（close-open）/close来计算偏移（CV%）符合比对要求，以上检测通过后进行病人样本检测。
手动模式 进样器模式
准备就绪
（屏幕显示准备就绪（READY）信息，READY LED绿灯亮）
按[手动（MANUAL）]键 将样品管放在样品架上
在数字键上输入标本号 将样品架放在进样器中
按[V]键，激活“模式选择（Mode）” 按[进样器（Sampler）]键
按[<]和[>]光标键
选择[1.手动模式（Manual）] 在数字键上输入标本号
颠倒试管，彻底混匀样品
取下盖子 按[V]键，激活“样品架编号－管位置号（Rack-Tube）”
将样品管放在取样针中 在数字键上输入样品架号和管位置号
按开始键
按[Sampler]键
当READY LED灯灭、连续两次发出短促的蜂鸣声，取下样品管
仪器进行检测
准备就绪
（屏幕显示准备就绪（READY）信息，READY LED绿灯亮）
准备下一个/批样品，重复以上步骤进行检测
6.2在进样器模式进行急诊分析
按[进样器（Sampler）]键终止进样器运行→屏幕显示“STAT READY”→按[手动（MANUAL）]键→在数字键上输入标本号→手工模式分析样本→分析完毕，屏幕显示“STAT READY”→按[进样器（Sampler）]键，恢复进样器操作。
操作中注意个人安全，如标本需打开盖子，应戴好防护镜口罩或在有机玻璃挡板后打开。
6.3质控品（4个）：
6.3.1质控品品牌：Sysmex（高、中2个水平e-CHECK）
6.3.2储存条件： 2℃～8℃（每日须复核一次冰箱温度）。
6.3.3使用期限：临检中心质控开瓶后XX天；Sysmex e-CHECK质控开瓶后14天。
质控品开启后应注明开启日期，失效期并签名。
6.3.4质控频率：每天开机后在标本检测前进行一次质控品的分析（4个质控品均做）。
质控频度验证每年一次，由岗位操作员完成。
6.3.5质控操作：从冰箱中取出e-CHECK，使用前检查有效期及状况（如极度溶血或失效，应及时更换）,在室温环境下（18～30℃）静置15分钟。保持瓶子直立状态在双掌中轻轻滚动20次，将其颠倒再滚动20次，再将质控品上下颠倒20次混匀至红细胞完全混合，在质控模式下进行检测。
6.3.6质控期望值：至少满足2个e-CHECK在靶值±极限值内，记录质控结果后开始做标本。
失控时应采取的措施：质控结果超出期望值时，需查找原因，检查质控品是否在有效期内，过期或近过期需更换新的质控品,检查试剂情况，是否需更换。再检查仪器的各项参数是否在控，如各项检查操作后质控仍失控则联系工程师，责任人需通知组长。与此同时联系急症病人相关医生，如为急诊标本及时送往门急诊化验室检测。直至质控通过，开始做标本。
每次失控必须分析原因，记录处理过程并签名。失控记录夹入指定的文件夹内保存，保存期为二年。
6.3.7更换批号后靶值设定：取开始10次QC结果，计算均值，为靶值，靶值应落在厂商提供的范围内，以累计6个月CV%均值（或近两个月CV%较大值），通过均值乘以
CV%=1SD, 质控范围设定为2.7SD。由组长或组长指定人员负责计算。
6.3.8定期打印质控曲线，曲线上注明使用质控品的批号和效期，并签上责任人姓名。
所有室内质控打印及记录夹入指定的文件夹内保存，保存期为二年。
每日由操作员记录质控状况与X-barm记录于记录本。
7. 仪器保养
7.1每日保养：
正常开机、压缩机防逆流瓶液体检查、背景检测通过、温度报警、工作时间（h）、使用情况、关机正常记录在XE-2100使用维护记录。
关机程序：分析完毕，屏幕显示“Ready”字样，READY LED绿灯亮时，按[Shutdown]键。将CELLCLEAN放入手动移液针上，按START开关。在READY LED 灯灭，且蜂鸣声停止时，移开CELLCLEAN。
7.2月保养或需要时进行的维护（由工程师进行）：
清洗选旋转阀托盘。
清洗冲洗块。
清洗穿刺取样器托盘。
清洗IMI检测器空。
清洗RBC检测器孔。
去除光检测器盒中流动池内的空泡。
清洗光检测器盒中的流动池。
激光单元外观检查。
8. 参考资料
1.叶应妩，王毓三. 全国临床检验操作规程[M]. 第二版. 江苏：东南大学出版社，1997. 5-7.
2.Sysmex XE-2100中文操作手册。
